水中氮氧化物的测定
氨氮—纳氏试剂光度法
一．方法原理
碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽波长内具有强烈吸收，通常测量用波长在410～425nm 范围。
二．干扰及消除
脂肪酸、芳香胺、醛类、丙酮、醇类和有机氯胺类等有机化合物，以及铁、锰、镁和硫等无机离子，因产生异色或混浊而引起干扰，水中颜色和浑浊也影响比色。为此，需经絮凝沉淀过滤或蒸馏预处理，易挥发的还原性干扰物质，还可在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰，可加入适量的掩蔽剂加以消除。
三．方法的适用范围
本法最低检出浓度为0.025mg/l（光度法），测定上限为2mg/l。采用目视比色法，最低检出浓度为0.02mg/l。水样做适当的预处理后，本法可适用于地衣水，地下水，工业废水和生活污水中氨氮的测定。
四．仪器
分光光度计、pH 计；
五．试剂
配制试剂用水均应为无氨水。
① 纳氏试剂：可选择下列的一种方法制备。
（1） 称取16g 强氧化钠溶于50ml 水中，充分冷却至室温。另取
7g 碘化钾和10g 碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠的溶液中，用水稀释至100ml ，贮于聚乙烯瓶中，密封保存。
（2） 称取20g 碘化钾溶于约100ml 水中，边搅拌边分次少量加入
二氯化汞结晶粉末约10g ，至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，并充分搅拌，当出现微量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加氯化汞溶液。
另取60g 氢氧化钾溶于水，并稀释至250ml ，充分冷却至室温后，讲上述溶液在搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至400ml ，混匀。静置过夜。将上清液移入聚乙烯瓶中，密封保存。
② 酒石酸钾钠溶液：称取50g 酒石酸钾钠溶于100ml 水中，加热
煮沸以除去氨，放冷, 定容至100ml 。
③ 铵标准贮备溶液：称取3.819g 经100℃干燥过的优级纯氯化
铵溶于水中，移入1000ml 容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg 氨氮。
④ 铵标准使用溶液：移取5.00ml 铵标准贮备溶液于500ml 容量
瓶中，用水稀释至标线，此溶液每毫升含0.010mg 氨氮。
六．步骤
（1）校准曲线的绘制
①吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0ml 铵标准使用液于50ml 比色管中，加水至标线，加1.0ml 酒石酸钾钠溶液，混匀。
加1.5ml 纳氏试剂，混匀。放置10min 后，在波长420nm 处，用光程10mm 比色皿，以水为参比，测量吸光度。
②由测得的吸光度，减去零浓度空白的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量（mg ）对校正吸光度的标准曲线。
（2）水样的测定
①分取适量经絮凝沉淀预处理后的水样，加入50ml 比色管中，加水至标线，加1.0ml 酒石酸钾钠溶液，混匀。以下同标准曲线的绘制。 ②分取适量经蒸馏预处理后的镏出液，加入50ml 比色管中，加入一定量1mol/l氢氧化钠溶液以中和硼酸，稀释至标线。加1.5ml 纳氏试剂，混匀。放置10min 后，同校准曲线步骤测量吸光度。
（3）空白试验
以无氨水代替水样，做全程空白测定。
七．计算
由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查的氨氮的含量（mg ）。
氨氮（N ，mg/l）=m×1000/V
式中：m —由校准曲线查得的氨氮量（mg ）;
V—水样体积（ml ）。
亚硝酸盐氮---N-（1-萘基）-乙二胺光度法
一． 方法原理
在磷酸介质中，pH 值为1.8正负0.3时，亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm 波长处有最大吸收。
二． 干扰及消除
氯胺、氨、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。水样呈碱性（pH ≧11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或者悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。
三． 方法的适用范围
本法适用于饮用水、地表水、地下水、生活污水和工业废水中亚硝酸盐的测定。最低检出浓度为0.003mg/l；测定上限为0.20mg/l亚硝酸盐氮。
四． 仪器
分光光度计
五．试剂
实验用水均为不含亚硝酸盐的水。
⑴无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加入少许高锰酸钾固体，使呈红色，再加氢氧化钡使呈碱性。置于全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃用50ml 初镏液，收集中间约70%不含锰的镏出液。亦可于每升蒸馏水中加1ml 浓硫酸和0.2ml 硫酸锰溶液（每100ml 水中含36.4gMnSO 4·H 2O ）, 加入1-3ml0.04%高锰酸钾溶液至红色，重蒸馏。
（2）磷酸密度为1.70g/ml。
（3）显色剂：于500ml 烧杯中，加入250ml 水和50ml 磷酸，加入
20.0g 对氨基苯磺酰胺，再将1.00gN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶于上述溶液中，转移至500ml 容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。 此溶液贮于棕色瓶中，保存至2-5℃，至少可稳定一个月。 注意：本试剂有毒性，避免与皮肤接触或者摄入体内。
（4）亚硝酸盐氮标准贮备液：称取1.232g 亚硝酸钠溶于150ml 水中，转移至1000ml 容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含约0.25mg 亚硝酸盐氮。
本溶液贮于棕色瓶中，加1ml 三氯甲烷，保存在2-5℃，至少稳定一个月。贮备液的标定如下：
① 在300ml 具塞锥形瓶中，加入50.00ml 0.050mol/l的高锰酸钾标准溶液，5ml 浓硫酸，用50ml 无分度吸管，使下端插入高锰酸钾溶液下面，加入50.00ml 亚硝酸钠标准贮备液，轻轻摇匀。置于水浴上加热至70-80℃，按每次10.00ml 的量加入足够的草酸钠标准液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标准溶液用量V 2. 然后用高锰酸钾标准溶液滴定过量草酸
钠至溶液呈微红色，记录高锰酸钾标准溶液总用量V 1.
② 再以50ml 水代替亚硝酸盐氮标准贮备液，如上操作，用草酸钠标准溶液标定高锰酸钾溶液的浓度C 1. 按下式计算高锰
酸钾标准溶液浓度：
C1（1/5KMnO4）=0.0500×V 4/V3
按下式计算亚硝酸盐氮标准贮备液的浓度：
亚硝酸盐氮（N ，mg/l）=（V 1C 1-0.0500×V 2）×7.00×1000/50.00
式中：C 1—经标定的高锰酸钾标准溶液的浓度（mol/l）；
V 1—滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入高锰酸钾标准溶
液总量（ml ）；
V 2—滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入草酸钠标准溶液
量（ml ）；
V 3—滴定水时，加入高锰酸钾标准溶液总量（ml ）；
V 4—滴定空白时，加入草酸钠标准溶液总量（ml ）；
7.00—亚硝酸盐氮（1/2N）的摩尔质量（g/mol）；
50.00—亚硝酸盐标准贮备液取用量（ml ）;
0.0500—草酸钠标准溶液浓度（1/2NaC2O 4mol/l）。
（5）亚硝酸盐氮标准中间液：分取50.00ml 亚硝酸盐标准贮备液（使含12.5mg 亚硝酸盐氮），置于250ml 容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0ug 亚硝酸盐氮。
中间液贮于棕色瓶中，保存在2-5℃，可稳定一周。
（6）亚硝酸盐氮标准使用液：取10.00ml 亚硝酸盐标准中间液，置于500ml 容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含1.00ug 亚硝酸盐氮。此溶液使用时，当天配制。
（7）氢氧化铝悬浮液：溶解125g 硫酸铝钾或硫酸铝铵于1000ml 水
中，加热至60℃，在不断搅拌下，徐徐加入55ml 浓硫酸，放置约1小时后，移入1000ml 量筒中，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部倾出，只留稠的悬浮物，最后加入100ml 水，使用前应振荡摇匀。
（8）高锰酸钾标准溶液（1/5KMnO4）=0.050mol/l：溶解1.6g 高锰
酸钾于1200ml 水中，煮沸0.5-1h, 使体积减少至1000ml 左右，放置过夜。用G-3号玻璃砂芯滤器过滤后，滤液贮存于棕色试剂瓶中避光保存，按上述方法标定。
（9）草酸钠标准溶液（1/2NaC2O 4）=0.0500mol/l：溶解经105℃烘
干2h 的优级纯无水草酸钠3.350g 于750ml 水中，移入1000ml 容量瓶中，稀释至标线。
六．步骤
（1）校准曲线的绘制
在一组6支50ml 比色管中，分别加入0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml 亚硝酸盐氮标准使用液，用水稀释至标线。加入1.0ml 显色剂，密塞，摇匀。静置20min 后，在2h 内，于波长540nm 处，用光程长10mm 的比色皿，以水为参比，测量吸光度。
从测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，获得校正吸光度，绘制以氮含量（ug ）对校正吸光度的校准曲线。
（2）水样的测定
当水样pH ≥11时，可加入1滴酚酞指示液，边搅拌边加入（1+9）磷酸溶液至红色刚消失。
水样如有颜色和悬浮物，可向每100ml 水中加入2ml 氢氧化铝悬浮液，搅拌、静置、过滤，弃去25ml 初滤液。
分取经预处理的水样于50ml 比色管中，加1.0ml 显色剂，然后按校准曲线绘制的相同步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，从校准曲线上查到亚硝酸盐氮含量。
（3） 空白试验
用水代替水样，按相同步骤进行测定。
七．计算
亚硝酸盐氮（N ，mg/l）=m/V
式中：m —由水样测得的校正吸光度，从校准曲线上查得相应的亚硝
酸盐氮的含量（ug ）；
V—水样的体积（ml ）。
显色试剂除以混合液加入外，也可以分别配制和依次加入，具体方法如下：
对氨基苯磺酰胺溶液：称取5g 对氨基苯磺酰胺，溶于50ml 弄盐酸和
约350ml 水的混合液，稀释至500ml 。此溶液稳定。
N-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶液：称取500mgN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶于500ml 水中，贮于棕色瓶中，置冰箱中保存，当色泽明显加深时，应重新配制，如有沉淀，则过滤。
步骤：于50ml 水样（或标准管）中，加入1.0ml 对氨基苯磺酰胺溶液，混匀，放置2-8min ，加入1.0ml N-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶液，混匀。放置10min 后，在540nm 波长测量吸光度。
硝酸盐氮—紫外分光光度法
一． 方法原理
利用硝酸根离子在220nm 波长处的吸收而定量测定硝酸盐氮。溶解的有机物在220nm 处也有吸收，而硝酸根离子在275nm 处没有吸收。因此，在275nm 处作另一次测量，以校正硝酸盐氮值。
二． 干扰及消除
溶解的有机物、表面活性剂、亚硝酸盐、六价饹、溴化物、碳酸氢盐和碳酸盐等干扰测定，需进行适当的预处理。本法采用絮凝
共沉淀和大孔中性吸附树脂进行处理，以排除水样中大部分常见有机物、浊度和Fe 3+,Cr 6-对测定的干扰。
三． 方法的适用范围
本法适用于清洁地表水和未受明显污染的地下水中硝酸盐氮的测定，其最低检出浓度为0.08mg/l，测量上线为4mg/l硝酸盐氮。
四． 仪器
分光光度计、离子交换柱。
五． 试剂
① 氢氧化铝悬浮液：溶解125g 硫酸铝钾或硫酸铝铵于1000ml 水中，加热至60℃，在不断搅拌下，徐徐加入55ml 浓硫酸，放置约1小时后，移入1000ml 量筒中，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部倾出，只留稠的悬浮物，最后加入100ml 水，使用前应振荡摇匀。； ② 10%硫酸锌溶液；
③ 5mol/l氢氧化钠溶液；
④ 大孔径中性树脂：CAD-40或XAD-2型及类似性能的树脂； ⑤ 甲醇；
⑥ 1mol/l盐酸（优级纯）；
⑦ 硝酸盐标准贮备液：称取0.7218g 经105-110℃干燥2h 的优级纯硝酸钾溶于水中，移入1000ml 容量瓶中，稀释至标线，加2ml 三氯甲烷作保存剂，混匀，至少可稳定6个月。该标准贮备液每毫升含0.100硝酸盐氮；
⑧ 0.8%氨基磺酸溶液：避光保存于冰箱中。
六． 步骤
⑴吸附柱的制备
新的树脂先用200ml 水分两次洗涤，用甲醇浸泡过夜，弃去甲醇，再用40ml 甲醇分两次洗涤，然后用新鲜去离子水洗到柱中流出液滴落于烧杯中无乳白色为止。树脂装入柱中时，树脂间绝不允许存在气泡。
（2）水样的测定
①量取200ml 水样置于锥形瓶或烧杯中，加入2ml 硫酸锌溶液，在搅拌下滴加氢氧化钠溶液，调至pH 为7，或将200ml 水样调至pH 为7后，加4ml 氢氧化铝悬浮液。待絮凝胶团下沉后，或经离心分离，吸取100ml 上清液分两次洗涤吸附柱树脂，以每秒一至两滴的流速流出，弃去。再继续使水样上清液通过柱子，收集50ml 于比色管中，备测定用。树脂用150ml 水分两次洗涤，备用。（直接收集水样于比
色管中）。
②加1.0ml 盐酸溶液，0.1ml 氨基磺酸溶液于比色管中（入亚硝酸盐氮低于0.1mg/l时，可不加氨基磺酸溶液）。
③用光程长为10mm 石英比色皿，在220和275nm 波长处，以经过树脂吸附的新鲜去离子水50ml 加1ml 盐酸溶液为参比，测量吸光度。
（3）校准曲线的绘制
于6个200ml 容量瓶中分别加入0.50、1.00、2.00、3.00、4.00ml 硝酸盐氮标准贮备液用新鲜去离子水稀释至标线，其浓度分别为0.25、0.50、1.00、1.50、2.00mg/l硝酸盐氮。按水样测定相同步骤测量吸光度。
七． 计算
A 校=A220-2A 275
式中：A 220—220nm 波长测得吸光度；
A 275-275nm 波长测得吸光度。
求得吸光度的校正值A 校以后，从校准曲线中查得相应的硝酸盐
氮量，即为水样测定结果（mg/l）。水样若经稀释后测定，则结果应乘以稀释倍数。
水中氮氧化物的测定
氨氮—纳氏试剂光度法
一．方法原理
碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽波长内具有强烈吸收，通常测量用波长在410～425nm 范围。
二．干扰及消除
脂肪酸、芳香胺、醛类、丙酮、醇类和有机氯胺类等有机化合物，以及铁、锰、镁和硫等无机离子，因产生异色或混浊而引起干扰，水中颜色和浑浊也影响比色。为此，需经絮凝沉淀过滤或蒸馏预处理，易挥发的还原性干扰物质，还可在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰，可加入适量的掩蔽剂加以消除。
三．方法的适用范围
本法最低检出浓度为0.025mg/l（光度法），测定上限为2mg/l。采用目视比色法，最低检出浓度为0.02mg/l。水样做适当的预处理后，本法可适用于地衣水，地下水，工业废水和生活污水中氨氮的测定。
四．仪器
分光光度计、pH 计；
五．试剂
配制试剂用水均应为无氨水。
① 纳氏试剂：可选择下列的一种方法制备。
（1） 称取16g 强氧化钠溶于50ml 水中，充分冷却至室温。另取
7g 碘化钾和10g 碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠的溶液中，用水稀释至100ml ，贮于聚乙烯瓶中，密封保存。
（2） 称取20g 碘化钾溶于约100ml 水中，边搅拌边分次少量加入
二氯化汞结晶粉末约10g ，至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，并充分搅拌，当出现微量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加氯化汞溶液。
另取60g 氢氧化钾溶于水，并稀释至250ml ，充分冷却至室温后，讲上述溶液在搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至400ml ，混匀。静置过夜。将上清液移入聚乙烯瓶中，密封保存。
② 酒石酸钾钠溶液：称取50g 酒石酸钾钠溶于100ml 水中，加热
煮沸以除去氨，放冷, 定容至100ml 。
③ 铵标准贮备溶液：称取3.819g 经100℃干燥过的优级纯氯化
铵溶于水中，移入1000ml 容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg 氨氮。
④ 铵标准使用溶液：移取5.00ml 铵标准贮备溶液于500ml 容量
瓶中，用水稀释至标线，此溶液每毫升含0.010mg 氨氮。
六．步骤
（1）校准曲线的绘制
①吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0ml 铵标准使用液于50ml 比色管中，加水至标线，加1.0ml 酒石酸钾钠溶液，混匀。
加1.5ml 纳氏试剂，混匀。放置10min 后，在波长420nm 处，用光程10mm 比色皿，以水为参比，测量吸光度。
②由测得的吸光度，减去零浓度空白的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量（mg ）对校正吸光度的标准曲线。
（2）水样的测定
①分取适量经絮凝沉淀预处理后的水样，加入50ml 比色管中，加水至标线，加1.0ml 酒石酸钾钠溶液，混匀。以下同标准曲线的绘制。 ②分取适量经蒸馏预处理后的镏出液，加入50ml 比色管中，加入一定量1mol/l氢氧化钠溶液以中和硼酸，稀释至标线。加1.5ml 纳氏试剂，混匀。放置10min 后，同校准曲线步骤测量吸光度。
（3）空白试验
以无氨水代替水样，做全程空白测定。
七．计算
由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查的氨氮的含量（mg ）。
氨氮（N ，mg/l）=m×1000/V
式中：m —由校准曲线查得的氨氮量（mg ）;
V—水样体积（ml ）。
亚硝酸盐氮---N-（1-萘基）-乙二胺光度法
一． 方法原理
在磷酸介质中，pH 值为1.8正负0.3时，亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm 波长处有最大吸收。
二． 干扰及消除
氯胺、氨、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。水样呈碱性（pH ≧11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或者悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。
三． 方法的适用范围
本法适用于饮用水、地表水、地下水、生活污水和工业废水中亚硝酸盐的测定。最低检出浓度为0.003mg/l；测定上限为0.20mg/l亚硝酸盐氮。
四． 仪器
分光光度计
五．试剂
实验用水均为不含亚硝酸盐的水。
⑴无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加入少许高锰酸钾固体，使呈红色，再加氢氧化钡使呈碱性。置于全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃用50ml 初镏液，收集中间约70%不含锰的镏出液。亦可于每升蒸馏水中加1ml 浓硫酸和0.2ml 硫酸锰溶液（每100ml 水中含36.4gMnSO 4·H 2O ）, 加入1-3ml0.04%高锰酸钾溶液至红色，重蒸馏。
（2）磷酸密度为1.70g/ml。
（3）显色剂：于500ml 烧杯中，加入250ml 水和50ml 磷酸，加入
20.0g 对氨基苯磺酰胺，再将1.00gN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶于上述溶液中，转移至500ml 容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。 此溶液贮于棕色瓶中，保存至2-5℃，至少可稳定一个月。 注意：本试剂有毒性，避免与皮肤接触或者摄入体内。
（4）亚硝酸盐氮标准贮备液：称取1.232g 亚硝酸钠溶于150ml 水中，转移至1000ml 容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含约0.25mg 亚硝酸盐氮。
本溶液贮于棕色瓶中，加1ml 三氯甲烷，保存在2-5℃，至少稳定一个月。贮备液的标定如下：
① 在300ml 具塞锥形瓶中，加入50.00ml 0.050mol/l的高锰酸钾标准溶液，5ml 浓硫酸，用50ml 无分度吸管，使下端插入高锰酸钾溶液下面，加入50.00ml 亚硝酸钠标准贮备液，轻轻摇匀。置于水浴上加热至70-80℃，按每次10.00ml 的量加入足够的草酸钠标准液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标准溶液用量V 2. 然后用高锰酸钾标准溶液滴定过量草酸
钠至溶液呈微红色，记录高锰酸钾标准溶液总用量V 1.
② 再以50ml 水代替亚硝酸盐氮标准贮备液，如上操作，用草酸钠标准溶液标定高锰酸钾溶液的浓度C 1. 按下式计算高锰
酸钾标准溶液浓度：
C1（1/5KMnO4）=0.0500×V 4/V3
按下式计算亚硝酸盐氮标准贮备液的浓度：
亚硝酸盐氮（N ，mg/l）=（V 1C 1-0.0500×V 2）×7.00×1000/50.00
式中：C 1—经标定的高锰酸钾标准溶液的浓度（mol/l）；
V 1—滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入高锰酸钾标准溶
液总量（ml ）；
V 2—滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入草酸钠标准溶液
量（ml ）；
V 3—滴定水时，加入高锰酸钾标准溶液总量（ml ）；
V 4—滴定空白时，加入草酸钠标准溶液总量（ml ）；
7.00—亚硝酸盐氮（1/2N）的摩尔质量（g/mol）；
50.00—亚硝酸盐标准贮备液取用量（ml ）;
0.0500—草酸钠标准溶液浓度（1/2NaC2O 4mol/l）。
（5）亚硝酸盐氮标准中间液：分取50.00ml 亚硝酸盐标准贮备液（使含12.5mg 亚硝酸盐氮），置于250ml 容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0ug 亚硝酸盐氮。
中间液贮于棕色瓶中，保存在2-5℃，可稳定一周。
（6）亚硝酸盐氮标准使用液：取10.00ml 亚硝酸盐标准中间液，置于500ml 容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含1.00ug 亚硝酸盐氮。此溶液使用时，当天配制。
（7）氢氧化铝悬浮液：溶解125g 硫酸铝钾或硫酸铝铵于1000ml 水
中，加热至60℃，在不断搅拌下，徐徐加入55ml 浓硫酸，放置约1小时后，移入1000ml 量筒中，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部倾出，只留稠的悬浮物，最后加入100ml 水，使用前应振荡摇匀。
（8）高锰酸钾标准溶液（1/5KMnO4）=0.050mol/l：溶解1.6g 高锰
酸钾于1200ml 水中，煮沸0.5-1h, 使体积减少至1000ml 左右，放置过夜。用G-3号玻璃砂芯滤器过滤后，滤液贮存于棕色试剂瓶中避光保存，按上述方法标定。
（9）草酸钠标准溶液（1/2NaC2O 4）=0.0500mol/l：溶解经105℃烘
干2h 的优级纯无水草酸钠3.350g 于750ml 水中，移入1000ml 容量瓶中，稀释至标线。
六．步骤
（1）校准曲线的绘制
在一组6支50ml 比色管中，分别加入0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml 亚硝酸盐氮标准使用液，用水稀释至标线。加入1.0ml 显色剂，密塞，摇匀。静置20min 后，在2h 内，于波长540nm 处，用光程长10mm 的比色皿，以水为参比，测量吸光度。
从测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，获得校正吸光度，绘制以氮含量（ug ）对校正吸光度的校准曲线。
（2）水样的测定
当水样pH ≥11时，可加入1滴酚酞指示液，边搅拌边加入（1+9）磷酸溶液至红色刚消失。
水样如有颜色和悬浮物，可向每100ml 水中加入2ml 氢氧化铝悬浮液，搅拌、静置、过滤，弃去25ml 初滤液。
分取经预处理的水样于50ml 比色管中，加1.0ml 显色剂，然后按校准曲线绘制的相同步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，从校准曲线上查到亚硝酸盐氮含量。
（3） 空白试验
用水代替水样，按相同步骤进行测定。
七．计算
亚硝酸盐氮（N ，mg/l）=m/V
式中：m —由水样测得的校正吸光度，从校准曲线上查得相应的亚硝
酸盐氮的含量（ug ）；
V—水样的体积（ml ）。
显色试剂除以混合液加入外，也可以分别配制和依次加入，具体方法如下：
对氨基苯磺酰胺溶液：称取5g 对氨基苯磺酰胺，溶于50ml 弄盐酸和
约350ml 水的混合液，稀释至500ml 。此溶液稳定。
N-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶液：称取500mgN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶于500ml 水中，贮于棕色瓶中，置冰箱中保存，当色泽明显加深时，应重新配制，如有沉淀，则过滤。
步骤：于50ml 水样（或标准管）中，加入1.0ml 对氨基苯磺酰胺溶液，混匀，放置2-8min ，加入1.0ml N-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶液，混匀。放置10min 后，在540nm 波长测量吸光度。
硝酸盐氮—紫外分光光度法
一． 方法原理
利用硝酸根离子在220nm 波长处的吸收而定量测定硝酸盐氮。溶解的有机物在220nm 处也有吸收，而硝酸根离子在275nm 处没有吸收。因此，在275nm 处作另一次测量，以校正硝酸盐氮值。
二． 干扰及消除
溶解的有机物、表面活性剂、亚硝酸盐、六价饹、溴化物、碳酸氢盐和碳酸盐等干扰测定，需进行适当的预处理。本法采用絮凝
共沉淀和大孔中性吸附树脂进行处理，以排除水样中大部分常见有机物、浊度和Fe 3+,Cr 6-对测定的干扰。
三． 方法的适用范围
本法适用于清洁地表水和未受明显污染的地下水中硝酸盐氮的测定，其最低检出浓度为0.08mg/l，测量上线为4mg/l硝酸盐氮。
四． 仪器
分光光度计、离子交换柱。
五． 试剂
① 氢氧化铝悬浮液：溶解125g 硫酸铝钾或硫酸铝铵于1000ml 水中，加热至60℃，在不断搅拌下，徐徐加入55ml 浓硫酸，放置约1小时后，移入1000ml 量筒中，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部倾出，只留稠的悬浮物，最后加入100ml 水，使用前应振荡摇匀。； ② 10%硫酸锌溶液；
③ 5mol/l氢氧化钠溶液；
④ 大孔径中性树脂：CAD-40或XAD-2型及类似性能的树脂； ⑤ 甲醇；
⑥ 1mol/l盐酸（优级纯）；
⑦ 硝酸盐标准贮备液：称取0.7218g 经105-110℃干燥2h 的优级纯硝酸钾溶于水中，移入1000ml 容量瓶中，稀释至标线，加2ml 三氯甲烷作保存剂，混匀，至少可稳定6个月。该标准贮备液每毫升含0.100硝酸盐氮；
⑧ 0.8%氨基磺酸溶液：避光保存于冰箱中。
六． 步骤
⑴吸附柱的制备
新的树脂先用200ml 水分两次洗涤，用甲醇浸泡过夜，弃去甲醇，再用40ml 甲醇分两次洗涤，然后用新鲜去离子水洗到柱中流出液滴落于烧杯中无乳白色为止。树脂装入柱中时，树脂间绝不允许存在气泡。
（2）水样的测定
①量取200ml 水样置于锥形瓶或烧杯中，加入2ml 硫酸锌溶液，在搅拌下滴加氢氧化钠溶液，调至pH 为7，或将200ml 水样调至pH 为7后，加4ml 氢氧化铝悬浮液。待絮凝胶团下沉后，或经离心分离，吸取100ml 上清液分两次洗涤吸附柱树脂，以每秒一至两滴的流速流出，弃去。再继续使水样上清液通过柱子，收集50ml 于比色管中，备测定用。树脂用150ml 水分两次洗涤，备用。（直接收集水样于比
色管中）。
②加1.0ml 盐酸溶液，0.1ml 氨基磺酸溶液于比色管中（入亚硝酸盐氮低于0.1mg/l时，可不加氨基磺酸溶液）。
③用光程长为10mm 石英比色皿，在220和275nm 波长处，以经过树脂吸附的新鲜去离子水50ml 加1ml 盐酸溶液为参比，测量吸光度。
（3）校准曲线的绘制
于6个200ml 容量瓶中分别加入0.50、1.00、2.00、3.00、4.00ml 硝酸盐氮标准贮备液用新鲜去离子水稀释至标线，其浓度分别为0.25、0.50、1.00、1.50、2.00mg/l硝酸盐氮。按水样测定相同步骤测量吸光度。
七． 计算
A 校=A220-2A 275
式中：A 220—220nm 波长测得吸光度；
A 275-275nm 波长测得吸光度。
求得吸光度的校正值A 校以后，从校准曲线中查得相应的硝酸盐
氮量，即为水样测定结果（mg/l）。水样若经稀释后测定，则结果应乘以稀释倍数。