观赏蕨类植物组培快繁及其移栽技术

江西农业学报 2006,18(5):125~126ActaAgriculturaeJiangxi

观赏蕨类植物组培快繁及其移栽技术

王宏航,李朝森,刘慧琴

(浙江省衢州市农业科学研究所,浙江衢州324000)

摘 要:以蕨类新萌发的侧芽为外植体,MS为基本培养基,添加不同浓度比例的细胞分裂素和生长素,进行诱导分化、增殖、生根试验。结果表明:MS+BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L增殖效果好;以1/2MS+IBA0.4mg/L培养基的生根效果最好。在炼苗移栽试验中,以穴盘为容器、蛭石为基质,移栽成活率高达94.5%;以草炭I珍珠岩=1I1为基质,移栽后期植株长势好。

关键词:蕨类;组织培养;快繁;移栽;外植体;培养基;激素

中图分类号:S682.35 文献标识码:A 文章编号:1001-8581(2006)05-0125-02

蕨类植物以它奇特的株形、飘逸的叶姿快速进入花卉市场,赢得消费者的喜爱。近年来,蕨类植物在我国发展迅速,生产面积和销售量逐年增加。蕨类植物常见的繁殖方法有孢子繁殖、分株繁殖和组织培养等几种方法,其中规模化生产通常采用组织培养。2003年衢州市农业科学研究所引进12个蕨类品种,开展组培技术研究及产业化生产。现将研究结果报道如下。

!"材料与方法

1.1 试验材料 植株新萌发的侧芽为外抗体。

1.2 激素及其纯度 6-苄基腺嘌呤(BA)、!-萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA),均为分析纯试剂,由上海伯奥生物科技有限公司提供。生产试验中使用普通琼脂条,以白砂糖代替蔗糖,以饮用水代替蒸馏水。

增殖培养基浓度

(mg/L)BA0.5+NAA0.1BA0.8+NAA0.2BA1.0+NAA0.3BA1.2+NAA0.4BA1.5+NAA0.5

表1 不同激素处理对组培苗增殖的影响

接种瓶数(瓶)55555

30d转接瓶数(瓶)1629354247

繁殖

系数3.25.87.08.49.4

性状表现 长势较好长势较好

长势良好

苗分化多,长势较弱

苗丛过密,微型化

1.3 培养条件 诱导分化培养基:MS+BA 注:每瓶接种蕨类苗数为4株。

2.0mg/L+NAA0.5mg/L+C1.0mg/L(活性炭)(单位下同);增殖培养基:MS+BA0.5~(见表1);生根培1.5+NAA0.1~0.5+C1.0

诱导分化培养基和增殖培养基蔗糖浓度为3.0%,生根培养基蔗糖浓度为2.0%;琼脂7g/L;pH5.8~6.0;培养温度(2512) 、光照强度2000lx,连续光照101/d。

生根培养基浓度

(mg/L)1/2MS+IBA0.21/2MS+IBA0.41/2MS+IBA0.61/2MS+IBA0.81/2MS+IBA1.0

表2 不同生根培养基对组培苗生根的影响

接种数(个)[1**********]0

生根数(条)[1**********]5

生根率(%)50.063.386.780.080.083.3

养基:1/2MS+IBA0~1.0+C1.0(见表2)。1/2MS

1.4 试验材料的处理 侧芽长至2叶1芽时,分株取出,流水下冲洗30min后,去除2张叶片,剪去根系,留上部茎段长约0.5~1.0cm,置超净工作台中,先用75%酒精中浸30S,用无菌水冲洗1次,转入0.1%升汞中消毒8min,用无菌水冲冼3~5次后,用无菌吸水纸吸去材料表面水分,接种到诱导分化培养基中,再依次转入增殖、生根培养基中,观察培养结果。

1.5 移栽基质的处理 蕨类组培苗的移栽采用基质栽培技术,使用国产草炭、珍珠岩和蛭石按不同比例混合,30d后统计移栽成活率(见表3和表4)。移栽前14d草炭用40%甲醛按30mL/m2用量对水100倍喷雾后覆膜熏蒸灭菌。蕨类植物喜酸性土壤,而珍珠岩偏碱性,使用前用5000~7000倍柠檬酸溶液浸洗,进行pH缓冲。

1.6 移栽苗栽培管理 移栽前将苗取出,冲洗掉附着在瓶苗基部的琼脂,用800倍液的多菌灵杀菌剂浸后,移栽到128孔方形穴盘中。移栽7d内覆膜增湿保温,使湿度保持在85%以上,温度保持在20 左右。10d左右通风透光,15d

收稿日期:2006-04-18

作者简介:王宏航,农艺师,从事园艺、生物技术研究。

126

江 西 农 业 学 报 18卷

以后进行营养成份的补充,每7d喷施1次1/2MS全营养液或2500倍的海草肥,水分管理上要掌握干湿交替,促进根系生长。蕨类植物耐荫性强,后期管理可适当遮荫,以避开强光照。

!"结果与分析

2.1 不同激素配比对增殖率的影响 在诱导分化培养基中35d左右的无菌苗四周萌发不定芽。将苗切下转入增殖培养基(见表1)中。结果显示,不同细胞分裂素和生长素浓度处理中,组培苗以培养基MS+BA1.0+NAA0.3中的30d形成丛生苗,长势良好,繁殖系数可达7.0左右。BA浓度低增殖率下降,BA浓度过高,组培苗分侧芽萌发迅速,化多、长势弱。

2.2 不同激素配比对组培苗生根的影响 从增殖培养基中切取长为1cm左右的茎段,转接到生根培养基(见表2)1/2MS+IBA0.4的生根最佳,生根率达86.7%。IBA浓度增加,瓶苗的生根率基本保持不变。中。结果表明:

2.3 不同基质配方对移栽苗成活率的影响 经过30d的移栽管理,进行植株性状考查(见表3)。结果表明:草炭=珍珠岩=蛭石的比例为0=0=1的移栽成活率最高,达94.5%;其次是草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0,成活率为85.9%;从移栽苗后期长势来分析,以草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0的性状表现最好,新叶长出早,叶面积大,叶色浓绿。可能是因为珍珠岩、蛭石本身不带养分,不能提供植株苗期生长所需的营养,而草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0中草炭本身富含有机质,保证了移栽苗的养分快速供应。

2.4 无根苗与有根苗的移栽性状表现 在相同的处理条件下,以草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0的栽培基质,蕨类组培有根苗和无根苗的移栽成活率均达到80%以上,但有根苗移栽后缓苗快,缓苗期比无根苗缩短10~15d左右。该试验结果为蕨类植物的组培快繁生产绕开瓶苗生根过程提供了依据。

表4 无根苗与有根苗移栽性状表现

组培苗性状有根苗无根苗

移栽数(株)128128

成活数(株)111106

成活率(%)86.782.8

露白根时间(d)1628

心叶抽出时间(d)2539

1=0=01=1=01=2=10=1=10=0=1

表3 不同栽培基质配方对移栽苗成活率的影响

草炭=珍珠岩=蛭石

移栽数(株)成活数(株)成活率(%)

[**************]

[1**********]21

52.385.978.974.294.5

#"小结与讨论

从研究结果分析,蕨类植物组培快繁中,控制好细胞分裂素BA和生长素NAA的用量,既可获得较高的增殖率,且丛生苗长势健壮;生根基本培养基为1/2MS,添加一定浓度的生长素IBA,可促进生根。在瓶苗移栽阶段,不同基质配方影响移栽苗成活率及生长势。在规模化生产中,可避开生根培养环节,将组培苗直接移出室外培养,既缩短了培养时间,又降低成本,而移栽苗的质量并不受太大的影响。参考文献:

[1]曹孜义,刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].甘肃:甘肃科技出版社,1996.204~206.[2]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社,1999.103~105.[3]褚剑峰.红叶石楠的组织培养及大规模快繁技术[J].浙江农业科学,2005(,2):110~112.

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

(上接第124页)

[3]鲁如坤.土壤农业化学分析方法[M].北京:中国农业科技出版社,2000.474~489.[4]南京农业大学.土壤农化分析[M].北京:农业出版社,1986.33~89.[5]张镜清.芦荟[J].生物学通报,1999,34(11):44~45.

[6]顾文祥.芦荟栽培与加工利用[M].上海:上海科学普及出版社,1999.127~131.[7]黄昌勇.土壤学[M].北京:中国农业出版社,2000.163~165.

[8]陈震,丁万隆.百种药用植物栽培答疑[M].北京:中国农业出版社,2002.82.[9]沈其荣.土壤肥料学通论[M].北京:中国农业出版社,2001.271~273.

[10]汤晓地,王鑫,张乘武,等.芦荟的管理与应用前景[J].上海蔬菜,2003,5:48~50.[11]潘瑞炽.植物生理学[M].北京:高等教育出版社,2001.8~9.

江西农业学报 2006,18(5):125~126ActaAgriculturaeJiangxi

观赏蕨类植物组培快繁及其移栽技术

王宏航,李朝森,刘慧琴

(浙江省衢州市农业科学研究所,浙江衢州324000)

摘 要:以蕨类新萌发的侧芽为外植体,MS为基本培养基,添加不同浓度比例的细胞分裂素和生长素,进行诱导分化、增殖、生根试验。结果表明:MS+BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L增殖效果好;以1/2MS+IBA0.4mg/L培养基的生根效果最好。在炼苗移栽试验中,以穴盘为容器、蛭石为基质,移栽成活率高达94.5%;以草炭I珍珠岩=1I1为基质,移栽后期植株长势好。

关键词:蕨类;组织培养;快繁;移栽;外植体;培养基;激素

中图分类号:S682.35 文献标识码:A 文章编号:1001-8581(2006)05-0125-02

蕨类植物以它奇特的株形、飘逸的叶姿快速进入花卉市场,赢得消费者的喜爱。近年来,蕨类植物在我国发展迅速,生产面积和销售量逐年增加。蕨类植物常见的繁殖方法有孢子繁殖、分株繁殖和组织培养等几种方法,其中规模化生产通常采用组织培养。2003年衢州市农业科学研究所引进12个蕨类品种,开展组培技术研究及产业化生产。现将研究结果报道如下。

!"材料与方法

1.1 试验材料 植株新萌发的侧芽为外抗体。

1.2 激素及其纯度 6-苄基腺嘌呤(BA)、!-萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA),均为分析纯试剂,由上海伯奥生物科技有限公司提供。生产试验中使用普通琼脂条,以白砂糖代替蔗糖,以饮用水代替蒸馏水。

增殖培养基浓度

(mg/L)BA0.5+NAA0.1BA0.8+NAA0.2BA1.0+NAA0.3BA1.2+NAA0.4BA1.5+NAA0.5

表1 不同激素处理对组培苗增殖的影响

接种瓶数(瓶)55555

30d转接瓶数(瓶)1629354247

繁殖

系数3.25.87.08.49.4

性状表现 长势较好长势较好

长势良好

苗分化多,长势较弱

苗丛过密,微型化

1.3 培养条件 诱导分化培养基:MS+BA 注:每瓶接种蕨类苗数为4株。

2.0mg/L+NAA0.5mg/L+C1.0mg/L(活性炭)(单位下同);增殖培养基:MS+BA0.5~(见表1);生根培1.5+NAA0.1~0.5+C1.0

诱导分化培养基和增殖培养基蔗糖浓度为3.0%,生根培养基蔗糖浓度为2.0%;琼脂7g/L;pH5.8~6.0;培养温度(2512) 、光照强度2000lx,连续光照101/d。

生根培养基浓度

(mg/L)1/2MS+IBA0.21/2MS+IBA0.41/2MS+IBA0.61/2MS+IBA0.81/2MS+IBA1.0

表2 不同生根培养基对组培苗生根的影响

接种数(个)[1**********]0

生根数(条)[1**********]5

生根率(%)50.063.386.780.080.083.3

养基:1/2MS+IBA0~1.0+C1.0(见表2)。1/2MS

1.4 试验材料的处理 侧芽长至2叶1芽时,分株取出,流水下冲洗30min后,去除2张叶片,剪去根系,留上部茎段长约0.5~1.0cm,置超净工作台中,先用75%酒精中浸30S,用无菌水冲洗1次,转入0.1%升汞中消毒8min,用无菌水冲冼3~5次后,用无菌吸水纸吸去材料表面水分,接种到诱导分化培养基中,再依次转入增殖、生根培养基中,观察培养结果。

1.5 移栽基质的处理 蕨类组培苗的移栽采用基质栽培技术,使用国产草炭、珍珠岩和蛭石按不同比例混合,30d后统计移栽成活率(见表3和表4)。移栽前14d草炭用40%甲醛按30mL/m2用量对水100倍喷雾后覆膜熏蒸灭菌。蕨类植物喜酸性土壤,而珍珠岩偏碱性,使用前用5000~7000倍柠檬酸溶液浸洗,进行pH缓冲。

1.6 移栽苗栽培管理 移栽前将苗取出,冲洗掉附着在瓶苗基部的琼脂,用800倍液的多菌灵杀菌剂浸后,移栽到128孔方形穴盘中。移栽7d内覆膜增湿保温,使湿度保持在85%以上,温度保持在20 左右。10d左右通风透光,15d

收稿日期:2006-04-18

作者简介:王宏航,农艺师,从事园艺、生物技术研究。

126

江 西 农 业 学 报 18卷

以后进行营养成份的补充,每7d喷施1次1/2MS全营养液或2500倍的海草肥,水分管理上要掌握干湿交替,促进根系生长。蕨类植物耐荫性强,后期管理可适当遮荫,以避开强光照。

!"结果与分析

2.1 不同激素配比对增殖率的影响 在诱导分化培养基中35d左右的无菌苗四周萌发不定芽。将苗切下转入增殖培养基(见表1)中。结果显示,不同细胞分裂素和生长素浓度处理中,组培苗以培养基MS+BA1.0+NAA0.3中的30d形成丛生苗,长势良好,繁殖系数可达7.0左右。BA浓度低增殖率下降,BA浓度过高,组培苗分侧芽萌发迅速,化多、长势弱。

2.2 不同激素配比对组培苗生根的影响 从增殖培养基中切取长为1cm左右的茎段,转接到生根培养基(见表2)1/2MS+IBA0.4的生根最佳,生根率达86.7%。IBA浓度增加,瓶苗的生根率基本保持不变。中。结果表明:

2.3 不同基质配方对移栽苗成活率的影响 经过30d的移栽管理,进行植株性状考查(见表3)。结果表明:草炭=珍珠岩=蛭石的比例为0=0=1的移栽成活率最高,达94.5%;其次是草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0,成活率为85.9%;从移栽苗后期长势来分析,以草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0的性状表现最好,新叶长出早,叶面积大,叶色浓绿。可能是因为珍珠岩、蛭石本身不带养分,不能提供植株苗期生长所需的营养,而草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0中草炭本身富含有机质,保证了移栽苗的养分快速供应。

2.4 无根苗与有根苗的移栽性状表现 在相同的处理条件下,以草炭=珍珠岩=蛭石为1=1=0的栽培基质,蕨类组培有根苗和无根苗的移栽成活率均达到80%以上,但有根苗移栽后缓苗快,缓苗期比无根苗缩短10~15d左右。该试验结果为蕨类植物的组培快繁生产绕开瓶苗生根过程提供了依据。

表4 无根苗与有根苗移栽性状表现

组培苗性状有根苗无根苗

移栽数(株)128128

成活数(株)111106

成活率(%)86.782.8

露白根时间(d)1628

心叶抽出时间(d)2539

1=0=01=1=01=2=10=1=10=0=1

表3 不同栽培基质配方对移栽苗成活率的影响

草炭=珍珠岩=蛭石

移栽数(株)成活数(株)成活率(%)

[**************]

[1**********]21

52.385.978.974.294.5

#"小结与讨论

从研究结果分析,蕨类植物组培快繁中,控制好细胞分裂素BA和生长素NAA的用量,既可获得较高的增殖率,且丛生苗长势健壮;生根基本培养基为1/2MS,添加一定浓度的生长素IBA,可促进生根。在瓶苗移栽阶段,不同基质配方影响移栽苗成活率及生长势。在规模化生产中,可避开生根培养环节,将组培苗直接移出室外培养,既缩短了培养时间,又降低成本,而移栽苗的质量并不受太大的影响。参考文献:

[1]曹孜义,刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].甘肃:甘肃科技出版社,1996.204~206.[2]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社,1999.103~105.[3]褚剑峰.红叶石楠的组织培养及大规模快繁技术[J].浙江农业科学,2005(,2):110~112.

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

(上接第124页)

[3]鲁如坤.土壤农业化学分析方法[M].北京:中国农业科技出版社,2000.474~489.[4]南京农业大学.土壤农化分析[M].北京:农业出版社,1986.33~89.[5]张镜清.芦荟[J].生物学通报,1999,34(11):44~45.

[6]顾文祥.芦荟栽培与加工利用[M].上海:上海科学普及出版社,1999.127~131.[7]黄昌勇.土壤学[M].北京:中国农业出版社,2000.163~165.

[8]陈震,丁万隆.百种药用植物栽培答疑[M].北京:中国农业出版社,2002.82.[9]沈其荣.土壤肥料学通论[M].北京:中国农业出版社,2001.271~273.

[10]汤晓地,王鑫,张乘武,等.芦荟的管理与应用前景[J].上海蔬菜,2003,5:48~50.[11]潘瑞炽.植物生理学[M].北京:高等教育出版社,2001.8~9.


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