实验八 酵母菌形态及细胞结构的观察
生物112 周泓兆 1102040226
一、目的
1.观察酵母菌的出芽生殖方式;
2.观察酵母菌的细胞形态、主要细胞器及假菌丝形态;
3.学习并掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法;
4.观察酵母菌的子囊及子囊孢子形态。
二、原理
酵母菌分属于子囊菌门和担子菌门,一些菌株未发现有性生殖。酵母菌通常是多形态、不运动的单细胞微生物,很多酵母细胞在一定条件下,芽殖后不脱落而形成假菌丝。它们的菌落形态类似于细菌,但体积较大。其细胞内部结构清晰,可通过不同的染色方法在高倍镜下进行区分,如中性红是液泡的活体染色剂,可将其染成红色;脂肪滴可被苏丹黑氧化而呈蓝黑色;肝糖粒可被碘液氧化而呈深红褐色。无性生殖有芽殖和裂殖两种,芽殖又有单出、双出和多出之分。酵母菌的有性生殖一般能形成4-8个子囊孢子。
酵母菌的死活细胞可通过美蓝染色加以区分。美蓝(又称亚甲基蓝)是一种无毒性染色剂,其氧化型为蓝色,还原型为无色。由于活细胞具有较强的还原能力,可使美蓝由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。处于代谢旺盛的细胞还原美蓝染料的能力强,细胞为无色,而代谢缓慢的老细胞和死细胞为浅蓝色或深蓝色。
三、材料
1.菌种:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
热带假丝酵母(Candida tropicalis)
2.染料:0.1%美蓝染液
3.培养基:葡萄糖醋酸盐培养基、马铃薯葡萄糖培养基
4.其它:无菌盖玻片,无菌镊子,载玻片,盖玻片,无菌水,洗瓶,二甲苯,擦镜纸,吸水纸,接种环,酒精灯。
四、实验步骤
1.酿酒酵母的形态观察:
(1)取一个干净载玻片,在中央低一滴美蓝染液。
(2)用接种环取少量酿酒酵母菌苔在染液中涂匀。
(3)用镊子取一盖玻片,以45°角与菌悬液接触后,轻轻盖在菌悬液上,避免产生气泡,然后用吸水纸吸干多余液体。
(4)置于高倍镜下观察。观察芽殖和死、活细胞的颜色。30min后,再次观察死、活细胞数是否发生了变化。
2.假菌丝的观察:
(1)用解剖刀将盖玻片及其下面与盖玻片面积差不多的培养基取出,置于一个干净载玻片上(盖玻片朝上)
(2)置于高倍镜下观察。观察假菌丝的形态特征。
五、结果与讨论
1.本次实验非常简单,可在低倍镜下确定大概观察区域后调至高倍镜观察。
2.制作水压片的时候需要尽量减少美蓝染液的滴加量,防止过多染液溢出。
3.制作水压片时挑取少量菌即可,避免菌体数量过多导致难以观察。
4.观察假菌丝时,可以观察菌苔边缘,假菌丝较多。
实验八 酵母菌形态及细胞结构的观察
生物112 周泓兆 1102040226
一、目的
1.观察酵母菌的出芽生殖方式;
2.观察酵母菌的细胞形态、主要细胞器及假菌丝形态;
3.学习并掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法;
4.观察酵母菌的子囊及子囊孢子形态。
二、原理
酵母菌分属于子囊菌门和担子菌门,一些菌株未发现有性生殖。酵母菌通常是多形态、不运动的单细胞微生物,很多酵母细胞在一定条件下,芽殖后不脱落而形成假菌丝。它们的菌落形态类似于细菌,但体积较大。其细胞内部结构清晰,可通过不同的染色方法在高倍镜下进行区分,如中性红是液泡的活体染色剂,可将其染成红色;脂肪滴可被苏丹黑氧化而呈蓝黑色;肝糖粒可被碘液氧化而呈深红褐色。无性生殖有芽殖和裂殖两种,芽殖又有单出、双出和多出之分。酵母菌的有性生殖一般能形成4-8个子囊孢子。
酵母菌的死活细胞可通过美蓝染色加以区分。美蓝(又称亚甲基蓝)是一种无毒性染色剂,其氧化型为蓝色,还原型为无色。由于活细胞具有较强的还原能力,可使美蓝由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。处于代谢旺盛的细胞还原美蓝染料的能力强,细胞为无色,而代谢缓慢的老细胞和死细胞为浅蓝色或深蓝色。
三、材料
1.菌种:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
热带假丝酵母(Candida tropicalis)
2.染料:0.1%美蓝染液
3.培养基:葡萄糖醋酸盐培养基、马铃薯葡萄糖培养基
4.其它:无菌盖玻片,无菌镊子,载玻片,盖玻片,无菌水,洗瓶,二甲苯,擦镜纸,吸水纸,接种环,酒精灯。
四、实验步骤
1.酿酒酵母的形态观察:
(1)取一个干净载玻片,在中央低一滴美蓝染液。
(2)用接种环取少量酿酒酵母菌苔在染液中涂匀。
(3)用镊子取一盖玻片,以45°角与菌悬液接触后,轻轻盖在菌悬液上,避免产生气泡,然后用吸水纸吸干多余液体。
(4)置于高倍镜下观察。观察芽殖和死、活细胞的颜色。30min后,再次观察死、活细胞数是否发生了变化。
2.假菌丝的观察:
(1)用解剖刀将盖玻片及其下面与盖玻片面积差不多的培养基取出,置于一个干净载玻片上(盖玻片朝上)
(2)置于高倍镜下观察。观察假菌丝的形态特征。
五、结果与讨论
1.本次实验非常简单,可在低倍镜下确定大概观察区域后调至高倍镜观察。
2.制作水压片的时候需要尽量减少美蓝染液的滴加量,防止过多染液溢出。
3.制作水压片时挑取少量菌即可,避免菌体数量过多导致难以观察。
4.观察假菌丝时,可以观察菌苔边缘,假菌丝较多。