尿液隐血4种分析方法的比较
永德县人民医院检验科 李永斌
摘要：尿液隐血检测有很多检测方法，现比较4种检测方法，综合分析其灵敏度、特
异性等因素。在实际临床工作应灵活应用两种和（或）两种以上检测方法以提高尿液隐血检测的准确性。
关键词：隐血 单克隆抗体法 加热煮沸法 尿液
随着医学检验的不断发展，至今尿液隐血检测已成为肾病诊疗的常规手段。至今尿液分析仪的应用大大地提高了尿液隐血检测的准确性。但在实际检验工作中我们有时可遇到“假阴性”和“假阳性”。为尽量避免上述情况的发生，本文联合应用免疫法、干化学分析仪法、加热煮沸法和显微镜镜检法分析尿液标本隐血，比较4种方法的优缺点，结果如下：
1 材料与方法
1.1 标本来源 2010年2月至9月住院的肾病患者新鲜中段晨尿62例 1.2 仪器与试剂 尿化学检测仪为桂林市医疗电子仪器厂生产的Uritest-200A尿液检测仪，干化学试剂为优利特A系列尿试纸条使用尿液干化学分析试纸条；隐血胶体金检测试纸条；显微镜为日本欧林巴斯 型显微镜。
1.3 尿液标本的收集 用一次性塑料杯随机收集上述人员新鲜尿液充分混匀后用洁净试管取尿液10 ml。每份标本充分混匀后分成3管：第一管用尿十项检测分析仪分析，第二管煮沸尿液后进行检测，第三管用于显微镜尿沉渣检查。取一份新鲜全血，用正常尿液稀释成不同浓度的红细胞混悬液同上操作。
1.4 方法 （1）尿液干化学分析仪测定法，仪器操作严格按使用说明书进行，每天开机时均用校正带及纯水对仪器进行校正，用室内质量控制物随尿标本同时测定进行监控。标本收集后2 h内完成检测。尿液标本、试带在检测前恢复到室温（25 ℃）。将试带浸入尿液中2 s后取出，在滤纸上吸去多余的尿液，置于Uritest-200A自动尿十项分析仪分析。（2）免疫法，严格按照胶体金检测试条说明书操作。（3）加热煮沸法，将尿液煮沸2min,再用试带进行检测。（4）显微镜
[1]
尿沉渣检测，标本以相对离心力400 g(回转半径15 cm的水平离心机1 500 rpm)
离心5 min，离心后手持离心管以45°～90°倾去上清液，离心管口用滤纸拭干,留取0.2 ml尿沉渣标本，使之浓缩50倍，充分摇匀后放入尿沉渣仪的检测平台镜检，在高倍镜（10×40）观察10个视野，记录结果。
［2］
1.5数据处理 Uritest-200A尿液分析仪分析结果以RBC≥ 15/ul为out off值，尿沉渣镜检RBC≥12/μl为阳性。方法间比较用X2检验。
2 结果
2.1 4种方法检测尿液隐血灵敏度分析 结果见表1。结果显示，免疫法灵敏度最高，加热煮沸后干化学隐血阳性程度降低。对62例尿液标本隐血结果分析，各检测方法余显微镜检法经配对X2检验，结果见表2。免疫法、加热煮沸法与显微镜检法间差异无显著性（P0.05）；干化学法、尿十项分析仪检测法、加热煮沸后干化学法、干化学法检测尿液隐血阴性预测值分别为99.4%、98.7%、97.8%、98.1%；阳性预测值分别为94.0%、68.8%、90.3%、71.0%。
表1 3种方法检测不同RBC浓度的尿液隐血结果
3 讨论
干化学试纸法自动尿液分析仪是根据红细胞血红蛋白接触活性法原理，通过血红蛋白的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物，使邻联甲苯胺氧化呈色的原理检测隐血。由于尿液成分复杂，常存在有类似过氧化物酶活性的物质，如热不稳定过氧化物酶（易热酶）、肌红蛋白、某些细菌代谢产物等造成隐血结果假阳性，其中影响最多的是易热酶的存在。由于易热酶不耐热，加热煮沸即可排除。
[3]
62例尿液标本忠干化学试纸法阳性而显微镜检法阴性的 例尿液标本经加热煮沸后验证有 为阴性，经免疫法验证有 阴性。加热使蛋白质变性，但应注意不能长时间煮沸，否则将使尿液PH及其他成分发生变化，亚铁血红素（铁离子）的过氧化物酶样活性下降而降低隐血阳性程度。
[4]
表2 62例尿液3种方法与显微镜法检测隐血结果
注：与显微镜检法比较，﹡P＞0.05, ﹡﹡P＜0.05。
单克隆抗体免疫胶体金法利用抗人球蛋白单克隆抗体进行隐血检测。其检测灵敏度高（0.2ug/ml,2个RBC/HP）且能检出溶解的红细胞，大大提高乐隐血检测的阳性率。
综上所述，尿液干化学分析不仅提高红细胞的检测敏感度，尤其对某些疾病或某些因素使红细胞破坏的尿液标本，在显微镜下无法观察到的情况下，尿液分析可提供一定的参考价值。免疫法和加热煮沸法同时具有较高的阴性预测值和阳性预测值，可作为尿液隐血检测较为有效的验证方法。我们在实际工作中要能够结合病人自身情况，合理解析实验结果，决不能只看尿液分析仪的检测结果，而忽视镜检，绝不能以干化学法代替镜检法。尿液干化学分析隐血、免疫法检测隐血、加热煮沸法联合显微镜检法的灵活运用可以提高尿液隐血检测的准确性。
参考文献：
1叶应抚 王毓三 申子瑜主编，《全国临床检验操作规程》第三版，中华人○
民共和国卫生部医政司，2006年283页
2罗春丽主编○《临床检验基础》，第2版，北京：人民卫生出版社,2003年171
页
3祁琳等，尿中念珠菌对尿液分析仪分析隐血项的影响，苏州大学学报（医○
学版），2003年23期291页
4王桂兰等，○对加热煮沸法排除干化学法尿液隐血假阳性的初探，现代检验
医学杂志，2002，17期8页
尿液隐血4种分析方法的比较
永德县人民医院检验科 李永斌
摘要：尿液隐血检测有很多检测方法，现比较4种检测方法，综合分析其灵敏度、特
异性等因素。在实际临床工作应灵活应用两种和（或）两种以上检测方法以提高尿液隐血检测的准确性。
关键词：隐血 单克隆抗体法 加热煮沸法 尿液
随着医学检验的不断发展，至今尿液隐血检测已成为肾病诊疗的常规手段。至今尿液分析仪的应用大大地提高了尿液隐血检测的准确性。但在实际检验工作中我们有时可遇到“假阴性”和“假阳性”。为尽量避免上述情况的发生，本文联合应用免疫法、干化学分析仪法、加热煮沸法和显微镜镜检法分析尿液标本隐血，比较4种方法的优缺点，结果如下：
1 材料与方法
1.1 标本来源 2010年2月至9月住院的肾病患者新鲜中段晨尿62例 1.2 仪器与试剂 尿化学检测仪为桂林市医疗电子仪器厂生产的Uritest-200A尿液检测仪，干化学试剂为优利特A系列尿试纸条使用尿液干化学分析试纸条；隐血胶体金检测试纸条；显微镜为日本欧林巴斯 型显微镜。
1.3 尿液标本的收集 用一次性塑料杯随机收集上述人员新鲜尿液充分混匀后用洁净试管取尿液10 ml。每份标本充分混匀后分成3管：第一管用尿十项检测分析仪分析，第二管煮沸尿液后进行检测，第三管用于显微镜尿沉渣检查。取一份新鲜全血，用正常尿液稀释成不同浓度的红细胞混悬液同上操作。
1.4 方法 （1）尿液干化学分析仪测定法，仪器操作严格按使用说明书进行，每天开机时均用校正带及纯水对仪器进行校正，用室内质量控制物随尿标本同时测定进行监控。标本收集后2 h内完成检测。尿液标本、试带在检测前恢复到室温（25 ℃）。将试带浸入尿液中2 s后取出，在滤纸上吸去多余的尿液，置于Uritest-200A自动尿十项分析仪分析。（2）免疫法，严格按照胶体金检测试条说明书操作。（3）加热煮沸法，将尿液煮沸2min,再用试带进行检测。（4）显微镜
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尿沉渣检测，标本以相对离心力400 g(回转半径15 cm的水平离心机1 500 rpm)
离心5 min，离心后手持离心管以45°～90°倾去上清液，离心管口用滤纸拭干,留取0.2 ml尿沉渣标本，使之浓缩50倍，充分摇匀后放入尿沉渣仪的检测平台镜检，在高倍镜（10×40）观察10个视野，记录结果。
［2］
1.5数据处理 Uritest-200A尿液分析仪分析结果以RBC≥ 15/ul为out off值，尿沉渣镜检RBC≥12/μl为阳性。方法间比较用X2检验。
2 结果
2.1 4种方法检测尿液隐血灵敏度分析 结果见表1。结果显示，免疫法灵敏度最高，加热煮沸后干化学隐血阳性程度降低。对62例尿液标本隐血结果分析，各检测方法余显微镜检法经配对X2检验，结果见表2。免疫法、加热煮沸法与显微镜检法间差异无显著性（P0.05）；干化学法、尿十项分析仪检测法、加热煮沸后干化学法、干化学法检测尿液隐血阴性预测值分别为99.4%、98.7%、97.8%、98.1%；阳性预测值分别为94.0%、68.8%、90.3%、71.0%。
表1 3种方法检测不同RBC浓度的尿液隐血结果
3 讨论
干化学试纸法自动尿液分析仪是根据红细胞血红蛋白接触活性法原理，通过血红蛋白的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物，使邻联甲苯胺氧化呈色的原理检测隐血。由于尿液成分复杂，常存在有类似过氧化物酶活性的物质，如热不稳定过氧化物酶（易热酶）、肌红蛋白、某些细菌代谢产物等造成隐血结果假阳性，其中影响最多的是易热酶的存在。由于易热酶不耐热，加热煮沸即可排除。
[3]
62例尿液标本忠干化学试纸法阳性而显微镜检法阴性的 例尿液标本经加热煮沸后验证有 为阴性，经免疫法验证有 阴性。加热使蛋白质变性，但应注意不能长时间煮沸，否则将使尿液PH及其他成分发生变化，亚铁血红素（铁离子）的过氧化物酶样活性下降而降低隐血阳性程度。
[4]
表2 62例尿液3种方法与显微镜法检测隐血结果
注：与显微镜检法比较，﹡P＞0.05, ﹡﹡P＜0.05。
单克隆抗体免疫胶体金法利用抗人球蛋白单克隆抗体进行隐血检测。其检测灵敏度高（0.2ug/ml,2个RBC/HP）且能检出溶解的红细胞，大大提高乐隐血检测的阳性率。
综上所述，尿液干化学分析不仅提高红细胞的检测敏感度，尤其对某些疾病或某些因素使红细胞破坏的尿液标本，在显微镜下无法观察到的情况下，尿液分析可提供一定的参考价值。免疫法和加热煮沸法同时具有较高的阴性预测值和阳性预测值，可作为尿液隐血检测较为有效的验证方法。我们在实际工作中要能够结合病人自身情况，合理解析实验结果，决不能只看尿液分析仪的检测结果，而忽视镜检，绝不能以干化学法代替镜检法。尿液干化学分析隐血、免疫法检测隐血、加热煮沸法联合显微镜检法的灵活运用可以提高尿液隐血检测的准确性。
参考文献：
1叶应抚 王毓三 申子瑜主编，《全国临床检验操作规程》第三版，中华人○
民共和国卫生部医政司，2006年283页
2罗春丽主编○《临床检验基础》，第2版，北京：人民卫生出版社,2003年171
页
3祁琳等，尿中念珠菌对尿液分析仪分析隐血项的影响，苏州大学学报（医○
学版），2003年23期291页
4王桂兰等，○对加热煮沸法排除干化学法尿液隐血假阳性的初探，现代检验
医学杂志，2002，17期8页