・实验技术与方法・
腌腊肉制品中丙二醛测定方法的探讨
张荣华赵士权林明珠王秀兰车先（南京市卫生防疫站，江苏南京２１０００３）
丙二醛（ＭａｌｏｎｄｉａＬｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ），是油脂氧化变质生成的过氧化脂质，在热、光、重金属等过氧化物分解因子存在下，进一步分解产生的一种醛类物质。随着油脂氧化变质程度的发展，丙二醛含量较酸价及过氧化值有明显的增高。丙二醛具有灵敏的特性，稳定性好，是客观评价油脂酸败程度的敏感指标之一。目前丙二醛测定方法有高效液相色谱法、Ｉ”荧光法、”１比色法，”’前两法由于仪器昂贵而难以普及，比色法在试样处理上较繁琐，耗时长。本文对比色法进行了摸索和改进，使得测定简便快速，结果准确可靠，便于推广应用。现报告如下。１材料与方法１．１原理
油脂酸败产生的丙二醛，在酸性环境
ｃｍ比色皿，以空白溶液作参比浏其吸光度，绘制校正曲线。
将试样切碎，置于具塞三角烧瓶内，用石油醚浸泡过夜，倒出挥干石油醚，油脂备用。
准确称取１０ｗ油脂置于１００ｍＬ有盖三角瓶内，加入５０ｍＬ三氯醋酸混合液，振摇３０ｒａｉｎ，用双层滤纸过滤，滤液备用。
试样测定取上述滤液５ｍＬ置于２５ｍＬ纳氏比色管内，以下同校正曲线锎作方法操作，从校正曲线上查出丙二醛含量。
计算：
Ｊ
Ｃ
２—ｌＯ—ｘ——５—／５２０—ｘ—Ｉ—０—００。１００
ｇｏ
式中：ｃ——试样中丙二醛的含量，ｍｇ，１００
中，一份丙二醛与二份硫代巴比妥酸（耶Ａ）经加热
形成红色络食物，在５３１ｎｍ波长处有吸收高峰，与标准系列比较可定量。
１．２试剂ＴＢＡ水溶液准确称取ＴＢＡ（瑞士产品）溶于水中至ｌ可加热到全溶。
三氯醋酸混合物准确称取三氯醋酸（Ａ．Ｒ级）
７５
０００
＾——试样中丙二醛的相应含量，螂。
２结果与讨论２．１实验囊件选捧
２．１．１吸收光谱的选择取１０ｍＬ含３Ｐｇ丙二醛的标准溶液，按方法显色后于波长４００—６００ｎｕｌ区扫描。丙二醛与ＴＢＡ形成的红色络合物在５３１法选择５３１ｒｉｍ作为丙二醛测定波长。
ｎｍ
０．２８８
ｚ
ｎｌＬ，如ＴＢＡ不易溶解，
有最大吸收（见图１），与有关文献“１报道一致。本
ｇ及０．１
ｇ
Ｅ瑚ｒＡ（乙二胺四乙酸二钠，＾．Ｒ级）用
ｍＬ。
水溶解，稀释到１００
丙二醛储备液精确称取ｌ，Ｉ，３，３－四乙氯醛丙烷（Ｅ．Ｍｅｓｃｋ９７％）Ｏ．３１５ｇ，溶解后稀释到ｌ（每毫升相当于丙二醛含量为１００ｎ骣）。
丙二醛标准使用液ｍｇ），置冰箱备用。
１．３仪器Ｄｕ．６４０紫外可见分光光度计。
１．４方法校正曲线的绘制分别吸取０．０、０．１、
０．２、ｏ．３、０．４、Ｏ．５
０００ｍＬ
精确称取上述储备液１０
ｍＬ稀释到１００ｍＬ（每毫升相当于丙二醛含量为１０
ｍＬ（相当于丙二醛０．０、Ｉ．０、２．Ｏ、
３．０、４．０、５．０熘）标准使用液于２５ｍＬ纳氏比色管，加入５
ｍＬ
ＴＢＡ溶液，混匀，加塞，置于９０℃水浴中
保温４０ｍｉｎ，取出，冷却ｌｈ，在５３１
ｍ波长处，用ｌ
图ｌ丙二醛与＂Ｉｌｉａ的红色培台物的嗳收光谱
中骨★量卫生杂毒２００ｔ年簟ｉ３卷摹４期
万方数据
节为１、２、３、４、５，然后显色，结果显示溶液ｐＨ为２的吸光度最高，本法选择ｐＨ２溶液。２．１．３９０℃水浴中保温时间的选择溶液加ＴＢＡ后，置９０℃水浴中分别保温１０、２０、３０、４０、５０、６０ｍｉｎ，结果显示，１０ｍｉｎ吸光值最低，随保温时间的增
加，吸光值逐渐增大。柏一６０ｒａｉｎ达到最大显色强度且一致，本法选用９０℃水浴中保温时间４０
ｒａｉｎ。
２．２精密度试验对两份试样分别在不同时间各进行７次重复测定，结果相对标准偏差为３．５６、３．２８，见表１。
表１精密度试验
２．３准确度试验２．３．１回收率试验果见表２。
２．３．２对照试验对ｌＯ份不同试样分别用本法和比色法”１测定，结果见表３。
表３本法与比色法Ⅲ实验结果对照
表２回收率试验
％
取２．２中１号样分别加入一
定量的丙二醛标准液，按分析步骤分别测定６次，结
ｎ倒［００９
经统计配对Ｉ检验（双侧），ｔ＝ｏ．２０６，ｌ。‘，）－２．２６２，ｌ＜ｂ∽），所以Ｐ＞Ｏ．０５．说明两种方法无显
著性差异。参考文献：
ｔｉｏ．＾［Ｊ］．Ｃｌｉｎ
ｔｈｅｎ，１９８７，３３：２２８９．
［２］李建武，等．硫代巴比妥酸荧光法测定血清及组织艏质
过氧化物【ｊ］第二军医大学学报，１９８＂／．８（５）：３７ｌ一
３７３．
【３］ＧＢ１０１４６－－８８．猪油卫生标准［Ｓ］．
［４］许龙福．猪油中Ｎ－－－－醛萃取比色检测法的改进［Ｊ］．内
Ｊ＾，Ｓｍｉｔｈ靶，Ｋｉｎ９６ｒ
ＶＥ，ｅｔａ１．Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｆｅｒｖａｌｓｆｏｒ
ｓｐｏｅｉｍｅｎ－ｒ＊ｈｔｅｄ
Ｖａｒｉａ—
［１］Ｋｉｌｔ
ｐｌａｓｍａ
品卫生，１９９３，（７）：５—７．
ｈｐｏｌ，ｍｒｉｄｅｓ：ａｇｅ－，ｓｅｘ－，ａｎｄ
中圈分类号：Ｒ１５；０６５７．３２文献标识码：Ｂ文章编号：１００４—８４５６（２００１）０４—００１６—０２
万方数据
・实验技术与方法・
腌腊肉制品中丙二醛测定方法的探讨
张荣华赵士权林明珠王秀兰车先（南京市卫生防疫站，江苏南京２１０００３）
丙二醛（ＭａｌｏｎｄｉａＬｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ），是油脂氧化变质生成的过氧化脂质，在热、光、重金属等过氧化物分解因子存在下，进一步分解产生的一种醛类物质。随着油脂氧化变质程度的发展，丙二醛含量较酸价及过氧化值有明显的增高。丙二醛具有灵敏的特性，稳定性好，是客观评价油脂酸败程度的敏感指标之一。目前丙二醛测定方法有高效液相色谱法、Ｉ”荧光法、”１比色法，”’前两法由于仪器昂贵而难以普及，比色法在试样处理上较繁琐，耗时长。本文对比色法进行了摸索和改进，使得测定简便快速，结果准确可靠，便于推广应用。现报告如下。１材料与方法１．１原理
油脂酸败产生的丙二醛，在酸性环境
ｃｍ比色皿，以空白溶液作参比浏其吸光度，绘制校正曲线。
将试样切碎，置于具塞三角烧瓶内，用石油醚浸泡过夜，倒出挥干石油醚，油脂备用。
准确称取１０ｗ油脂置于１００ｍＬ有盖三角瓶内，加入５０ｍＬ三氯醋酸混合液，振摇３０ｒａｉｎ，用双层滤纸过滤，滤液备用。
试样测定取上述滤液５ｍＬ置于２５ｍＬ纳氏比色管内，以下同校正曲线锎作方法操作，从校正曲线上查出丙二醛含量。
计算：
Ｊ
Ｃ
２—ｌＯ—ｘ——５—／５２０—ｘ—Ｉ—０—００。１００
ｇｏ
式中：ｃ——试样中丙二醛的含量，ｍｇ，１００
中，一份丙二醛与二份硫代巴比妥酸（耶Ａ）经加热
形成红色络食物，在５３１ｎｍ波长处有吸收高峰，与标准系列比较可定量。
１．２试剂ＴＢＡ水溶液准确称取ＴＢＡ（瑞士产品）溶于水中至ｌ可加热到全溶。
三氯醋酸混合物准确称取三氯醋酸（Ａ．Ｒ级）
７５
０００
＾——试样中丙二醛的相应含量，螂。
２结果与讨论２．１实验囊件选捧
２．１．１吸收光谱的选择取１０ｍＬ含３Ｐｇ丙二醛的标准溶液，按方法显色后于波长４００—６００ｎｕｌ区扫描。丙二醛与ＴＢＡ形成的红色络合物在５３１法选择５３１ｒｉｍ作为丙二醛测定波长。
ｎｍ
０．２８８
ｚ
ｎｌＬ，如ＴＢＡ不易溶解，
有最大吸收（见图１），与有关文献“１报道一致。本
ｇ及０．１
ｇ
Ｅ瑚ｒＡ（乙二胺四乙酸二钠，＾．Ｒ级）用
ｍＬ。
水溶解，稀释到１００
丙二醛储备液精确称取ｌ，Ｉ，３，３－四乙氯醛丙烷（Ｅ．Ｍｅｓｃｋ９７％）Ｏ．３１５ｇ，溶解后稀释到ｌ（每毫升相当于丙二醛含量为１００ｎ骣）。
丙二醛标准使用液ｍｇ），置冰箱备用。
１．３仪器Ｄｕ．６４０紫外可见分光光度计。
１．４方法校正曲线的绘制分别吸取０．０、０．１、
０．２、ｏ．３、０．４、Ｏ．５
０００ｍＬ
精确称取上述储备液１０
ｍＬ稀释到１００ｍＬ（每毫升相当于丙二醛含量为１０
ｍＬ（相当于丙二醛０．０、Ｉ．０、２．Ｏ、
３．０、４．０、５．０熘）标准使用液于２５ｍＬ纳氏比色管，加入５
ｍＬ
ＴＢＡ溶液，混匀，加塞，置于９０℃水浴中
保温４０ｍｉｎ，取出，冷却ｌｈ，在５３１
ｍ波长处，用ｌ
图ｌ丙二醛与＂Ｉｌｉａ的红色培台物的嗳收光谱
中骨★量卫生杂毒２００ｔ年簟ｉ３卷摹４期
万方数据
节为１、２、３、４、５，然后显色，结果显示溶液ｐＨ为２的吸光度最高，本法选择ｐＨ２溶液。２．１．３９０℃水浴中保温时间的选择溶液加ＴＢＡ后，置９０℃水浴中分别保温１０、２０、３０、４０、５０、６０ｍｉｎ，结果显示，１０ｍｉｎ吸光值最低，随保温时间的增
加，吸光值逐渐增大。柏一６０ｒａｉｎ达到最大显色强度且一致，本法选用９０℃水浴中保温时间４０
ｒａｉｎ。
２．２精密度试验对两份试样分别在不同时间各进行７次重复测定，结果相对标准偏差为３．５６、３．２８，见表１。
表１精密度试验
２．３准确度试验２．３．１回收率试验果见表２。
２．３．２对照试验对ｌＯ份不同试样分别用本法和比色法”１测定，结果见表３。
表３本法与比色法Ⅲ实验结果对照
表２回收率试验
％
取２．２中１号样分别加入一
定量的丙二醛标准液，按分析步骤分别测定６次，结
ｎ倒［００９
经统计配对Ｉ检验（双侧），ｔ＝ｏ．２０６，ｌ。‘，）－２．２６２，ｌ＜ｂ∽），所以Ｐ＞Ｏ．０５．说明两种方法无显
著性差异。参考文献：
ｔｉｏ．＾［Ｊ］．Ｃｌｉｎ
ｔｈｅｎ，１９８７，３３：２２８９．
［２］李建武，等．硫代巴比妥酸荧光法测定血清及组织艏质
过氧化物【ｊ］第二军医大学学报，１９８＂／．８（５）：３７ｌ一
３７３．
【３］ＧＢ１０１４６－－８８．猪油卫生标准［Ｓ］．
［４］许龙福．猪油中Ｎ－－－－醛萃取比色检测法的改进［Ｊ］．内
Ｊ＾，Ｓｍｉｔｈ靶，Ｋｉｎ９６ｒ
ＶＥ，ｅｔａ１．Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｆｅｒｖａｌｓｆｏｒ
ｓｐｏｅｉｍｅｎ－ｒ＊ｈｔｅｄ
Ｖａｒｉａ—
［１］Ｋｉｌｔ
ｐｌａｓｍａ
品卫生，１９９３，（７）：５—７．
ｈｐｏｌ，ｍｒｉｄｅｓ：ａｇｅ－，ｓｅｘ－，ａｎｄ
中圈分类号：Ｒ１５；０６５７．３２文献标识码：Ｂ文章编号：１００４—８４５６（２００１）０４—００１６—０２
万方数据