急性毒性实验方案

挥发油处理:用前加5%吐温-80乳化后,加蒸馏水配制成所需浓度药液。

预实验:

取体重18~22g 的小鼠30只,雌雄各半,分为空白组(2只),挥发总油组(14只)、组分

5组(14只),用苦味酸编号,禁食(不禁水)8-12h 后,腹腔注射给药,挥发总油组给药

剂量按0.12g/kg、0.16g/kg、0.20g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg、0.40g/kg、0.50g/kg,组分5组

给药剂量按0.10g/kg、0.12g/kg、0.16g/kg、0.20g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg、0.35g/kg、,空白

对照组给以等体积的蒸馏水,每组两只。给药后各组小鼠正常饲养(实验过程中禁食、不禁

水12h),一般给药后6小时内要密切观察小鼠的反应(药后30min 内,连续观察;药后

30min-2h ,每15min 观察1次;药后2-4h ,每30min 观察1次;药后4-8h ,每1h 观察1次),

之后每天一次,连续7天,每天称取动物体重,记录毛色,精神,动度,进食,饮水等一般

情况,中毒症状及死亡情况,死亡动物即时解剖,肉眼观察心,肝,脾,肺,肾等主要脏器

有无病变。7d 观察期结束后将各组存活动物处死,解剖,按照上述同样方法肉眼观察主要

脏器大体病理改变。(一般预实验药物浓度比在0.1-0.7之间)。

正实验:

取体重18~22g 的小鼠110只,雌雄各半,分为空白组(10只),挥发总油组(50只)、组

分5组(50只),用苦味酸编号,禁食(不禁水)8-12h 后,腹腔注射给药,挥发总油组给

药体积按0.16g/kg、0.2g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg、0.4g/kg,组分5组给药剂量按0.12g/kg、

0.16g/kg、0.20g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg,空白对照组给以等体积的蒸馏水,每组10只。给

药后各组小鼠正常饲养(实验过程中禁食、不禁水12h),一般给药后8小时内要密切观察

小鼠的反应(药后30min 内,连续观察;药后30min-2h ,每15min 观察1次;药后2-4h ,

每30min 观察1次;药后4-8h ,每1h 观察1次),之后每天一次,连续14天,每天称取动

物体重,记录毛色,精神,动度,进食,饮水等一般情况,中毒症状及死亡情况,死亡动物

即时解剖,肉眼观察心,肝,脾,肺,肾等主要脏器有无病变。14d 观察期结束后将各组存

活动物处死,解剖,按照上述同样方法肉眼观察主要脏器大体病理改变。

数据处理:

数据统计采用Bliss 法, 应用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析,计算LD50及95%可信限。

剂量设计:

华细辛油给小鼠腹腔注射的LD50为0.25g/kg。在预实验基础上确定各组小鼠用药量,相邻

的两组间剂量的比值r=0.8。小鼠腹腔注射的给药容积一般为5 ml/kg。

小鼠腹腔注射可以用1 ml的注射器,配合4号针头。

毒性评价:

并于给药前后每天进行1次体质量测定,第14d 处死小鼠,对小鼠进行大体剖检,肉眼观

察各脏器有无异常,如有肉眼可见病变,进行组织病理学检查。

程度 症状

无毒 未见毒性症状

轻度毒性 轻度症状,不安但无运动减少,呼吸困难或腹部刺激症状

明显毒性 有腹部刺激症状、呼吸困难、运动减少、眼睑下垂、腹泻、体重下降

重度毒性 衰竭、震颤、剧烈抽搐、严重腹部刺激症状、眼睑下垂、呼吸困难、

体重下降

死亡 给药后死亡

挥发油处理:用前加5%吐温-80乳化后,加蒸馏水配制成所需浓度药液。

预实验:

取体重18~22g 的小鼠30只,雌雄各半,分为空白组(2只),挥发总油组(14只)、组分

5组(14只),用苦味酸编号,禁食(不禁水)8-12h 后,腹腔注射给药,挥发总油组给药

剂量按0.12g/kg、0.16g/kg、0.20g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg、0.40g/kg、0.50g/kg,组分5组

给药剂量按0.10g/kg、0.12g/kg、0.16g/kg、0.20g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg、0.35g/kg、,空白

对照组给以等体积的蒸馏水,每组两只。给药后各组小鼠正常饲养(实验过程中禁食、不禁

水12h),一般给药后6小时内要密切观察小鼠的反应(药后30min 内,连续观察;药后

30min-2h ,每15min 观察1次;药后2-4h ,每30min 观察1次;药后4-8h ,每1h 观察1次),

之后每天一次,连续7天,每天称取动物体重,记录毛色,精神,动度,进食,饮水等一般

情况,中毒症状及死亡情况,死亡动物即时解剖,肉眼观察心,肝,脾,肺,肾等主要脏器

有无病变。7d 观察期结束后将各组存活动物处死,解剖,按照上述同样方法肉眼观察主要

脏器大体病理改变。(一般预实验药物浓度比在0.1-0.7之间)。

正实验:

取体重18~22g 的小鼠110只,雌雄各半,分为空白组(10只),挥发总油组(50只)、组

分5组(50只),用苦味酸编号,禁食(不禁水)8-12h 后,腹腔注射给药,挥发总油组给

药体积按0.16g/kg、0.2g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg、0.4g/kg,组分5组给药剂量按0.12g/kg、

0.16g/kg、0.20g/kg、0.25g/kg、0.32g/kg,空白对照组给以等体积的蒸馏水,每组10只。给

药后各组小鼠正常饲养(实验过程中禁食、不禁水12h),一般给药后8小时内要密切观察

小鼠的反应(药后30min 内,连续观察;药后30min-2h ,每15min 观察1次;药后2-4h ,

每30min 观察1次;药后4-8h ,每1h 观察1次),之后每天一次,连续14天,每天称取动

物体重,记录毛色,精神,动度,进食,饮水等一般情况,中毒症状及死亡情况,死亡动物

即时解剖,肉眼观察心,肝,脾,肺,肾等主要脏器有无病变。14d 观察期结束后将各组存

活动物处死,解剖,按照上述同样方法肉眼观察主要脏器大体病理改变。

数据处理:

数据统计采用Bliss 法, 应用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析,计算LD50及95%可信限。

剂量设计:

华细辛油给小鼠腹腔注射的LD50为0.25g/kg。在预实验基础上确定各组小鼠用药量,相邻

的两组间剂量的比值r=0.8。小鼠腹腔注射的给药容积一般为5 ml/kg。

小鼠腹腔注射可以用1 ml的注射器,配合4号针头。

毒性评价:

并于给药前后每天进行1次体质量测定,第14d 处死小鼠,对小鼠进行大体剖检,肉眼观

察各脏器有无异常,如有肉眼可见病变,进行组织病理学检查。

程度 症状

无毒 未见毒性症状

轻度毒性 轻度症状,不安但无运动减少,呼吸困难或腹部刺激症状

明显毒性 有腹部刺激症状、呼吸困难、运动减少、眼睑下垂、腹泻、体重下降

重度毒性 衰竭、震颤、剧烈抽搐、严重腹部刺激症状、眼睑下垂、呼吸困难、

体重下降

死亡 给药后死亡


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