第5卷第10期V ol.5 No.10南方农业
South China Agriculture2011年10月Oct.2011
金线莲组培快繁技术研究
罗庆国，叶 炜，江金兰，谢 嫦，李永清（福建省三明市农业科学研究所，沙县 365509）
摘 要 : 以金线莲植株茎段为外植体，MS 为基本培养基，附加不同浓度的植物生长调节剂组合进行组织培养与快繁研究，结果表明不定芽诱导与继代增殖的较适宜的培养基分别为MS+6-BA1.0 mg/L+KT1.0 mg/L，MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L; 生根培养基以MS+IBA0.5 mg/L+活性炭0.5 g/L+香蕉泥20 g/L为宜。
关键词 : 金线莲; 组织培养; 快速繁殖中图分类号: S567 文献标识码: A
金线莲（Anoectochilus roxburghii）别名金线兰、金丝草，为兰科开唇兰属多年生草本植物，性喜阴凉、潮湿，主要分布在我国福建、台湾、广东、广西、海南、四川、贵州和云南等海拔在300～1200 m的丘陵地带[1]。有关部门测定发现，金线莲中氨基酸含量、抗衰老活性微量元素的含量均高于野生西洋参，是福建、台湾、东南亚地区的珍稀名贵药材。在中药界，金线莲有“金草”、“神药”之称，台湾地区称之为“中药之王”。金线莲除药用外，其株型小巧美观，叶脉金黄色呈网状排列，是一种极具观赏价值的室内观赏珍品[2－4]。金线莲的种子发育不全，在自然条件下发芽率极低，由于其对生态环境要求严格，加之近年自然环境遭受严重破坏，人工过度采挖，野生资源越来越少[5]。利用植物组织培养技术可大大提高繁殖速度，解决金线莲种苗来源，加大人工栽培规模，满足人们用药及观赏需求，并有效地保护野生资源[6]。
以MS 为基本培养基，附加糖3％，琼脂5.5 g/L，pH 值为5.6，根据不同的培养阶段，添加不同的植物生长调节剂和有机添加物。培养温度为(23±2) ℃，光照强度为1200～1600 lx，光照时间为12 h/d。1.2.1 外植体处理及不定芽的诱导
用自来水将植株清洗干净后去除根、叶，在超净工作台上先用72%酒精浸泡60 s，无菌水清洗3次，再用0.1% 的HgCl 溶液浸泡18 min，无菌水冲洗3遍，切成带有2节的茎段，接种到添加不同浓度6-BA 、KT 的培养基上，诱导不定芽，试验设6个处理，每个处理接8瓶，每瓶接1个茎段，30 d后观察诱导效果。1.2.2 丛生芽的继代增殖
将长为1.5～2.0 cm的芽切分，转接到添加不同浓度6-BA 、NAA 的增殖培养基上进行继代增殖培养，试验设6个处理，每个处理接6瓶，每瓶接2个丛生芽块，30 d后观察增殖效果。1.2.3 诱导生根培养
1 材料与方法
1.1 材料
以从福建省永安市采集的野生金线莲植株茎段为外植体材料。1.2 方法
第一作者简介: 罗庆国（1983—），男，汉族，福建永安人，本科，研究实习员，主要从事植物组织培养研究工作。E-mail: [email protected]。
选取2 cm长的无根丛生苗接种到添加不同浓度IBA 及有机添加物的促根诱导培养基上，试验设4个处理，每个处理接10瓶，每瓶接6株苗，30 d后统计生根效果。
2 结果与分析
2.1 植物生长调节剂对金线莲不定芽诱导的影响
结果表明，带有茎节段的外植体在不同的诱导培
罗庆国，叶 炜，江金兰，等: 金线莲组培快繁技术研究
养基上均能萌发不定芽，分别添加6-BA 和KT 的培养基所诱导的不定芽数大体相当，同时添加6-BA 和KT 的培养基较单独添加的培养基有更明显的诱导效果。由表1可知，6-BA1.0 mg/L＋KT1.0 mg/L配比所诱导的不定芽色绿、粗壮，是较适宜的诱导组合。
表1 不同浓度配比的植物生长调节剂对金线莲芽诱导的影响
处理代号123456
6-BA (mg/L)1.02.0001.02.0
KT (mg/L)001.02.01.02.0
接种茎段数888888
不定芽数[1**********]9
芽生长状况色嫩绿、细弱色绿、较壮色黄、较壮色黄、细弱色绿、粗壮色绿、细弱
处理代号1234
表3 IBA、添加物对金线莲丛生苗生根的影响
IBA(mg/L)
0.10.50.10.5
香蕉泥(g/L)002020
活性炭(g/L)0.50.50.50.5
平均根数(条) 2.32.82.43.0
根生长状况细弱较粗粗壮粗壮
2.3 I BA 、香蕉泥对丛生苗生根的影响
将2 cm长的丛生苗切下，转接到添加IBA 、活性炭的根诱导培养基上，由表3可以看出，IBA0.5 mg/L＋活性炭0.5 g/L＋香蕉泥20 g/L的培养基生根效果最好，植株平均根数可达3.0条，根粗壮，植株长势良好。
2.2 6-BA、NAA 对丛生芽增殖的影响
在丛生芽继代增殖过程中，较高浓度6-BA 的培养基的增殖倍数比低浓度的增殖倍数相对更高，但高浓度条件下的苗生长状况较差，主要表现为植株较细弱、叶色较黄。另外，添加一定浓度的NAA 可以起到调节丛生芽的株型、叶色的效果，其中以添加NAA0.5 mg/L的效果最好，植株生长健壮、茎粗壮、金色叶脉明显。
3 结论
金线莲属阴性植物，组培室内温度在23 ℃左右时长势良好。在不定芽诱导和继代增殖培养的前期，可利用散光培养促进芽的分化。另外，在诱导过程中发现，与植株顶端和基部茎段相比，中部茎段外植体的不定芽萌动时间更短，不定芽体更健壮。因此，植株的中部是作为金线莲快繁外植体的最佳选择。
由于组织培养获得的金线莲植株与野生的生长环
表2 不同浓度的植物生长调节剂对金线莲丛生芽增殖的影响
处理代号
123456
6-BA(mg/L)
1.01.01.02.02.02.0
NAA(mg/L)
00.10.500.10.5
接种芽数[1**********]2
增殖芽数[1**********]6
增殖倍数1.501.752.002.002.082.17
苗生长状况叶色绿、茎较粗叶色绿、叶脉明显、茎较粗叶色绿、叶脉明显、茎粗叶色黄绿、茎较粗叶色绿、茎细叶色黄绿、茎细
境不同，其体内的药用化学成分含量及药理活性[7]等方面是否存在差异还有待更进一步研究。参考文献
[1] 岑秀芬, 韦鹏霄, 刘芳. 植物生长调节剂对台湾
金线莲试管苗增殖和生根的影响[J].广西农学报,2009,24(2):19－21.
[2] 马志杰, 胡宏友. 民间药材金线莲研究动态[J].亚热
带植物科学,2002,31(增刊):27－31.
[3] 许文江, 陈裕, 林坤瑞. 药用野生金线莲植物资源的
研究[J].福建热作科技,2000,25(4):9.
[4] 陈兆贵. 金线莲组织培养和移栽技术研究[J].惠州
学院学报,2007,27(6):14－17.
[5] 毛碧增, 娄沂春. 金线莲的快速繁殖[J].浙江大学学
报,1999,25(5):527－528.
[6] 冯亦平, 张利平, 王岩花. 金线莲外植体的筛选及不
定芽诱导的研究[J].种子,2009,28(10):19－22. [7] 张红艳, 潘馨. 金线莲化学成分及药理活性研究进
展[J].海峡药学,2009,21(1):82－84.
（责任编辑: 敬廷桃）
第5卷第10期V ol.5 No.10南方农业
South China Agriculture2011年10月Oct.2011
金线莲组培快繁技术研究
罗庆国，叶 炜，江金兰，谢 嫦，李永清（福建省三明市农业科学研究所，沙县 365509）
摘 要 : 以金线莲植株茎段为外植体，MS 为基本培养基，附加不同浓度的植物生长调节剂组合进行组织培养与快繁研究，结果表明不定芽诱导与继代增殖的较适宜的培养基分别为MS+6-BA1.0 mg/L+KT1.0 mg/L，MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L; 生根培养基以MS+IBA0.5 mg/L+活性炭0.5 g/L+香蕉泥20 g/L为宜。
关键词 : 金线莲; 组织培养; 快速繁殖中图分类号: S567 文献标识码: A
金线莲（Anoectochilus roxburghii）别名金线兰、金丝草，为兰科开唇兰属多年生草本植物，性喜阴凉、潮湿，主要分布在我国福建、台湾、广东、广西、海南、四川、贵州和云南等海拔在300～1200 m的丘陵地带[1]。有关部门测定发现，金线莲中氨基酸含量、抗衰老活性微量元素的含量均高于野生西洋参，是福建、台湾、东南亚地区的珍稀名贵药材。在中药界，金线莲有“金草”、“神药”之称，台湾地区称之为“中药之王”。金线莲除药用外，其株型小巧美观，叶脉金黄色呈网状排列，是一种极具观赏价值的室内观赏珍品[2－4]。金线莲的种子发育不全，在自然条件下发芽率极低，由于其对生态环境要求严格，加之近年自然环境遭受严重破坏，人工过度采挖，野生资源越来越少[5]。利用植物组织培养技术可大大提高繁殖速度，解决金线莲种苗来源，加大人工栽培规模，满足人们用药及观赏需求，并有效地保护野生资源[6]。
以MS 为基本培养基，附加糖3％，琼脂5.5 g/L，pH 值为5.6，根据不同的培养阶段，添加不同的植物生长调节剂和有机添加物。培养温度为(23±2) ℃，光照强度为1200～1600 lx，光照时间为12 h/d。1.2.1 外植体处理及不定芽的诱导
用自来水将植株清洗干净后去除根、叶，在超净工作台上先用72%酒精浸泡60 s，无菌水清洗3次，再用0.1% 的HgCl 溶液浸泡18 min，无菌水冲洗3遍，切成带有2节的茎段，接种到添加不同浓度6-BA 、KT 的培养基上，诱导不定芽，试验设6个处理，每个处理接8瓶，每瓶接1个茎段，30 d后观察诱导效果。1.2.2 丛生芽的继代增殖
将长为1.5～2.0 cm的芽切分，转接到添加不同浓度6-BA 、NAA 的增殖培养基上进行继代增殖培养，试验设6个处理，每个处理接6瓶，每瓶接2个丛生芽块，30 d后观察增殖效果。1.2.3 诱导生根培养
1 材料与方法
1.1 材料
以从福建省永安市采集的野生金线莲植株茎段为外植体材料。1.2 方法
第一作者简介: 罗庆国（1983—），男，汉族，福建永安人，本科，研究实习员，主要从事植物组织培养研究工作。E-mail: [email protected]。
选取2 cm长的无根丛生苗接种到添加不同浓度IBA 及有机添加物的促根诱导培养基上，试验设4个处理，每个处理接10瓶，每瓶接6株苗，30 d后统计生根效果。
2 结果与分析
2.1 植物生长调节剂对金线莲不定芽诱导的影响
结果表明，带有茎节段的外植体在不同的诱导培
罗庆国，叶 炜，江金兰，等: 金线莲组培快繁技术研究
养基上均能萌发不定芽，分别添加6-BA 和KT 的培养基所诱导的不定芽数大体相当，同时添加6-BA 和KT 的培养基较单独添加的培养基有更明显的诱导效果。由表1可知，6-BA1.0 mg/L＋KT1.0 mg/L配比所诱导的不定芽色绿、粗壮，是较适宜的诱导组合。
表1 不同浓度配比的植物生长调节剂对金线莲芽诱导的影响
处理代号123456
6-BA (mg/L)1.02.0001.02.0
KT (mg/L)001.02.01.02.0
接种茎段数888888
不定芽数[1**********]9
芽生长状况色嫩绿、细弱色绿、较壮色黄、较壮色黄、细弱色绿、粗壮色绿、细弱
处理代号1234
表3 IBA、添加物对金线莲丛生苗生根的影响
IBA(mg/L)
0.10.50.10.5
香蕉泥(g/L)002020
活性炭(g/L)0.50.50.50.5
平均根数(条) 2.32.82.43.0
根生长状况细弱较粗粗壮粗壮
2.3 I BA 、香蕉泥对丛生苗生根的影响
将2 cm长的丛生苗切下，转接到添加IBA 、活性炭的根诱导培养基上，由表3可以看出，IBA0.5 mg/L＋活性炭0.5 g/L＋香蕉泥20 g/L的培养基生根效果最好，植株平均根数可达3.0条，根粗壮，植株长势良好。
2.2 6-BA、NAA 对丛生芽增殖的影响
在丛生芽继代增殖过程中，较高浓度6-BA 的培养基的增殖倍数比低浓度的增殖倍数相对更高，但高浓度条件下的苗生长状况较差，主要表现为植株较细弱、叶色较黄。另外，添加一定浓度的NAA 可以起到调节丛生芽的株型、叶色的效果，其中以添加NAA0.5 mg/L的效果最好，植株生长健壮、茎粗壮、金色叶脉明显。
3 结论
金线莲属阴性植物，组培室内温度在23 ℃左右时长势良好。在不定芽诱导和继代增殖培养的前期，可利用散光培养促进芽的分化。另外，在诱导过程中发现，与植株顶端和基部茎段相比，中部茎段外植体的不定芽萌动时间更短，不定芽体更健壮。因此，植株的中部是作为金线莲快繁外植体的最佳选择。
由于组织培养获得的金线莲植株与野生的生长环
表2 不同浓度的植物生长调节剂对金线莲丛生芽增殖的影响
处理代号
123456
6-BA(mg/L)
1.01.01.02.02.02.0
NAA(mg/L)
00.10.500.10.5
接种芽数[1**********]2
增殖芽数[1**********]6
增殖倍数1.501.752.002.002.082.17
苗生长状况叶色绿、茎较粗叶色绿、叶脉明显、茎较粗叶色绿、叶脉明显、茎粗叶色黄绿、茎较粗叶色绿、茎细叶色黄绿、茎细
境不同，其体内的药用化学成分含量及药理活性[7]等方面是否存在差异还有待更进一步研究。参考文献
[1] 岑秀芬, 韦鹏霄, 刘芳. 植物生长调节剂对台湾
金线莲试管苗增殖和生根的影响[J].广西农学报,2009,24(2):19－21.
[2] 马志杰, 胡宏友. 民间药材金线莲研究动态[J].亚热
带植物科学,2002,31(增刊):27－31.
[3] 许文江, 陈裕, 林坤瑞. 药用野生金线莲植物资源的
研究[J].福建热作科技,2000,25(4):9.
[4] 陈兆贵. 金线莲组织培养和移栽技术研究[J].惠州
学院学报,2007,27(6):14－17.
[5] 毛碧增, 娄沂春. 金线莲的快速繁殖[J].浙江大学学
报,1999,25(5):527－528.
[6] 冯亦平, 张利平, 王岩花. 金线莲外植体的筛选及不
定芽诱导的研究[J].种子,2009,28(10):19－22. [7] 张红艳, 潘馨. 金线莲化学成分及药理活性研究进
展[J].海峡药学,2009,21(1):82－84.
（责任编辑: 敬廷桃）