组织或全血抽提基因组DNA裂解液配方

组织或全血抽提基因组DNA 裂解液配方

裂解液配方： 10mM Tris-Cl (pH 8.0)、15mM NaCl、10mM EDTA (pH8.0)、0.4%SDS。 200 μg/ml蛋白酶K （使用之前加入）。

（1）1M Tris-Cl (pH8.0)

800ml 水中溶解121.1g Tris碱，待溶液冷却至室温后加入浓盐酸调节pH 至8.0(约需42ml 浓盐酸) ，定容至1L ，高温高压灭菌备用。

（2）5M 氯化钠

800ml 水中溶解292.2g 氯化钠，加水定容至1L ，高温高压灭菌备用。

（3）500 mM EDTA (pH8.0)

800ml 水中加入186.1g 二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na 。2H2O ），磁力搅拌助溶，用NaOH 调节pH 至8.0（约需20g NaOH 颗粒），定容至1L ，高温高压灭菌备用。（EDTA 二钠盐需要调节pH 至8.0时才能完全溶解）。

（4）10% SDS

900ml 水中溶解100g SDS加热助溶，加浓盐酸调节pH 至7.2，加水定容至1L ，无需灭菌。

（5）蛋白酶K ；

灭菌水配置成20mg/ml，-20℃保存备用。

组织或全血抽提基因组DNA 裂解液配方

裂解液配方： 10mM Tris-Cl (pH 8.0)、15mM NaCl、10mM EDTA (pH8.0)、0.4%SDS。 200 μg/ml蛋白酶K （使用之前加入）。

（1）1M Tris-Cl (pH8.0)

800ml 水中溶解121.1g Tris碱，待溶液冷却至室温后加入浓盐酸调节pH 至8.0(约需42ml 浓盐酸) ，定容至1L ，高温高压灭菌备用。

（2）5M 氯化钠

800ml 水中溶解292.2g 氯化钠，加水定容至1L ，高温高压灭菌备用。

（3）500 mM EDTA (pH8.0)

800ml 水中加入186.1g 二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na 。2H2O ），磁力搅拌助溶，用NaOH 调节pH 至8.0（约需20g NaOH 颗粒），定容至1L ，高温高压灭菌备用。（EDTA 二钠盐需要调节pH 至8.0时才能完全溶解）。

（4）10% SDS

900ml 水中溶解100g SDS加热助溶，加浓盐酸调节pH 至7.2，加水定容至1L ，无需灭菌。

（5）蛋白酶K ；

灭菌水配置成20mg/ml，-20℃保存备用。


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