胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基

品种名称:胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基

音译名:Tryptose Sulfite Agar

品种编号:024045

规格:250g干粉培养基

培养基用途:用于城市供水中滤膜法测定亚硫酸盐还原厌氧菌(梭状芽孢杆菌)孢子。

胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基使用原理:

胰蛋白胨、大豆蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;焦亚硫酸钠和柠檬酸铁铵为硫化氢指示剂;梭状芽孢杆菌将焦亚硫酸钠还原为硫化氢,与铁离子结合形成黑色沉淀。

微生物图鉴:

胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基配方(每升):

胰蛋白月示 15g

大豆蛋白胨 5g

酵母膏粉5g

焦亚硫酸钠(Na2S2O5)1g

柠檬酸铁铵 1g

琼脂15g

最终pH7.6±0.2

胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基使用方法:

1、称取本培养基42g,加入1000 mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌15分钟,待冷至50℃左右倾注平皿。

2、滤膜灭菌

将滤膜放入烧杯中,置于沸水中煮沸灭菌三次,每次15分钟。前两次煮沸后需要更换水洗涤2-3次,以除去残留溶剂。

3、滤器灭菌

视滤器质地采用干热(酒精棉球火焰)或湿热灭菌。

4、孢子的选择

水样在试验前须放置于水浴锅中,75±1℃加热15分钟。用同样的水样瓶作空白,用温度计检查加热温度。

5、接种与培养

水样的过滤量要适当:对于饮用水、泉水、井水、海水、地面水和梭状芽孢杆菌轻度污染的水,取100mL过滤;对污染严重的水或废水,可用无菌水稀释后检测。调配一定的稀释度,使在滤膜上生长的黑色菌落分离,而更易于计数。

水样过滤后,用无菌镊子将滤膜过滤面朝下,置于培养皿中,同时使滤膜下无气泡。小心地将18mL约50℃的培养基倾注于培养皿中的膜上。在形成培养基层后,37±1℃培养20±4h和44±4h。如果使用厌氧培养箱,滤膜可放置在琼脂面上,且滤膜面向上。

6、观察结果。

培养20±4h和44±4h后,计数所有黑色菌落。

7、分析结果的表述

试验报告应说明所使用的方法,单位体积水样中亚硫酸盐还原厌氧细菌培养44±4h的孢子;孢子数太多,黑色菌落连在一起而难以计数,可采用20±4h培养时间的孢子大约数目。结果以CFU/100mL计。

实验质量控制:

质控菌株接种后于37±1℃培养24—48h,结果如下:

菌 名     菌 号  生长状况   培养特征

产气荚膜梭菌  HK9051   良好    黑色菌落

破伤风梭菌  HK9041  良好   黑色菌落

贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

品种名称:胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基

音译名:Tryptose Sulfite Agar

品种编号:024045

规格:250g干粉培养基

培养基用途:用于城市供水中滤膜法测定亚硫酸盐还原厌氧菌(梭状芽孢杆菌)孢子。

胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基使用原理:

胰蛋白胨、大豆蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;焦亚硫酸钠和柠檬酸铁铵为硫化氢指示剂;梭状芽孢杆菌将焦亚硫酸钠还原为硫化氢,与铁离子结合形成黑色沉淀。

微生物图鉴:

胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基配方(每升):

胰蛋白月示 15g

大豆蛋白胨 5g

酵母膏粉5g

焦亚硫酸钠(Na2S2O5)1g

柠檬酸铁铵 1g

琼脂15g

最终pH7.6±0.2

胰蛋白月示亚硫酸盐琼脂培养基使用方法:

1、称取本培养基42g,加入1000 mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌15分钟,待冷至50℃左右倾注平皿。

2、滤膜灭菌

将滤膜放入烧杯中,置于沸水中煮沸灭菌三次,每次15分钟。前两次煮沸后需要更换水洗涤2-3次,以除去残留溶剂。

3、滤器灭菌

视滤器质地采用干热(酒精棉球火焰)或湿热灭菌。

4、孢子的选择

水样在试验前须放置于水浴锅中,75±1℃加热15分钟。用同样的水样瓶作空白,用温度计检查加热温度。

5、接种与培养

水样的过滤量要适当:对于饮用水、泉水、井水、海水、地面水和梭状芽孢杆菌轻度污染的水,取100mL过滤;对污染严重的水或废水,可用无菌水稀释后检测。调配一定的稀释度,使在滤膜上生长的黑色菌落分离,而更易于计数。

水样过滤后,用无菌镊子将滤膜过滤面朝下,置于培养皿中,同时使滤膜下无气泡。小心地将18mL约50℃的培养基倾注于培养皿中的膜上。在形成培养基层后,37±1℃培养20±4h和44±4h。如果使用厌氧培养箱,滤膜可放置在琼脂面上,且滤膜面向上。

6、观察结果。

培养20±4h和44±4h后,计数所有黑色菌落。

7、分析结果的表述

试验报告应说明所使用的方法,单位体积水样中亚硫酸盐还原厌氧细菌培养44±4h的孢子;孢子数太多,黑色菌落连在一起而难以计数,可采用20±4h培养时间的孢子大约数目。结果以CFU/100mL计。

实验质量控制:

质控菌株接种后于37±1℃培养24—48h,结果如下:

菌 名     菌 号  生长状况   培养特征

产气荚膜梭菌  HK9051   良好    黑色菌落

破伤风梭菌  HK9041  良好   黑色菌落

贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。


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