人免疫缺陷病毒对热和干燥的抗力研究

478

第一届中国艾擞病性病防治大会论文集2001.11

13~16

46

H1V感染引起L细胞计数进行性减少的同

LiTS.tubiartaR.KatlamaC,ctalLonglastingrecoveryinCD4+

Tcel】funclion

时,细胞功能也严重受损。细胞亚群的整体变化及其与疾病进展的高度相关性表明,在评价HIV感染者和AIDS病人的免疫状况时,不仅要考虑细胞数量的变化,还应虑及细胞的功能水平、激活水平和增殖水

minorsviralloadreductionafterhighlyaetlveantizetro—

viralthelapyinpetiq=aalswlthadvancedHIV

351:1682~l686Goroehov

m㈣L∞∞t,1998.

grogree5sjon

G,Neuntm'm

Au,Kereneur

A,pari∞tC,Li"IS,ttd.Fer・

to

turabationof

CD4衄dCDaTcellrepertoir葛during

平。这些细胞亚群的检测对HIv感染的临床治疗和科研都具有重要意义。

AIDSandirdluenceofaativiraltherapyNatureMedldne.1998.49

(2):215~22l

C删恼nG.LiTS

97

et

dImmunereecHastt[tutioadur[onghighlyactive

参考文献

atttiretroviraltherapiesCurrentTrendsinimml】nolcgy.1999.2:87~

LI…deft・

city珂nd州me‘AIDS)si吼睫,1983,220:868~871

human…od—

photmpicrdtrovirus

Barre—Sinou蛆i

F.Ch即一JC.ReyMT,Hfrom

pallet

al

d.19口lat0T】otaTlym・

LiTS.Negativatloncific

DfCMVvlre,niawithregtorationofCMV—spa—

pal[eatstreatedbyHAART

riskforacquired

i—unity

AIDSand8

CollierA.CoorabsR.Schoer“dd.etatTrea日nentof

H㈨Re_【rovirology.1999.20:514~515

TS舢tranB.Immuneree邮titutiun

in蚰HIV—infetted

Jof

CaeeehainG.Li

underh嘧hlya夺

efldency“nBinfectionwithsaquinavirzldovudineandzalcitahine

rive趿nretroir缸thc哺py

AIDSRev,1999.1:51~56

patho骷nesbofHIV—induced

dLsease.

EnglJ

Med.1996.∞4:1

011~1017

et

FauclAHostfactorsandthe

AummB.CAll33elgitt

G.LiTs

on

dPositiveeffectsofcombined

an—

tiRtrovind

Therapy

m+Tcell

NatLwe.1996,394:529~534

homeostasisandhmctioninad-

10王福生.蒋建隶.我国^群中HIV一1感染协同受体OCR5/532

突变的韧步检谢.中华医学杂志.2000,80:291~292

一ed

H1V

db啦scimlee.1997.277:112~16

人免疫缺陷病毒对热和干燥的抗力研究

米献淼李敬云鲍作又王宏霞

摘要

目的理寨HIV对热和干爆的抗力。方法f1)将HIV.1ⅢB株病毒在50—80℃范围内加热不同时间,燕后接种

MT4细盥.在培养的第7天观察细胞病变井检爿上请液中的P24抗原。(2)将HIV.1ⅢB株病毒清加在灭菌干攥的溶坻片上,一定时

问后将滤纸片敢人音MT6细胞的培养瓶中培养,第7天观寨细取宿变并谊涮上精藏中的p2A.抗原。结果程废上升蓟55"E时.矗4

抗原的01)值随着加热时问的延长和温度的提高而逐步下降.55"(3加热30rain,60~70℃加热lOmin就可以使HIV灭括。75'C以上

5min内HIV灭活。在干操条件下HIV在10—12min内失去感染性。结论HIV是热敏砬.不耐干燥的病毒.55"C加热30rain死

亡,65℃以上热处理10min可灭话HIV。在干爆条件下.HIV很快(10rain左右)死亡,因此HIV阳性的血液或件蒗污染的环境不会造成传播。对污染的物品煮弗和晾晒处理是有救的灭括HIV的方法。

美叠词HIV热力干蠊

众所周知,人类免疫缺陷病毒(HIv)对理化因紊

的抵抗力很差.在离体条件下不能长期存活,这也就是为什么HIv的传播途径非常局限,不能通过污染

燥条件下可以生存1~3天。这些不同的说法使在第一线从事培训和防治工作的同志感到无所适从。为此我们系统研究了HIv对热和干燥的抗力。

1材料和方法

1.1病毒和细胞使用HIV一1ⅢB株,在MT4细胞上培养和传代。

的环境传播。但是HIV究竟对常见的物理因素敏感到什么程度?对这一点多数书籍众说纷纭有的甚至

相互矛盾,原因是这些资料全部来源于外文文献并相

互引用。如关于有效灭活HIV的温度,有的书中介

绍HIV不耐高温,56℃30min死亡,而另外的书籍则显示HIV必须经71℃25min或煮沸20rain才可灭

1.2病毒生长的监测方法(1)细胞病变:在显镜下观察细胞形态的变化。(2),24抗原测定:使用

Organon

Teknika公司或Biomeruix公司的P24抗原

细胞培养出现细胞病

活;关于HIV对干燥的抗力,有的书中提到HIV室温离开人体后数分钟死亡,也有的却指出HIV在干

作者单位:军事医学科学院生钧流行病研究所(北京市100071)

ELISA测定试剂盒,按照说明书操作。

1.3判断HIV存活的标准

第一居中国艾难病性病醅泊大会论文集2001.11

13~16

479

变和/或,24抗原OD值升高。

裹1不同温度一时间螽件下l:lI',g培养的r,24抗厦IOD僵)

1.4实验方法

1.4.1热敏盛实验将HIV病毒悬液放人不同温

度的水浴中加热不同时间后取样,在已经加入ML

细胞的96孔细胞板中培养,培养第7天观察细胞病

变,同时留取培养上清液测定,24抗原。设定的温度

是50℃,55℃,60℃,65℃,70℃,75℃,80℃,在不同的温度条件下加热0,5,10,15,20,25,30min。

1.4.2干燥敏感实验将10以HIV病毒悬液滴在HIV对湿度十分敏感,温度上升到55"C以上灭菌干燥滤纸片上,不同时间后将滤纸片加入已含时,P24抗原的OD值随着加热时间的延长和温度的MT4细胞的细胞培养瓶中培养。培养第7天观察细提高而逐步下降,5513加热30rain,60~7013加热胞病变,同时留取培养上清液测定P24抗原。

10rain就可以使HIV灭活。75"C以上5min内HIV

2结果

灭活。

2・1不同温度一I-161"FHIV的存活情况

表2干燥不同时闻f0~7小时)Ⅲv基染导致的细胞胄壹和p24抗,It

2.2干燥条件下ItlV的存活情况

注.车雇对用:10脚病毒煮沸灭括后加^缩胞瓶培养,取上精幢测PTA.抗原

在0~7小时范围内的观察(表2),发现在干燥

右)死亡,因此HIV阳性的血液或体液污染的环境不条件下,HIV的死亡时间在10~20min之间。对0~

会造成传播。同时对污染的物品进行煮沸和晾晒处

20min内的变化进行了详细研究(表3),发现在10~理是有效的灭活HIV的方法。

12min内。24抗原的浓度降到本底对照水平,可基本本实验使用传代的HIV毒株,与实际情况有一上认为HIV是在这期问死亡的。

些差别。实际情况下遇到的是各种不同表型的HIv3讨论

临床毒株,并且是在蛋白浓度很高的血清或各种体液实验的结果表明FIIV是热敏感,不耐干燥的病

(精液,阴道分泌物等)中。高浓度蛋白可能对HIV毒,55℃加热30min死亡,65℃以上热处理10rain可

有保护作用,临床分离毒株的抗力也可能与实验室传灭活H1V。另外在干燥条件下,HIV很快(10rain左

代的毒株有一些差别,这些是本研究的局限性。

I-IIV在注射器中的存活时间和影响因素研究

米献淼李敬云

摘要

目的

观察HIV-1在临床各种用途注射器残留液悻中的存活时间以厦影响日棠。方法在1毫升注射嚣内残留不同

悻积(1p出、3舡】、5舡】、80.ul、100p1)的体棱(古lo%^血白蛋白的PBs)和8种临床常用药暂.加^不同涛魔舶HIV・1.室温放置不同时

间(1、3、5、7、14、21天)后,用MT.细胞进行培养,凡出班细胞病变和/或培养上滑中的P“抗原阳性和慷MT‘细胞HIV前病毒DNA

阳性的样品翔为有FIIV-1存秸。结果TCID50为6.50h的病毒在厚漱度、lo_1以厦lo。2三个澉度上一般均可存活1—5天,量长

作者单位:军事医学科学院徽生物流行病爵究所(北京市100071)

人免疫缺陷病毒对热和干燥的抗力研究

作者:作者单位:

米献淼, 李敬云, 鲍作义, 王宏霞

军事医学科学院生物流行病研究所(北京市)

1. 樊卫平. 张文福. 鲍作义. 王红霞. 李敬云. 吕富双 维生素C对人类免疫缺陷病毒灭活作用的研究[期刊论文]-中国药物与临床2004,4(7)

2. 李林. 应天翼. 庄道民. 鲍作义. 刘思扬. 李韩平. 刘永健. 杨坤. 李钰. 王恒良. 黄留玉. 李敬云 HIV感染导致MT4细胞蛋白表达差异的初步研究[期刊论文]-中国病毒学2004,19(5)3. 张耀辉. 刘志锋. 韦厚瑜 两种血清加热灭活法对HIV抗体和生化检测结果影响对比[期刊论文]-右江民族医学院学报2009,31(5)

4. 樊卫平. 李敬云. 鲍作义. 王红霞. 吕富双. FAN Wei-ping. LI Jing-yun. BAO Zuo-yi. WANG Hong-xia. L(U) Fu-shuang 自然环境中人类免疫缺陷病毒感染活力的探索[期刊论文]-中华医院感染学杂志2006,16(1)5. 李敬云. 鲍作义. 刘思扬. 王宏霞 我国几种人群艾滋病病毒感染率调查[会议论文]-2001

6. 张耀. 熊鸿燕. 马菲. 鲍作义 亚甲基蓝光化学法对全血中人免疫缺陷Ⅰ型病毒的灭活研究[期刊论文]-第三军医大学学报2004,26(21)7. 樊卫平. 陈向伟. 李敬云. 王红霞. 吕富双 灭活前后HIV-1生物学性状改变的研究[期刊论文]-山西医药杂志2000,29(5)8. 血液中HIV的灭活[期刊论文]-国外医学(输血及血液学分册)2003,26(1)

9. 王宏霞. 刘思扬. 鲍作义. 李敬云 三种中药制剂抑制鼠艾滋病病毒(MuLV)复制的体内实验研究[会议论文]-2001

10. 李珏. 鲍作义. 刘思扬. 庄道民. 李韩平. 刘永健. 李林. 杨坤. 李敬云 HIV-1拉米夫定(3TC)耐药毒株的体外诱导培育和鉴定[会议论文]-2006

本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Conference_3316325.aspx

478

第一届中国艾擞病性病防治大会论文集2001.11

13~16

46

H1V感染引起L细胞计数进行性减少的同

LiTS.tubiartaR.KatlamaC,ctalLonglastingrecoveryinCD4+

Tcel】funclion

时,细胞功能也严重受损。细胞亚群的整体变化及其与疾病进展的高度相关性表明,在评价HIV感染者和AIDS病人的免疫状况时,不仅要考虑细胞数量的变化,还应虑及细胞的功能水平、激活水平和增殖水

minorsviralloadreductionafterhighlyaetlveantizetro—

viralthelapyinpetiq=aalswlthadvancedHIV

351:1682~l686Goroehov

m㈣L∞∞t,1998.

grogree5sjon

G,Neuntm'm

Au,Kereneur

A,pari∞tC,Li"IS,ttd.Fer・

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CD4衄dCDaTcellrepertoir葛during

平。这些细胞亚群的检测对HIv感染的临床治疗和科研都具有重要意义。

AIDSandirdluenceofaativiraltherapyNatureMedldne.1998.49

(2):215~22l

C删恼nG.LiTS

97

et

dImmunereecHastt[tutioadur[onghighlyactive

参考文献

atttiretroviraltherapiesCurrentTrendsinimml】nolcgy.1999.2:87~

LI…deft・

city珂nd州me‘AIDS)si吼睫,1983,220:868~871

human…od—

photmpicrdtrovirus

Barre—Sinou蛆i

F.Ch即一JC.ReyMT,Hfrom

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al

d.19口lat0T】otaTlym・

LiTS.Negativatloncific

DfCMVvlre,niawithregtorationofCMV—spa—

pal[eatstreatedbyHAART

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i—unity

AIDSand8

CollierA.CoorabsR.Schoer“dd.etatTrea日nentof

H㈨Re_【rovirology.1999.20:514~515

TS舢tranB.Immuneree邮titutiun

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Jof

CaeeehainG.Li

underh嘧hlya夺

efldency“nBinfectionwithsaquinavirzldovudineandzalcitahine

rive趿nretroir缸thc哺py

AIDSRev,1999.1:51~56

patho骷nesbofHIV—induced

dLsease.

EnglJ

Med.1996.∞4:1

011~1017

et

FauclAHostfactorsandthe

AummB.CAll33elgitt

G.LiTs

on

dPositiveeffectsofcombined

an—

tiRtrovind

Therapy

m+Tcell

NatLwe.1996,394:529~534

homeostasisandhmctioninad-

10王福生.蒋建隶.我国^群中HIV一1感染协同受体OCR5/532

突变的韧步检谢.中华医学杂志.2000,80:291~292

一ed

H1V

db啦scimlee.1997.277:112~16

人免疫缺陷病毒对热和干燥的抗力研究

米献淼李敬云鲍作又王宏霞

摘要

目的理寨HIV对热和干爆的抗力。方法f1)将HIV.1ⅢB株病毒在50—80℃范围内加热不同时间,燕后接种

MT4细盥.在培养的第7天观察细胞病变井检爿上请液中的P24抗原。(2)将HIV.1ⅢB株病毒清加在灭菌干攥的溶坻片上,一定时

问后将滤纸片敢人音MT6细胞的培养瓶中培养,第7天观寨细取宿变并谊涮上精藏中的p2A.抗原。结果程废上升蓟55"E时.矗4

抗原的01)值随着加热时问的延长和温度的提高而逐步下降.55"(3加热30rain,60~70℃加热lOmin就可以使HIV灭括。75'C以上

5min内HIV灭活。在干操条件下HIV在10—12min内失去感染性。结论HIV是热敏砬.不耐干燥的病毒.55"C加热30rain死

亡,65℃以上热处理10min可灭话HIV。在干爆条件下.HIV很快(10rain左右)死亡,因此HIV阳性的血液或件蒗污染的环境不会造成传播。对污染的物品煮弗和晾晒处理是有救的灭括HIV的方法。

美叠词HIV热力干蠊

众所周知,人类免疫缺陷病毒(HIv)对理化因紊

的抵抗力很差.在离体条件下不能长期存活,这也就是为什么HIv的传播途径非常局限,不能通过污染

燥条件下可以生存1~3天。这些不同的说法使在第一线从事培训和防治工作的同志感到无所适从。为此我们系统研究了HIv对热和干燥的抗力。

1材料和方法

1.1病毒和细胞使用HIV一1ⅢB株,在MT4细胞上培养和传代。

的环境传播。但是HIV究竟对常见的物理因素敏感到什么程度?对这一点多数书籍众说纷纭有的甚至

相互矛盾,原因是这些资料全部来源于外文文献并相

互引用。如关于有效灭活HIV的温度,有的书中介

绍HIV不耐高温,56℃30min死亡,而另外的书籍则显示HIV必须经71℃25min或煮沸20rain才可灭

1.2病毒生长的监测方法(1)细胞病变:在显镜下观察细胞形态的变化。(2),24抗原测定:使用

Organon

Teknika公司或Biomeruix公司的P24抗原

细胞培养出现细胞病

活;关于HIV对干燥的抗力,有的书中提到HIV室温离开人体后数分钟死亡,也有的却指出HIV在干

作者单位:军事医学科学院生钧流行病研究所(北京市100071)

ELISA测定试剂盒,按照说明书操作。

1.3判断HIV存活的标准

第一居中国艾难病性病醅泊大会论文集2001.11

13~16

479

变和/或,24抗原OD值升高。

裹1不同温度一时间螽件下l:lI',g培养的r,24抗厦IOD僵)

1.4实验方法

1.4.1热敏盛实验将HIV病毒悬液放人不同温

度的水浴中加热不同时间后取样,在已经加入ML

细胞的96孔细胞板中培养,培养第7天观察细胞病

变,同时留取培养上清液测定,24抗原。设定的温度

是50℃,55℃,60℃,65℃,70℃,75℃,80℃,在不同的温度条件下加热0,5,10,15,20,25,30min。

1.4.2干燥敏感实验将10以HIV病毒悬液滴在HIV对湿度十分敏感,温度上升到55"C以上灭菌干燥滤纸片上,不同时间后将滤纸片加入已含时,P24抗原的OD值随着加热时间的延长和温度的MT4细胞的细胞培养瓶中培养。培养第7天观察细提高而逐步下降,5513加热30rain,60~7013加热胞病变,同时留取培养上清液测定P24抗原。

10rain就可以使HIV灭活。75"C以上5min内HIV

2结果

灭活。

2・1不同温度一I-161"FHIV的存活情况

表2干燥不同时闻f0~7小时)Ⅲv基染导致的细胞胄壹和p24抗,It

2.2干燥条件下ItlV的存活情况

注.车雇对用:10脚病毒煮沸灭括后加^缩胞瓶培养,取上精幢测PTA.抗原

在0~7小时范围内的观察(表2),发现在干燥

右)死亡,因此HIV阳性的血液或体液污染的环境不条件下,HIV的死亡时间在10~20min之间。对0~

会造成传播。同时对污染的物品进行煮沸和晾晒处

20min内的变化进行了详细研究(表3),发现在10~理是有效的灭活HIV的方法。

12min内。24抗原的浓度降到本底对照水平,可基本本实验使用传代的HIV毒株,与实际情况有一上认为HIV是在这期问死亡的。

些差别。实际情况下遇到的是各种不同表型的HIv3讨论

临床毒株,并且是在蛋白浓度很高的血清或各种体液实验的结果表明FIIV是热敏感,不耐干燥的病

(精液,阴道分泌物等)中。高浓度蛋白可能对HIV毒,55℃加热30min死亡,65℃以上热处理10rain可

有保护作用,临床分离毒株的抗力也可能与实验室传灭活H1V。另外在干燥条件下,HIV很快(10rain左

代的毒株有一些差别,这些是本研究的局限性。

I-IIV在注射器中的存活时间和影响因素研究

米献淼李敬云

摘要

目的

观察HIV-1在临床各种用途注射器残留液悻中的存活时间以厦影响日棠。方法在1毫升注射嚣内残留不同

悻积(1p出、3舡】、5舡】、80.ul、100p1)的体棱(古lo%^血白蛋白的PBs)和8种临床常用药暂.加^不同涛魔舶HIV・1.室温放置不同时

间(1、3、5、7、14、21天)后,用MT.细胞进行培养,凡出班细胞病变和/或培养上滑中的P“抗原阳性和慷MT‘细胞HIV前病毒DNA

阳性的样品翔为有FIIV-1存秸。结果TCID50为6.50h的病毒在厚漱度、lo_1以厦lo。2三个澉度上一般均可存活1—5天,量长

作者单位:军事医学科学院徽生物流行病爵究所(北京市100071)

人免疫缺陷病毒对热和干燥的抗力研究

作者:作者单位:

米献淼, 李敬云, 鲍作义, 王宏霞

军事医学科学院生物流行病研究所(北京市)

1. 樊卫平. 张文福. 鲍作义. 王红霞. 李敬云. 吕富双 维生素C对人类免疫缺陷病毒灭活作用的研究[期刊论文]-中国药物与临床2004,4(7)

2. 李林. 应天翼. 庄道民. 鲍作义. 刘思扬. 李韩平. 刘永健. 杨坤. 李钰. 王恒良. 黄留玉. 李敬云 HIV感染导致MT4细胞蛋白表达差异的初步研究[期刊论文]-中国病毒学2004,19(5)3. 张耀辉. 刘志锋. 韦厚瑜 两种血清加热灭活法对HIV抗体和生化检测结果影响对比[期刊论文]-右江民族医学院学报2009,31(5)

4. 樊卫平. 李敬云. 鲍作义. 王红霞. 吕富双. FAN Wei-ping. LI Jing-yun. BAO Zuo-yi. WANG Hong-xia. L(U) Fu-shuang 自然环境中人类免疫缺陷病毒感染活力的探索[期刊论文]-中华医院感染学杂志2006,16(1)5. 李敬云. 鲍作义. 刘思扬. 王宏霞 我国几种人群艾滋病病毒感染率调查[会议论文]-2001

6. 张耀. 熊鸿燕. 马菲. 鲍作义 亚甲基蓝光化学法对全血中人免疫缺陷Ⅰ型病毒的灭活研究[期刊论文]-第三军医大学学报2004,26(21)7. 樊卫平. 陈向伟. 李敬云. 王红霞. 吕富双 灭活前后HIV-1生物学性状改变的研究[期刊论文]-山西医药杂志2000,29(5)8. 血液中HIV的灭活[期刊论文]-国外医学(输血及血液学分册)2003,26(1)

9. 王宏霞. 刘思扬. 鲍作义. 李敬云 三种中药制剂抑制鼠艾滋病病毒(MuLV)复制的体内实验研究[会议论文]-2001

10. 李珏. 鲍作义. 刘思扬. 庄道民. 李韩平. 刘永健. 李林. 杨坤. 李敬云 HIV-1拉米夫定(3TC)耐药毒株的体外诱导培育和鉴定[会议论文]-2006

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