链霉亲和素磁珠使用说明书
(注：本使用说明书仅供参考，使用单位应根据具体情况，灵活运用和改进)
一产品简介
链霉亲和素磁珠是分离生物素化核酸、抗体和其他生物素化配体和靶分子的最佳产品。链霉亲和素和生物素的结合力非常的高(Kd=10-15) ，因此有非常广泛的应用。链霉亲和素磁珠可简便快捷、有效地与许多生物素化复合物结合，如：小分子，肽类，蛋白，抗体，糖类，凝集素，寡合核苷酸，DNA/RNA等。
本公司提供产品的包装规格：产品是2ml 包装，浓度是10mg/ml（链霉亲和素为100μg/ml）。二使用方法
2.1、磁珠的准备
使用前，需要洗去磁珠上面的防腐剂。具体步骤如下：
（1）使用前将磁珠充分混匀，根据需要，吸取适当量磁珠悬浮液到EP 管中，将EP 管放在磁力架上，磁分离1-2min ，吸弃上清。
（2）取下EP 管，加入与磁珠悬浮液等体积的清洗液，点震或漩涡振荡使磁珠充分悬浮于清洗液中，将EP 管置于磁力架上，磁分离1-2min ，吸弃上清。
（3）重复（2）一次。
注：①如果下游是用于核酸类的操作清洗液用（1×B&W缓冲液）；②如果下游是用于蛋白类的操作清洗液用（PBS ，pH=7.4）。后续的各种操作均需要清洗磁珠表面的防腐剂，清洗完毕后根据实验所需选择下列不同的程序。
2.2、固定程序
2.2.1核酸
（1）对RNA 操作的准备
因为本产品没有对RNA 酶进行处理，如果后续试验进行RNA 的操作，用与磁珠悬浮液等体积溶液A 洗磁珠两次，1－3分钟；然后用与磁珠悬浮液等体积的溶液B 洗磁珠一次。
（2）用2×B&W缓冲液悬浮经过上述磁珠，使终浓度为5μg/μl，或实验应用的适宜浓度。（3）加入与磁珠悬浮液等体积的生物素化DNA/RNA水溶液。DNA/RNA的具体用量根据实验所需确定。
（4）室温下放置，轻轻旋转或时而轻敲离心管混合。孵育时间依赖结合的核酸长度：短的寡核苷酸（小于30个碱基）需要的孵育时间不超过10min 。30碱基至1kb 的孵育时间为15min 。
（5）磁珠此时被覆了生物素化的DNA/RNA片段，用磁力架分离磁珠。将离心管放在磁力架上1到2min 。
链霉亲和素磁珠使用说明书
（6）用1×B&W缓冲液洗2-3次，用磁力架吸附磁珠以利于洗涤。
（7）悬浮磁珠，稀释至所需浓度。此时磁珠已结合了经固定化后的DNA/RNA片段，应用低盐浓度缓冲液悬浮磁珠，以利于下面的操作。
注：如果是对DNA 的操作则省去2.2.1中步骤（1）。
2.2.2抗体
（1）计算磁珠和生物素化抗体所需用量。每mg 链霉亲和素磁珠需要大约5-10μg抗体。假定抗体100％生物素化，此时链霉亲和素饱和。
（2）在EP 管中加入一定量的PBS 缓冲液、磁珠以及生物素化抗体，在室温下孵育（使磁珠在溶液中保持悬浮状态，但不能剧烈振荡）30min ，将EP 管置于磁力架上，磁分离1-2min ，吸弃上清。
（3）用PBS/BSA洗涤磁珠4-5次，用磁力架辅助。
（4）悬浮磁珠稀释至所需浓度。
2.2.3生物素化小分子
链霉亲和磁珠还可用于固定诸如小分子、肽类等生物素化配体。生物素化配体与磁珠结合能力依赖于磁珠与配体之间、及配体与配体之间的空间构型、及电荷相互作用。磁珠表面每个链霉亲和素有3-4个结合位点。每mg 磁珠大约加入700pmoles 的生物素化小分子即可达到饱和，充分混合15-30min 。分子的大小决定实验中其需加入的浓度。在结合过程中，磁珠的浓度应在10-50mg/ml。应用磁力架洗涤已被覆抗体的磁珠3-4次，去除未结合物质。结合缓冲液的盐浓度和pH 值依据固化分子类型不同而不同。固化后的分子根据下游实验不同而选择合适的缓冲液。磁珠与固化分子的复合物在共用缓冲液中性能稳定。
2.3、生物素化分子的释放
生物素和链霉亲和素之间化学键的断裂需要严格条件。例如，将复合物置入pH=8.2、含95％甲酰氨的10mM EDTA 中65°C孵育5min 或90°C孵育2min ，超过96%生物素化DNA 片段均可被特异地分离。另一种方法，可将与磁珠相连的固化靶分子置于0.1%SDS 中煮沸5min 。
2.4、溶液的配制
（1）2倍B&W缓冲液：10mM Tris-HCl (pH7.5) 、1mM EDTA 、2.0M NaCl 。
（2）溶液A ：DEPC 处理的0.1M NaOH ；DEPC 处理的0.05M NaCl
溶液B ：DEPC 处理的0.1M NaCl 。
溶液A 与溶液B 的DEPC 处理过程：
向溶液A 和溶液B 中分别加入DEPC ，使DEPC 的终浓度达0.1%，用力震荡。室温放置1小时，高压灭菌。
PBS 缓冲溶液：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na 2HPO 410mmol/L，KH 2PO 42mmol/L（3）
链霉亲和素磁珠使用说明书
调节pH=7.4。
（4）PBS/BSA缓冲溶液：PBS/BSA(PBS,pH 7.4含有0.1%(w/v)BSA) 。
2.5、贮存与稳定性
密闭2-8°C保存，在有效期内磁珠稳定，有效期标注在标签上。磁珠小瓶要竖直存放，以保证磁珠呈悬浮液，磁珠烘干会导致其性能下降。此产品不能冷冻。用前要充分悬浮磁珠链霉亲和素磁珠悬浮液未经核糖核酸酶灭活。要防止细菌污染磁珠。
链霉亲和素磁珠使用说明书
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(注：本使用说明书仅供参考，使用单位应根据具体情况，灵活运用和改进)
一产品简介
链霉亲和素磁珠是分离生物素化核酸、抗体和其他生物素化配体和靶分子的最佳产品。链霉亲和素和生物素的结合力非常的高(Kd=10-15) ，因此有非常广泛的应用。链霉亲和素磁珠可简便快捷、有效地与许多生物素化复合物结合，如：小分子，肽类，蛋白，抗体，糖类，凝集素，寡合核苷酸，DNA/RNA等。
本公司提供产品的包装规格：产品是2ml 包装，浓度是10mg/ml（链霉亲和素为100μg/ml）。二使用方法
2.1、磁珠的准备
使用前，需要洗去磁珠上面的防腐剂。具体步骤如下：
（1）使用前将磁珠充分混匀，根据需要，吸取适当量磁珠悬浮液到EP 管中，将EP 管放在磁力架上，磁分离1-2min ，吸弃上清。
（2）取下EP 管，加入与磁珠悬浮液等体积的清洗液，点震或漩涡振荡使磁珠充分悬浮于清洗液中，将EP 管置于磁力架上，磁分离1-2min ，吸弃上清。
（3）重复（2）一次。
注：①如果下游是用于核酸类的操作清洗液用（1×B&W缓冲液）；②如果下游是用于蛋白类的操作清洗液用（PBS ，pH=7.4）。后续的各种操作均需要清洗磁珠表面的防腐剂，清洗完毕后根据实验所需选择下列不同的程序。
2.2、固定程序
2.2.1核酸
（1）对RNA 操作的准备
因为本产品没有对RNA 酶进行处理，如果后续试验进行RNA 的操作，用与磁珠悬浮液等体积溶液A 洗磁珠两次，1－3分钟；然后用与磁珠悬浮液等体积的溶液B 洗磁珠一次。
（2）用2×B&W缓冲液悬浮经过上述磁珠，使终浓度为5μg/μl，或实验应用的适宜浓度。（3）加入与磁珠悬浮液等体积的生物素化DNA/RNA水溶液。DNA/RNA的具体用量根据实验所需确定。
（4）室温下放置，轻轻旋转或时而轻敲离心管混合。孵育时间依赖结合的核酸长度：短的寡核苷酸（小于30个碱基）需要的孵育时间不超过10min 。30碱基至1kb 的孵育时间为15min 。
（5）磁珠此时被覆了生物素化的DNA/RNA片段，用磁力架分离磁珠。将离心管放在磁力架上1到2min 。
链霉亲和素磁珠使用说明书
（6）用1×B&W缓冲液洗2-3次，用磁力架吸附磁珠以利于洗涤。
（7）悬浮磁珠，稀释至所需浓度。此时磁珠已结合了经固定化后的DNA/RNA片段，应用低盐浓度缓冲液悬浮磁珠，以利于下面的操作。
注：如果是对DNA 的操作则省去2.2.1中步骤（1）。
2.2.2抗体
（1）计算磁珠和生物素化抗体所需用量。每mg 链霉亲和素磁珠需要大约5-10μg抗体。假定抗体100％生物素化，此时链霉亲和素饱和。
（2）在EP 管中加入一定量的PBS 缓冲液、磁珠以及生物素化抗体，在室温下孵育（使磁珠在溶液中保持悬浮状态，但不能剧烈振荡）30min ，将EP 管置于磁力架上，磁分离1-2min ，吸弃上清。
（3）用PBS/BSA洗涤磁珠4-5次，用磁力架辅助。
（4）悬浮磁珠稀释至所需浓度。
2.2.3生物素化小分子
链霉亲和磁珠还可用于固定诸如小分子、肽类等生物素化配体。生物素化配体与磁珠结合能力依赖于磁珠与配体之间、及配体与配体之间的空间构型、及电荷相互作用。磁珠表面每个链霉亲和素有3-4个结合位点。每mg 磁珠大约加入700pmoles 的生物素化小分子即可达到饱和，充分混合15-30min 。分子的大小决定实验中其需加入的浓度。在结合过程中，磁珠的浓度应在10-50mg/ml。应用磁力架洗涤已被覆抗体的磁珠3-4次，去除未结合物质。结合缓冲液的盐浓度和pH 值依据固化分子类型不同而不同。固化后的分子根据下游实验不同而选择合适的缓冲液。磁珠与固化分子的复合物在共用缓冲液中性能稳定。
2.3、生物素化分子的释放
生物素和链霉亲和素之间化学键的断裂需要严格条件。例如，将复合物置入pH=8.2、含95％甲酰氨的10mM EDTA 中65°C孵育5min 或90°C孵育2min ，超过96%生物素化DNA 片段均可被特异地分离。另一种方法，可将与磁珠相连的固化靶分子置于0.1%SDS 中煮沸5min 。
2.4、溶液的配制
（1）2倍B&W缓冲液：10mM Tris-HCl (pH7.5) 、1mM EDTA 、2.0M NaCl 。
（2）溶液A ：DEPC 处理的0.1M NaOH ；DEPC 处理的0.05M NaCl
溶液B ：DEPC 处理的0.1M NaCl 。
溶液A 与溶液B 的DEPC 处理过程：
向溶液A 和溶液B 中分别加入DEPC ，使DEPC 的终浓度达0.1%，用力震荡。室温放置1小时，高压灭菌。
PBS 缓冲溶液：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na 2HPO 410mmol/L，KH 2PO 42mmol/L（3）
链霉亲和素磁珠使用说明书
调节pH=7.4。
（4）PBS/BSA缓冲溶液：PBS/BSA(PBS,pH 7.4含有0.1%(w/v)BSA) 。
2.5、贮存与稳定性
密闭2-8°C保存，在有效期内磁珠稳定，有效期标注在标签上。磁珠小瓶要竖直存放，以保证磁珠呈悬浮液，磁珠烘干会导致其性能下降。此产品不能冷冻。用前要充分悬浮磁珠链霉亲和素磁珠悬浮液未经核糖核酸酶灭活。要防止细菌污染磁珠。
链霉亲和素磁珠使用说明书