Agilent 1200 高效液相色谱仪验证方案
目 录
1 验证目的和范围 2 验证组成人员及职责 3 概述 4 验证实施时间 5 预确认 6 安装确认 6.1 购置安装记录
6.2 设备的技术资料和附件的确认 6.3 人员的培训 6.4 安装确认 6.5 仪器效验 6.6 小结与评价 7 运行确认 7.1 相关文件 7.2 运行确认
7.2.1 基线噪声和基线漂移 7.2.2 流动相流量 7.2.3 柱温
7.3 小结与评价 8 性能确认 8.1 适用性
8.1.1色谱柱理论塔板数 8.1.2 拖尾因子 8.2 重复性 8.3 小结与评价 9 验证偏差分析 10 再验证 11 验证总结与评价
1 目的和范围
通过验证确认Agilent 1200 高效液相色谱仪是否能够达到设备性能指标，符合检验产品需求。
本方案适用于Agilent 1200 高效液相色谱仪的安装、运行、性能确认。
3 概述
本仪器由由四元泵、DAD 检测器、自动进样器、柱温箱、脱气机、柱塞清洗器、工作站软件、电脑组成。当供试品通过高压泵流动相带入色谱柱时，根据色谱柱箱温度以及柱内的填料，多次吸附和脱附，将供试品不同组份分开，进入检测器，绘出色谱图。根据保留时间进行定性分析，根据峰高或峰面积进行定量分析。该仪器主要用于各种原辅料、中间体、成品的含量测定。 4 验证实施日期
安装确认时间：2007年10月25日至2007年10月27日 运行确认时间：2007年10月28日至2007年11月25日 性能确认时间：2007年10月28日至2007年11月25日 5 预确认
该仪器主要技术指标：
波长范围：190～950nm 波长准确度：±1nm 带宽：2~400nm 波长重复性：±0.1 nm
基线漂移：≤2·10-3AU/h 基线噪声：±1.0·10-5AU 光源：氘灯 泵压力范围：0～400ba 泵流量范围：0.001～10ml /min 柱温箱温度范围：-10～80℃
技术指标是否符合中国药典2005版要求 结果
预确认者： 复核者： 日期： 6 安装确认
6.2 设备的技术资料和附件的确认
随机文件以及附件的确认内容 设备档案编号：
6.3 人员的培训
对操作人员、维护人员及参与验证人员进行培训，有培训记录。
检查结果： 检查人： 日期： 复核人： 日期： 6.4 安装确认：安装确认记录见附表1。 6.5 仪器校验
校验人： 校验日期：
结果： 记录人： 审核人： 日期： 年 月 日 6.6 小结与评价：
评价人： 日期： 复审人： 日期： 7 运行确认 7.1 相关文件
设备在运行前，应有相应的操作规程、维护保养等规程。检查记录如下表。
7.2 运行确认
在不使用试样的条件下，确认该仪器达到设计要求。 7.2.1 基线噪声和基线漂移：在254nm 处测定。
7.2.2 流动相流量：流动相为水，测试温度为25℃。
水在25℃时的密度为0.997041 g/cm3，先将三个10ml 容量瓶干燥，分别称定重量后接收流动相，设定流动相流速为0.5ml/min，各接10分钟（用秒表准确计时），精密称定水的重量，水的重量分别为M 1 、M 2 、M 3，计算流量设定值误差（S s ）、流量稳定性误差（S R ）均应≤±2%， Ss=（Fm —Fs ）/Fs×100% S R =（F max —F min ）/F×100%
式中：Ss ：流量设定值误差（%）；S R ：流量稳定性误差（%）； Fm= W/ρt ·t 为流量实测值；Fs ：流量设定值（ml/min）； M ：流动相的平均重量（g ）； ρt ：25℃下水的密度（g/cm3）； t ：收集流动相的时间（min ）； F max ：测量中流量最大值（ml/min）； F min ：测量中流量最小值（ml/min）； F ：测量中流量算术平均值（ml/min）。 以上确认结果见附表2。 7.2.3 柱温
7.2.3.1 设定温度为25℃，将一经过校正的温度计放入柱温箱，每隔30min 读取温度计显示温度及柱温箱显示温度一次。共读取五次。结果见附表3。
7.2.3.2 可接受标准：柱温箱显示读数与温度计读数偏差小于3.0℃，准确度符合要求；柱温箱显示读数波动小于1.0℃，精密度符合要求。 7.3 小结与评价：
评价人： 日期： 复审人： 日期： 8 性能确认（系统适用性试验） 8.1 适用性
以乙腈—0.4%磷酸（10：90）为流动相，设置流速1.0ml/min，色谱柱为C18柱，
在波长327nm 处测定绿原酸50%甲醇溶液（30ug/ml），记录见色谱图。 8.1.1色谱柱理论塔板数：n 应不低于2500，结果见附表4。 8.1.2 拖尾因子：T 应在0.95-1.05之间，结果见附表4。 8.2 重复性
测定过程见适用性预试验，测试5次，得5次峰面积数据，计算相对标准偏差应≤2%，结果见附表4。
计算公式：
[Σ（Xi —X ）2]/（n —1）×1 / X ×100% 8.3 小结与评价：
评价人： 日期： 复审人： 9 验证偏差分析
10 再验证 10.1 确认内容
10.1.1 线路连接：检查线路，接地。
10.1.2 检查运行记录：每次操作均有使用操作情况记录。 10.1.3 清洁：清洁仪器外部，每次做完样品后，冲洗柱子。 10.1.4 检查 10.1.4.1 校正记录。 10.1.4.2 流动池、氘灯能量。
日期：
10.1.4.3 压力保护装置检查：设定一低于日常工作压力的压力，启动泵，泵压至此压力应自动停泵。
10.1.4.4 系统适用性试验。 10.2 再验证周期：1年。 11 验证总结与评价
评价人：
日期： 审核人： 日期：
Agilent 1200 高效液相色谱仪验证方案
目 录
1 验证目的和范围 2 验证组成人员及职责 3 概述 4 验证实施时间 5 预确认 6 安装确认 6.1 购置安装记录
6.2 设备的技术资料和附件的确认 6.3 人员的培训 6.4 安装确认 6.5 仪器效验 6.6 小结与评价 7 运行确认 7.1 相关文件 7.2 运行确认
7.2.1 基线噪声和基线漂移 7.2.2 流动相流量 7.2.3 柱温
7.3 小结与评价 8 性能确认 8.1 适用性
8.1.1色谱柱理论塔板数 8.1.2 拖尾因子 8.2 重复性 8.3 小结与评价 9 验证偏差分析 10 再验证 11 验证总结与评价
1 目的和范围
通过验证确认Agilent 1200 高效液相色谱仪是否能够达到设备性能指标，符合检验产品需求。
本方案适用于Agilent 1200 高效液相色谱仪的安装、运行、性能确认。
3 概述
本仪器由由四元泵、DAD 检测器、自动进样器、柱温箱、脱气机、柱塞清洗器、工作站软件、电脑组成。当供试品通过高压泵流动相带入色谱柱时，根据色谱柱箱温度以及柱内的填料，多次吸附和脱附，将供试品不同组份分开，进入检测器，绘出色谱图。根据保留时间进行定性分析，根据峰高或峰面积进行定量分析。该仪器主要用于各种原辅料、中间体、成品的含量测定。 4 验证实施日期
安装确认时间：2007年10月25日至2007年10月27日 运行确认时间：2007年10月28日至2007年11月25日 性能确认时间：2007年10月28日至2007年11月25日 5 预确认
该仪器主要技术指标：
波长范围：190～950nm 波长准确度：±1nm 带宽：2~400nm 波长重复性：±0.1 nm
基线漂移：≤2·10-3AU/h 基线噪声：±1.0·10-5AU 光源：氘灯 泵压力范围：0～400ba 泵流量范围：0.001～10ml /min 柱温箱温度范围：-10～80℃
技术指标是否符合中国药典2005版要求 结果
预确认者： 复核者： 日期： 6 安装确认
6.2 设备的技术资料和附件的确认
随机文件以及附件的确认内容 设备档案编号：
6.3 人员的培训
对操作人员、维护人员及参与验证人员进行培训，有培训记录。
检查结果： 检查人： 日期： 复核人： 日期： 6.4 安装确认：安装确认记录见附表1。 6.5 仪器校验
校验人： 校验日期：
结果： 记录人： 审核人： 日期： 年 月 日 6.6 小结与评价：
评价人： 日期： 复审人： 日期： 7 运行确认 7.1 相关文件
设备在运行前，应有相应的操作规程、维护保养等规程。检查记录如下表。
7.2 运行确认
在不使用试样的条件下，确认该仪器达到设计要求。 7.2.1 基线噪声和基线漂移：在254nm 处测定。
7.2.2 流动相流量：流动相为水，测试温度为25℃。
水在25℃时的密度为0.997041 g/cm3，先将三个10ml 容量瓶干燥，分别称定重量后接收流动相，设定流动相流速为0.5ml/min，各接10分钟（用秒表准确计时），精密称定水的重量，水的重量分别为M 1 、M 2 、M 3，计算流量设定值误差（S s ）、流量稳定性误差（S R ）均应≤±2%， Ss=（Fm —Fs ）/Fs×100% S R =（F max —F min ）/F×100%
式中：Ss ：流量设定值误差（%）；S R ：流量稳定性误差（%）； Fm= W/ρt ·t 为流量实测值；Fs ：流量设定值（ml/min）； M ：流动相的平均重量（g ）； ρt ：25℃下水的密度（g/cm3）； t ：收集流动相的时间（min ）； F max ：测量中流量最大值（ml/min）； F min ：测量中流量最小值（ml/min）； F ：测量中流量算术平均值（ml/min）。 以上确认结果见附表2。 7.2.3 柱温
7.2.3.1 设定温度为25℃，将一经过校正的温度计放入柱温箱，每隔30min 读取温度计显示温度及柱温箱显示温度一次。共读取五次。结果见附表3。
7.2.3.2 可接受标准：柱温箱显示读数与温度计读数偏差小于3.0℃，准确度符合要求；柱温箱显示读数波动小于1.0℃，精密度符合要求。 7.3 小结与评价：
评价人： 日期： 复审人： 日期： 8 性能确认（系统适用性试验） 8.1 适用性
以乙腈—0.4%磷酸（10：90）为流动相，设置流速1.0ml/min，色谱柱为C18柱，
在波长327nm 处测定绿原酸50%甲醇溶液（30ug/ml），记录见色谱图。 8.1.1色谱柱理论塔板数：n 应不低于2500，结果见附表4。 8.1.2 拖尾因子：T 应在0.95-1.05之间，结果见附表4。 8.2 重复性
测定过程见适用性预试验，测试5次，得5次峰面积数据，计算相对标准偏差应≤2%，结果见附表4。
计算公式：
[Σ（Xi —X ）2]/（n —1）×1 / X ×100% 8.3 小结与评价：
评价人： 日期： 复审人： 9 验证偏差分析
10 再验证 10.1 确认内容
10.1.1 线路连接：检查线路，接地。
10.1.2 检查运行记录：每次操作均有使用操作情况记录。 10.1.3 清洁：清洁仪器外部，每次做完样品后，冲洗柱子。 10.1.4 检查 10.1.4.1 校正记录。 10.1.4.2 流动池、氘灯能量。
日期：
10.1.4.3 压力保护装置检查：设定一低于日常工作压力的压力，启动泵，泵压至此压力应自动停泵。
10.1.4.4 系统适用性试验。 10.2 再验证周期：1年。 11 验证总结与评价
评价人：
日期： 审核人： 日期：