试管培养基（ＰＤＡ）制作技术
前言
制作试管量的多少，根据生产需要以及灭菌锅的大小，因此，在做试管培养基时按水：马铃薯：葡萄糖：琼脂＝1000（ml）：200g:20g:18g的比例同比例的扩大或缩小即可，其中，水可适量多加以补充蒸发消耗量。
1．准备工作 准备工具和药品
2.提取马铃薯滤液 挑选表面光滑、无发芽的马铃薯，将其去皮，挖掉芽眼，清洗后，切成1cm厚的切片，放入锅内，加入水（若马铃薯400g，加入水2500ml为宜），用火煮沸后开始计时，煮的过程中要搅拌，以防锅糊，30min后，此时马铃薯颜色发黄，用玻璃棒轻轻一碰，熟透了，拿折叠好4层的纱布过滤。
3.加药品和分装试管 过滤好的滤液用烧杯等容器量取（以400g马铃薯为例），滤液不足2000ml时用清水补足，多者舍去，放入锅内，沸腾后加入40g葡萄糖, 1g硫酸镁，2g硫酸二氢钾，4片多维维生素(碾碎加入)，40g琼脂，应不断朝一个方向搅拌，直到琼脂全部融化为止，然后迅速分装试管，以防琼脂凝固，培养基的量约为试管的1/5，并且操作时应尽量防止培养基沾在试管口附近，否则用抹布擦拭干净，防止沾在棉花塞上，造成试管污染。
4.塞棉花塞和捆扎试管 装好培养基的试管口应及时塞上棉花塞并7支试管捆一捆，先在试管
中下部用橡皮捆一下，完后用报纸包试管口，报纸折时要压报纸缝，再拿一个橡皮条扎好报纸，并且折叠报纸时，上端要留有一段距离，以防棉塞打湿。
5.灭菌 把灭菌锅放在煤气灶中央，均匀受热，利于排气，加水，放上内胆，把捆好的试管放入内胆内，试管口向上，不能倾斜，以防培养基沾在棉塞上，盖上灭菌盖，拧紧螺丝，沿对角线拧，打开电磁炉，然后打开放气阀，待放气阀处有大量气体并且有灼手感觉时，关闭放气阀，待示数升到0.05MPa时，开始打开放气阀，待示数变为0MPa时（生产上一般达不到0MPa，因为有余温），此时关闭放气阀，直到示数升到0.125MPa时，调节电磁炉使其0.125MPa稳定在并持续小于等于30min.
6.灭菌结束后，待示数为0时，打开放气阀，放尽气体后，打开灭菌锅盖，凉一会，待不烫手时，取出培养基，放在已事先弄好的斜面上，斜面长度应以试管底部上端有缝隙为准，前端也不应该到达棉塞，待凝固。
试管培养基（ＰＤＡ）制作技术
前言
制作试管量的多少，根据生产需要以及灭菌锅的大小，因此，在做试管培养基时按水：马铃薯：葡萄糖：琼脂＝1000（ml）：200g:20g:18g的比例同比例的扩大或缩小即可，其中，水可适量多加以补充蒸发消耗量。
1．准备工作 准备工具和药品
2.提取马铃薯滤液 挑选表面光滑、无发芽的马铃薯，将其去皮，挖掉芽眼，清洗后，切成1cm厚的切片，放入锅内，加入水（若马铃薯400g，加入水2500ml为宜），用火煮沸后开始计时，煮的过程中要搅拌，以防锅糊，30min后，此时马铃薯颜色发黄，用玻璃棒轻轻一碰，熟透了，拿折叠好4层的纱布过滤。
3.加药品和分装试管 过滤好的滤液用烧杯等容器量取（以400g马铃薯为例），滤液不足2000ml时用清水补足，多者舍去，放入锅内，沸腾后加入40g葡萄糖, 1g硫酸镁，2g硫酸二氢钾，4片多维维生素(碾碎加入)，40g琼脂，应不断朝一个方向搅拌，直到琼脂全部融化为止，然后迅速分装试管，以防琼脂凝固，培养基的量约为试管的1/5，并且操作时应尽量防止培养基沾在试管口附近，否则用抹布擦拭干净，防止沾在棉花塞上，造成试管污染。
4.塞棉花塞和捆扎试管 装好培养基的试管口应及时塞上棉花塞并7支试管捆一捆，先在试管
中下部用橡皮捆一下，完后用报纸包试管口，报纸折时要压报纸缝，再拿一个橡皮条扎好报纸，并且折叠报纸时，上端要留有一段距离，以防棉塞打湿。
5.灭菌 把灭菌锅放在煤气灶中央，均匀受热，利于排气，加水，放上内胆，把捆好的试管放入内胆内，试管口向上，不能倾斜，以防培养基沾在棉塞上，盖上灭菌盖，拧紧螺丝，沿对角线拧，打开电磁炉，然后打开放气阀，待放气阀处有大量气体并且有灼手感觉时，关闭放气阀，待示数升到0.05MPa时，开始打开放气阀，待示数变为0MPa时（生产上一般达不到0MPa，因为有余温），此时关闭放气阀，直到示数升到0.125MPa时，调节电磁炉使其0.125MPa稳定在并持续小于等于30min.
6.灭菌结束后，待示数为0时，打开放气阀，放尽气体后，打开灭菌锅盖，凉一会，待不烫手时，取出培养基，放在已事先弄好的斜面上，斜面长度应以试管底部上端有缝隙为准，前端也不应该到达棉塞，待凝固。