一. 目的：
本规程规定了COL洁净区（D级）、ME洁净区（D级）、万古霉素洁净区（C级）、菌种（A级、C级、D级）、QC（A级、C级、D级）、取样车（C级）等（包括五指手套和设备・设施等）表面微生物的检测。 二. 检测依据：
中国GMP 、日本药局参考信息、ISO14644、EU-GMP 三. 术语：
1.静态 atrest
洁净设施建造完成，生产设备就位，并按客户与供应商议定的条件运行，但无人员在场的状态。
2.动态 operational
洁净设施按规定方式运行，规定数量的人员按议定方式工作的状态。
四. 测试方法
1. 表面微生物测试用培养基：
（1）沙氏葡萄糖琼脂培养基：（也可使用市售配制好的培养基）：
按照使用说明书称取适量培养基于纯化水中，加热溶化后过滤，用PH计调节pH值至适
当范围（略高0.2～0.4），保证灭菌后培养基pH值为5.6±0.2，按需要分装，在121±1℃灭菌15分钟，使用前进行培养基性能确认并做空白培养。
（2）大豆酪蛋白消化物琼脂培养基：（也可使用市售配制好的培养基）：
按照使用说明书称取适量培养基于纯化水中，加热溶化后过滤，用PH计调节pH值至适
当范围（略高0.2～0.4），保证灭菌后培养基pH值为7.3±0.2，按需要分装，在121±1℃灭菌15分钟，使用前进行培养基性能确认并做空白培养。 2 培养基平皿的制备
将需要灭菌的培养皿置于121±1℃湿热灭菌15分钟，将培养基加热溶化，冷至45℃ 时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿,培养基的注入量不能太多也不能太少,要尽量注满整个培养基。待琼脂在室温下凝固后，在双碟上写上所检测位置的编号,将大豆酪蛋白
消化物琼脂培养基倒置于30℃ ～35℃ 恒温培养箱中培养5天，将沙氏葡萄糖琼脂培养基倒置于20℃ ～25℃ 恒温培养箱中培养7天，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用。
注：制备好的培养基平皿宜在2℃ ～8℃ 的环境中存放。 四. 采样及注意点：
1. 通过风险评估确定各区域的表面微生物的检测位置，各单位具体采样位置见附表-1。另
外，对A、B级区域还要进行五指手套表面微生物的检测，一般为静态采样检测。 2. 表面微生物的采样量在24平方厘米--30平方厘米之间，每点采样1次，两种培养基要
分别在采样点的两侧进行采样,不能在同一位置采样。采样时间不低于10秒。对于比较弯曲的面，只按一个用力方向采样。五指手套检测时将戴上手套的五指同时放入碟中, 双手各采样1次。
3. 测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性，采样前应仔细检查每个培养皿
的质量，如发现变质、破损或污染，应剔除。
4. 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不
要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀的区别，如无法确认可用显微镜鉴别。
5. 表面微生物测试记录见附表-2，测试报告见附表-3。 五. 各房间具体采样位置：
六. 表面微生物测试时控制标准及定期测定频次见下表：
七依据《环境检测基准书》VXX的规定进行处理。 八. 该规程的修订、废止
本规程的修订、废止由检验分析责任者起草，经品管部QA会签，由品质总责任者批准。 九. 附表
附表-1：表面微生物各单位具体采样位置
文件编号：
附表-2：（ ）洁净区微生物测试标准操作规程·记录
文件编号：
附表-3：（ ）洁净区微生物测试报告
文件编号：
一. 目的：
本规程规定了COL洁净区（D级）、ME洁净区（D级）、万古霉素洁净区（C级）、菌种（A级、C级、D级）、QC（A级、C级、D级）、取样车（C级）等（包括五指手套和设备・设施等）表面微生物的检测。 二. 检测依据：
中国GMP 、日本药局参考信息、ISO14644、EU-GMP 三. 术语：
1.静态 atrest
洁净设施建造完成，生产设备就位，并按客户与供应商议定的条件运行，但无人员在场的状态。
2.动态 operational
洁净设施按规定方式运行，规定数量的人员按议定方式工作的状态。
四. 测试方法
1. 表面微生物测试用培养基：
（1）沙氏葡萄糖琼脂培养基：（也可使用市售配制好的培养基）：
按照使用说明书称取适量培养基于纯化水中，加热溶化后过滤，用PH计调节pH值至适
当范围（略高0.2～0.4），保证灭菌后培养基pH值为5.6±0.2，按需要分装，在121±1℃灭菌15分钟，使用前进行培养基性能确认并做空白培养。
（2）大豆酪蛋白消化物琼脂培养基：（也可使用市售配制好的培养基）：
按照使用说明书称取适量培养基于纯化水中，加热溶化后过滤，用PH计调节pH值至适
当范围（略高0.2～0.4），保证灭菌后培养基pH值为7.3±0.2，按需要分装，在121±1℃灭菌15分钟，使用前进行培养基性能确认并做空白培养。 2 培养基平皿的制备
将需要灭菌的培养皿置于121±1℃湿热灭菌15分钟，将培养基加热溶化，冷至45℃ 时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿,培养基的注入量不能太多也不能太少,要尽量注满整个培养基。待琼脂在室温下凝固后，在双碟上写上所检测位置的编号,将大豆酪蛋白
消化物琼脂培养基倒置于30℃ ～35℃ 恒温培养箱中培养5天，将沙氏葡萄糖琼脂培养基倒置于20℃ ～25℃ 恒温培养箱中培养7天，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用。
注：制备好的培养基平皿宜在2℃ ～8℃ 的环境中存放。 四. 采样及注意点：
1. 通过风险评估确定各区域的表面微生物的检测位置，各单位具体采样位置见附表-1。另
外，对A、B级区域还要进行五指手套表面微生物的检测，一般为静态采样检测。 2. 表面微生物的采样量在24平方厘米--30平方厘米之间，每点采样1次，两种培养基要
分别在采样点的两侧进行采样,不能在同一位置采样。采样时间不低于10秒。对于比较弯曲的面，只按一个用力方向采样。五指手套检测时将戴上手套的五指同时放入碟中, 双手各采样1次。
3. 测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性，采样前应仔细检查每个培养皿
的质量，如发现变质、破损或污染，应剔除。
4. 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不
要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀的区别，如无法确认可用显微镜鉴别。
5. 表面微生物测试记录见附表-2，测试报告见附表-3。 五. 各房间具体采样位置：
六. 表面微生物测试时控制标准及定期测定频次见下表：
七依据《环境检测基准书》VXX的规定进行处理。 八. 该规程的修订、废止
本规程的修订、废止由检验分析责任者起草，经品管部QA会签，由品质总责任者批准。 九. 附表
附表-1：表面微生物各单位具体采样位置
文件编号：
附表-2：（ ）洁净区微生物测试标准操作规程·记录
文件编号：
附表-3：（ ）洁净区微生物测试报告
文件编号：