维普资讯 http://www.cqvip.com９６ ８ Ｍｅ ｉａ ｏ ｒ ａ ，ｕ ． ０ ８， ｏ． ０， ． ｄｃ ｌ ｕｎ ｌＪ １２ ０ Ｖ １３ Ｎｏ ７ Ｊ给 作为一种治疗手段 ， 明显 提高 老年 冠心 病 患者整 体健 康水 对老年冠心病患 者积极 进行 常规 药物治 疗 的基础 上 ， 予行 可平及生活质量 。 之有效 的心理干预 ， 无论 是对心理健 康状 况的提高 ， 是对生 还 老 年冠 心 病 患 者 普 遍 存 在 焦 虑 、 郁 、 怖 等 情 绪 问 活满意度 的改善都具有重要意义 。 抑 恐 题 ］究其原 因可能是 ： １ 疾病 本身 给老年 人带 来各 种躯 体 ， （） 上不适感觉 ， 如心绞 痛 、 心悸 、 闷 等弓 起老 年人 的焦 虑与 恐 胸 Ｉ 参 考 文 献 怖 。（ ） ２ 由于长 期患病 ， 致经济 负担 增加 ， 活 自理 能 力下 ［ ］ 叶志荣 ， 菊贤． 心病 、 血压与心理 障碍 ［ ］ 中国行为医学 导 生 １ 杨 冠 高 Ｊ． 降以及社交 困难 等造成 对 生活失 去 信心 ， 而产 生焦 虑或 抑 从 科学 ，９７，（ ） ３ ３— １ ． １９ ６ ４ ：１ ３ ５ 郁情绪 。（ ） ３ 对疾病 的过 度担 心和 对死 亡 的 害怕 而 产生 焦虑 ［ ］ 张鸿修 ， ２ 黄体钢． 实用冠心病 学 ［ ．第 ４ 天津： Ｍ］ 版． 天津科技 翻 与恐怖 。而焦虑 、 郁 和恐惧这 种 强烈 而持 久 的负性 情 绪反 抑应可造成躯体生理机能失调 ， 甚至神经 内分泌机能 紊乱 ， Ｉ 弓 发 一译 出 版 公 司 ，０ ５ ４０— １． ２ ０ ：１ ４ ２ ［ ］ Ｅ ｔ ｃ Ｃｃ Ａ Ｒ ｄｃ ． ｉ ｏｄ ｒ ｓｒ， ｌ ｈｌ ｎ ｒ ３ ｓｕｈＲ，ｏａ ， ｏ ｉｏ Ｌ Ｈｓ ｂ ｏ ｅ ｕ ａ ｏｏ ａｄ ａ ｒ ｉＪ ｈｌ ｐｓ ｅ ｃ ｃ－ ｄ ｖ ｅｌ ｓ［ ］ Ｊ ｙｅ ｅｓ２０ ， （ ）２ ６ ２９ ｉ ａ ｕ ｒｉ Ｊ ． ｐｒ ｎ ， ５ ２ １ ： — ２ ． ｏ ｓ ａ ｒｋ Ｈ ｔ ０ ３ ２ 系列生理 、 病理 改变 ， 感神经 活 动增 强 Ｊ Ｉ Ｌ 酚胺 交 。￣ Ｊ 茶 Ｉ４ 季晓莉． Ｅ 市 １ ８ 例老 年人生 活满意度相关 因素分 ｊ京 ０ ３ 的过量分泌 、 脂类代谢紊乱 、 多种 促凝物 质 和有 强烈血 管收缩 ［ ］ 陶 国枢 ，作用 Ｔ Ａ Ｘ ２的释 放、 率加 快 、 压上 升等 ， 结果 是心 肌供 心 血 其 血 、 氧减少 ， 供 而心肌 氧耗 增 多 ， 如此 负性 情绪 就促 发或 加重 了心绞痛 、 心肌梗死 、 心律失 常及心 衰。本文 两组患者 在治疗 前Ｓ Ｌ９ 各 因子分与 中 国常模 比较 ， Ｃ－ ０ 差异 均有统 计学 意义 （ Ｐ均 ＜００ １ ， ． ０ ） 说明老年冠心病 患者存 在 比较 严重 的心理 障 碍 。观察组经治疗 和心理 干预后 ， Ｃ 一 Ｓ Ｌ９ ０各 因子 分与 治疗前 比较 ， 差异均有统计学意义（ Ｐ均 ＜０ ０ ） 且与对 照组治疗后 ．１ ； 比较 ，Ｃ 一 Ｓ Ｌ９ ０各因子分 的差异也有 统计学 意义 （ 尸均 ＜ ． １ ， ０ ０ ） 析 ［］中国心理卫 生杂志 ， ９ ， （ ）３８ ３０ Ｊ． １ ８ １ ６ ： — ６． ９ ２ ３ ［］ 金 ５ 华， 吴文源 ， 张明园． 中国正常人 Ｓ Ｌ９ Ｃ －０评定结果 的初 步分 析 ［ ］ 中国神经精 神疾病 杂志 ，９ ６ １ （ ）２ ０－ ６ ． Ｊ． １８ ， ５ ： ２ ６ ２３ ［ ］ Ｄ ｎ ｅｙＳ ｕｌ — －ｆ ａ ｅｓ ｅｔｎ ａｖｎｅ ａｃｒ Ｊ ． ｕｒ ６ ｏｎｌ ．Ｑ ａｔ ｏ ｌｅ ｓ ｓ ｎ ｉ ｄａｃｄｃｎｅ［ ］ Ｃ ｒ ｌ ｉ ｆｉ ｓ ｍ ｙ Ｏｎｏ Ｒ ｐ２ ０ ， （ ）：３ ｃｌ ｅ ，０ ｏ ２ ４ ３ ８—３２ ４．［ ］ 李冬梅． ７ 心理干预对 改善老年 冠心病焦 虑抑郁状 况 的临床研究 ［ ］ 现代医药卫生 ， ０ ，２ ９ ： ２ ３一 ４ ｊ． ２ ６２ （） １ ８ ｌ ． ０ ８ ２ ［ ］ 安思训， 晓华 ， ８ 杨 张为众． 理干预对 中老年妇 女冠心 病治疗 的 心 影响及 意义［ ］ 中国妇幼保健 ， ０ ， （０ ： ６ ｌ ２ ７ ． Ｊ． ２ ５２ ２ ）２ ７ 一 ２ ０ ０ ６ ［ ］ 黄开群． ９ 健康教 育在冠 心病二 级预防 中应 用的探讨 ［ ］ 广西 医 Ｊ．学 ，０ ３ ２ （ ２ ： ７ ２ ０ ，５ １ ） ２５ ６—２５ ７ ７ 表 明心理 干预能有效 稳定 病人 情绪 ， 消除 焦虑 、 郁及 恐惧 ， 抑 改善躯 体症状 ， 使患者的心理 障碍得到明显改善 。 随着时 间的延长 ， 老年 冠心 病患 者对 生 活 的满意 度逐 渐 降低 ， 心理 障碍越来越 重 ； 心理 障碍 的加 重 ， 而 反之 影 响患 者 对生活的满意程度 ， 并直 接影 响疾病 的康 复和预后 。因此 ， 在 （ 收稿 １ ： ８— １—１ 修 回 １期 ：０ ８— ２—１ ） ３期 加Ｏ ０ ｌ ３ ２０ ０ ７ Ａ Ｏ血 型 遗 传 异 常 的 亲 子 鉴 定 案 例 分 析 Ｂ唐秋 民 申卫 东 何 保仁 李恒聪 周 燕 廖 燕 莫秋 红 黄 丹翊 （ 广西南宁 中心血站 、 广西南宁输血 医学研究所 ， 南宁市 ５ ００ ） ３ ０ ３ 采 用 Ｐ Ｒ复合 扩增技 Ｃ【 摘要 】 目的 探 讨应用短 串联重复序 列（ Ｔ ） 因位 点检测技术 开展 亲子鉴 定的可行性 。方法 ＳＲ 基术 、 细管电泳及五 色荧光 自动化检 测技 术对 ２例 亲子鉴定案例 ６份血液样本 ， 毛 进行 了 ｌ ５个 Ｓ Ｒ基 因位点和 １个 Ａ ｅｏｅｉ Ｔ ｍ ｌ ｎｎ性 ｇ 别基 因位点捡测分析 。认定亲权关 系的均 以亲子关 系指数 （ Ｃ ） ９ ．３ 为准， Ｒ Ｐ Ｉ ９７％ ＞ 排除亲权 关系的则 以＞３个 以上基 因位 点不符 １ 为依据 。结果 ｌ 例排 除亲子关 系， ｌ 不排 除亲子关 系。结 论 另 例 Ｓ Ｒ位 点的基 因扫描 方 法简便、 Ｔ 省时 、 快速 、 灵敏度 高 ， 结果 准确可靠 。 【 关键词 １ 法 医物证 学 ； 亲子鉴定 ； 串联 重复序列基 因位点 ；Ｃ 短 Ｐ Ｒ复合扩增技术 ；Ｂ Ａ Ｏ血 型遗传异 常 【 中图分类号 】 Ｒ４６ １ ．１ ４ 【 文献标识 码】 Ａ 【 文章编号 】 ０５－ ０ （０８０－ ８－ ２３ ３４ ２０ ）７０ ６ ３ ４ ９ ０自人类 发 现血 型物 质并 证 明 了它 是 个 体的 一种 遗 传标 记， 即用于亲子鉴定 。Ａ Ｏ系统是人类 发现最 早的血 型系统 ， Ｂ １ 简要 案情 案例 １ 小孩在某红 十字 会医院出生 ， ： 检验其血型为 Ａ型 ， 遵循孟 德尔遗传学定律 ， 常表现为 简单 的显性或 隐性遗传ｎ 。 ］ 它 的血 清学分 型简便 、 稳定 、 可靠 ， 一般 Ａ Ｈ抗原 检测结 果都 Ｂ父母血型均为 ０型 ， 被告 知他们之 问不会生 出 Ａ型的小孩 ， 逐 案例 ２ 小孩在某 市人民医院出生 ， ： 检验其血型为 Ｂ型 ， 父 符合孟德尔遗传规律 ， 在一个家庭中， 孩子的血型基因必定来 怀疑 医院换错 婴儿 ， 而要求进行亲子鉴定。 自父母 ， 型可 以作 为 一种 遗 传标 记 用 于 亲子 鉴 定。 因此 ， 血 Ａ Ｏ血型系统是亲子鉴定 中使用得最早 、 多 、 Ｂ 最 最经 典的多态 母血 型均 为 ０型 ， 可能出生 血型为 Ｂ型的小孩 ， 不 逐怀 疑医院 换错婴儿 ， 而要求进行亲子鉴定 。 性遗 传标记 。本文 报告 ２例 Ａ Ｏ血 清学 分 型结果 与孟 德 Ｂ 尔遗传规律矛盾 的亲 子鉴 定案 例 ， 通过 Ｄ Ａ多态 性 分析 ， Ｎ 结 果 １ 排 除 亲 权 关 系 ， １ 不排 除 亲 权 关 系 。 例 另 例 维普资讯 http://www.cqvip.com广 番 医学 ２ ０ ０８年 ７月第 ３ 第 ７期 Ｏ卷９７ ８ ２ 材料 与 方法 ２ １ 材料 ．凝剂 。 ２２ ． 方 法 表 ２ 案 例 ２的 Ｓ Ｒ 检 测 结 果 Ｔ分别抽取 当事人静脉血 ２～ ｌ加 ５ Ｅ Ｔ ３ｍ ， ％ Ｄ Ａ抗 ２ ２ １ Ｄ Ａ 提 取 ： Ｃ ｄ ｘ１０法 提 取 Ｄ Ａ（ ｉ— ａ 司 ） ． ． Ｎ 用 ｈ ｅ一０ Ｎ ＢｏＲ ｄ公 ，详 细操作步骤见文献 ［ ］ ３。２ ２ ２ 多 重 Ｐ Ｒ扩 增 ： Ａ Ｉ 司的 Ｉｅｔ ｌｒ ．． Ｃ 用 Ｂ公 ｄｎｉ ｅ 法医鉴 定试 ｉ ｆ剂盒进行 Ｐ Ｒ扩增 Ｓ Ｒ基因位点 。反应总体系为 ２ ， 中 Ｃ Ｔ ５ 其Ｐ Ｒ Ｒ ａｔｎ Ｍｉ ９ ５ ， ｒ ｅ ， Ｅ Ｔ ｑＧ ｌ（ ／ ） Ｃ ｅｃ ｏ ｘ ． Ｐｉ ｒ ｉ ｍ ５ Ｐ ａ ｏ ５ Ｕ １ ｄ ０ ５ 。加 适量的 Ｄ Ａ模板 ， ． Ｎ 用去离子 水补足 ２ 。Ｐ Ｒ反 ５ Ｃ应在 Ｇ ｎＡ ｐ⑤ ９０ ｅｅ ｍ ７０扩增 仪上进 行 ， 扩增 条件为 ：５ ９℃预 变 性 １ ｎ 然后 ９ 变 性 １ｍ ｎ ５ 复 性 １ｍｎ ７ ℃ 延 伸 １ｍｉ， ４ ｉ，９ ｉ，２１ｍｉ， ２ ｎ 共 ８个循环 ， 最后 ６ ℃延伸 ６ ｉ。 Ｏ ０ｍ ｎ ２２ ３ 扩增 产物 的检测 ： Ｈ — ｉ ．． 取 ｉ 甲酰胺 ８ ７ ， Ｓ５ ０ＬＺ Ｄ ． Ｇ －０ Ｉ 分子 量标记 ０ ３ 和 １ ｌ Ｃ ． Ｒ产物或 Ｌｄ ｅ 混合在Ｇ ｎＡ ｐ Ｐ ａｄ ｒ ｅｅ ｍ ⑩ ９ ０ 增 仪 上 ９ ℃变 性 ３ ｒｎ制 备 电 泳样 品 ， ７ ０扩 ５ ｉ ａ 通过 Ａ Ｉ Ｂ ３ ３ Ｎ １０Ｄ Ａ遗传 分析 仪进 行 电泳 分 析 ， ３３ ａ ｏ ｅｔｎ 用 １０ ｄ ｔ Ｃ ｌ ｃｏ ａ ｌ ｉ３ ０收集电泳信息 ， ． 再用 Ｇ ｎ Ｍａｐ ｒ ３２软 件对 片段大 小 ｅ ｅ ｐ ｅｌ ｖ ． Ｄ注 ：Ｐ ＝２８ ６９ ７ ７ Ｃ Ｉ １ ２ ．５ Ｒ Ｐ＝ ． ９ ９ Ｃ ０ ９９９９ ６亲子鉴定又称 亲权鉴定 ， 是法 医物 证学鉴 定 的重 要 内容 之一 ， 是指应用医学 、 物学 和遗传 学方 法 ， 人类 遗传 标记 生 对 进行检测分析来判 断父母 与子女 是否 存在 亲 生关 系的鉴 定 。 人类血型被发现后 ， 明了它是 个体 的一 种遗 传标记 ， 证 并很快 进行 分析 ， 最后得 出 Ｓ 分型结果。 １ ３ 结 果 与分析 以上 ２例亲子鉴 定 ， 父亲 与孩子 的遗传 标记 均不 符合 血 型遗传规律 。对 ２例案件采用 Ｓ Ｒ基 因扫 描技术 ， Ｔ 进行 了 １ ５ 个 Ｓ Ｒ基 因位点和 １ Ａ ｅ ｇｎｎ性别基 因位 点检 测分 析 ， Ｔ 个 ｍ ｌ ｅｉ ｏ 被用于亲子鉴定 ， 由于血 型的多态性 程度有 限 ， 多人可 以 但 许 表现 同一血型 ， 单凭血 型检查结果 ， 一般 只 能在 某些 情况下 作 出排除的结论 ， 以作 出肯 定的 结论 。近年 来 由于 Ｄ Ａ技术 难 Ｎ 的飞速发展 ， Ｆ Ｐ 限制性 片段 长 度多 态性 ） Ｓ Ｒ（ 串联 ＲＬ （ 和 Ｔ 短 重复序列 ） 等新的基 因分型 方法在 法 医学个 体 识别 和亲子鉴 结果 见表 １２ 、 。案例 １中分别在 Ｄ Ｓ １ ５ ８ ８等 ４个基 因位点 中 ， 父亲与孩子的基 因型不符 合遗 传规律 ， 小孩 与母 亲 的基 因型 符合遗 传规律 。案例 ２父亲 与孩子 及母亲 与小孩 的各种标 记 均符合遗 传规律 ， 计算 Ｒ Ｐ分别 达 到 ９ ． ９ 经 Ｃ ９ ９ ％ Ｊ 。因此 ， 从检 测结 果可以看 出， 例 １中的孩 子 与父 亲无 生 物学 父子 案 关系， 即不是其父亲 亲生 ， 案例 ２中 的孩 子 为父 亲亲 生 ， 而 父 亲的血型经检测 ， 存在基 因突变 （ 果另文发表 ） 在 ２例案例 结 ， 中医院均没有换错 婴儿 。 表 １ 案例 １的 Ｓ Ｒ 分 型 结 果 Ｔ定的应用越来越广 泛 ， 目前 国 内外权 威机构 进行 亲 子鉴定 是 最常用的方法之一 Ｊ 。短 串联重 复序 列 （ｈ ｒｔｎ ｅ ｅｅｔ， ｓｏｔａｄｍ ｒｐａ ｓＳ Ｒ） Ｔ 是一类广泛存在 于真核 生物基 因组 中的 Ｄ Ａ 串联重 复 Ｎ 序列 。它 由２～ ｐ的核心序列构成 ， ６ｂ 重复次数通常在 １ ３ ５～ Ｏ 次 ，Ｎ Ｄ Ａ片段长度为 １０～３ ０ｂ 由于 Ｓ Ｒ很容易通过 Ｐ Ｒ ０ ５ ｐ， Ｔ Ｃ 扩增 、 电泳分型 ， 以是 目前 常用 的遗 传标 记 ， 所 特别 是应 用 于法医学领域有诸 多优点 ：（ ） Ｔ １ Ｓ Ｒ在人 类基 因组 中广 泛 分 布， 目的片段 小 ， 合 度 高。 （ ） Ｔ 杂 ２ Ｓ Ｒ扩 增 片 段 短 ， 般 在 一 １０～ ５ ｐ ０ ３ ０ｂ 之间 ， 扩增率 高 ， 敏 度 比传统 的 Ｄ Ａ指纹 高得 灵 Ｎ 多 。（ ） ３ 各个 Ｓ Ｒ位点扩增 片段长 度近似 ， 增条 件相似 ， Ｔ 扩 可进行复合扩增。 （ ） Ｔ ４ Ｓ Ｒ核 心序 列重 复单 位少 （ ６ ｂ ） ２～ ｐ ，Ａ —Ｌ ｍｐＦ Ｐ时不会造成小 片段 优先 扩增 的错误 。（ ） 测方法 ５检简单省时 ， 且易实现 自动化 、 准化 』 标 。 因此 ， 在短短的几 年间 ， 由于 Ｓ Ｒ具 有高 信息 量 ， Ｔ 在基 因 组 中分布广泛 ， 以及可 以用 Ｐ Ｒ扩 增 ， Ｃ 电泳分 型等 优点 ， 使其 在生物学各领域 中得 到广 泛应 用 ， 并取 得惊 人 的进 展。在亲 子鉴定 、 个体识别应用 中， 由于 ＳＲ 系统 的使 用 ， 其检 测进 Ｔ 使 入 了一个新 的阶段 ， 检测水平有 了空前 的提高 。同时 ， 也将为 人类基 因组研究 、 基因诊断 、 物考古等领 域 的研究 开辟 一条 生新 途径。 参 考 文 献 ［ ］ 赵桐茂 ． １ 人类血型遗传学 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 科学出版社 ， ８ ：８ ５ ． １ ７２ — ７ ９ ［ ］ 郭景 元． ２ 法医 物证 学 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 国人 民公 安 大学 出 版社 ， 中 注 ： Ｈ ＝ ．０ ０ ３ Ｃ ０ ０ １ Ｒ Ｐ＝０ ０ １ Ｃ ．００ ３１ ９ ７０—８ ９ ７： ２．维普资讯 http://www.cqvip.com９８ ８ ［ ］ Ｗａ ｈＰ ． ｈｌｘ１０ ａ ｅ ｉｍ ｆ ｉｐｅｅｔ ｔ ｎｏ Ｎ ｒ ３ ｌ Ｓ Ｃ ｅ 一０ ｓａｍ ｄｕ ｏ ｓ ｌ ｘｒ ｉ ｆ Ａ ｆ ｓ ｅ ｒ ｍ ａｏ Ｄ ｏ Ｐ Ｒ ｂｓｄｔｐｎ ｏ ｒｎｉ ｔｒｌ Ｊ ． ｉ Ｔ ｃｎｑ ｅ ，９ １ Ｃ ａｅ ｉｇｆ ｍ ｆ ｅ ｓ ｍａ ｉ ［ ］ Ｂｏ ｅｈ ｉｕｓ １９ ， ｙ ｒ ｏ ｃ ｅａ １ （ ） ５ ６— ｌ ． ０ ４ ：０ ５ ３ Ｍｅ ｉａ ｏ ｒａ ，ｕ． ０ ８ Ｖ １３ Ｎｏ ７ ｄｃ ２ ｕｎ ２Ｊ １２ ０ ， ｏ． ０， ． Ｊ『 ］ Ｗｅ ｅ ７ ｂｒ儿 ， ｙＰ ． ｂ ｎ ａｔｃａｓｏ ｕ ｎ Ｎ Ｍａ Ｅ Ａ ｕｄ ｎ ｌ ｆｈ ｍａ Ｄ Ａ ｓ ｙ ｒｈｓ ｍｏｐｉ ｍ ｗ ｉｈｃｎｂ ｐｄｕｉｇｔｅｐｌｍ ｒｓ ｈｉ ｅｃ ｏ Ｊ ． ｍ Ｊ ｈｃ ａ ｅｔ ｅ ｓ ｏｙ ｅａｅｃａ ｒａｔ ｎ［ ］ Ａ ｙ ｎ ｈ ｎ ｉＨ ｍ Ｇ ｎｔ１８ ，４ ３ ３ ８—３９ ｕ ｅｅ，９ ９ ４ （ ）：８ ８．『 ］ Ｍｏｅ ｉ Ｒ， ａ ｍｓ ｒ ， ｅｅ ｂ ｕ ｈ Ｄ ｅ １Ｖ ｉａ ｏ ｆ ｈ ｒ ８ ｒｔ ｔ Ｔ Ｂ ｕ ｔ ｋ ＡＬ Ｄ ｆｎ ａ ｇ Ａ，ｔ ． ａ ｄ ｔ ｎ ｏ ｏ ａ ａ ｌ ｉ ｓ ｔ［ ］ Ａ ｒ ａＡｓ ｃ ｔｎｏ ｌｏ ａｋ． ｎ ｕ ｐｒ ｓｍ ｒ ｒｔｓ ４ ｍｅ ｃ ｓ ｉ ｉ ｆＢｏｄＢ ｎ ｓＡ ｎ ａ ｒ ｏｔ ｕ ｍａ ｆ — ｉ ｏ ａｏ ｌｅ ｙｏ ｅ ｉ ｉ２０ ［ Ｂ Ｏ ］ ｒ ｇｎ ０２ Ｄ ／ Ｌ ． ｎ ［ Ｊｆｅ ５ ｅｒｙＷＭ． ｉｓ ｔｔ ａ ｅａｕｔ ｎｏ ￣ｄｎｅｆ ｍ ｃｎｉｕｕ ｌ Ｂｏｔ ｉｉ ｌ ｖｌａｏ ｆ ｅ ｃ ｒ ｏｔ ｏｓａ— ａｓｃ ｉ ｅ ｏ ｎ ｌ ｌ ｒ ｑ ｅ ｃ ｉｔｉ ｕ ｉ ｎ ＤＮＡ ｒ ｂ ｓ ｉ ｅｅ ｅ ｃ ｏ ｄ ｓ ｕ ｅ ａ ｅｅ ｆｅ ｕ ｎ ｙ ｄ ｓｒｂ ｔ ｏ ｐ ｏ ｅ ｎ ｒ ｆｒ ｎ ｅ ｔ ｉｐ ｔｄ ｐ —ｔ ｄ ｍｒｐ ａ Ｓ Ｒ ）ｆｒｏ ｎｉｕａｅ ｐｒ ｒ ａｃ ｓｎ ｆ ｕ ａ ｅ ｅｔ Ｔ ｓ ｏ ｒ ｓ ｓｇ ：ｅ ｏｍ ｅ ｅｔ ｇｏｆ — ｎ ｅ ｓ（ ｆ ｅ ｃ ｆ ｎ ｔ ｉ ｌＯ ｓ ｅ ｔｍｕ ｔ ｌ Ｘ Ｓ Ｒ ｙ ｔｍｓ ａ ｄ ａ ａ ｙ ｉ ｆａ ｔ ｅ ｔ ｄ ｓｍｕ ａ ｅ ｒ ｃ ｎ ｌ ｐ ｅ Ｔ ｓ ｓｅ ｎ ｌ ｓｓ ｏ ｕ ｈ ｎ ｃ ａ ｉ ｌ — ｉ ｎ ｉ ｎｔ ｏ ｎｉ ｓｍｐｅ［ ］ ＪＦｒｎｉ Ｓｉ２ ０ ，６（ ） ６７— ６ ． ｅ ｒ ｓ ａ ｌｓ Ｊ ． ｏ ｓ ｃ，０ １４ ３ ：４ ６ ０ ｄｆｅ ｃ ｅ ｃ［ ］ Ｓ ｃｈ ｔ ， ａｃｇ ｏ Ｃ ｔ Ｉｅ ． ｆｃｅｃ ｆ＇ｏ ｉｅｅｔ ｉｅ ９ ａｃｅｔＬ Ｃ ａｎ ｏｅ ，ｔ Ｅ ｉｎｙｏｔ ｆｒｎ ｎ— ｉ ｌ Ｇ， ａ ｉ １ ａｄ ｎｔ ｎ ｙ ｎ ｄｎ ｔ Ｊ ． Ｆ ｒ ｓ ｃ， ８ ， （ ） １ １ — １ ． ｅ ｉ ｄｉ ｔ 【 ｊ Ｊ ｏｅ ｉ Ｓｉ ９９ ３ ６ ： ３ １ １ ７ ｒ ｔａ ｅｉ ｙ ｎｃ １ ４ ３ ［ ］ ＭｏｄＲ ， ｍ ｎ Ｃ ｔ Ｉｅ ａ． ａ ｉ ａｄｅ ｃｅｔ ｅｏ ｔ ｎ ６ ｒ Ｌ Ｈａ ｍｏｄＨＡ， ｏ ，ｔ Ｒ ｐｄ ｎ ｆ ｉ ｓｌ ｉ ｏ １ ｉ ｎｒ ｕｏ ｏ ａｅｔｇ ｙａ ｌ ｃｔ ｎｏ ｈｒｔｎ ｅ ｅｅｔ［ ］ Ａ ｕ ｆ ｒｎａｅｂ ｍｐｉ ａｏ ｆ ｏ ａｄｍ ｒｐ ａ Ｊ ． ｍ ＪＨ ｍ ｐ ｉ ｆ ｉ ｓｔ ｓＧ ｎｔ１９ ，５ １ １０—１５ ｅｅ，９ ４ ５ （ ）：９ ９．ｌｃ ｓｏ ｎ ｅ ｐａ ｙｔ ｒＤ ｐｎ ｕｐｓｓＪ ． ｌ ｉ ｏｉ ｈｒ ｔ ｄ ｍ ｒ ｅｔ ｓ ｍｓｆ ＮＡｔ ｉｇｐｒｏｅ ［］ Ｃｉ — ｔａ ｅ ｓ ｅ ｏ ｙ ｎ ｃｌＣ ｅ ｉｔ ，９ ９，５ ２ ：７ ａ ｈｍ ｓｙ １９ ４ （ ） １８—１３ ｒ ８． （ 收稿 日 ：０ ８ ０ — ３ 修 回日期 ： ０ — ３— ２ 期 ２０ — １ ２ ２ ８ ０ ０） ０子宫 内膜异位症患者血管内皮生长 因子 的表达及其临床意义 韦 明 雷 志英 （ １广西 田阳县人 民医院 ， 田阳县 ５３ ０ ； ３ ６０ ２右江 民族 医学 院 ， 百色市 ５３ ０ ） ３ ００ 【 要】 目的 摘 探讨血 管 内皮生长因子（ Ｅ Ｆ Ｖ Ｇ ）在子 宫 内膜 异位症 （ Ｍ） 生发展 中的作用及其 临床意 义。方法 用 ｓ Ｅ 发 Ｐ法检 测 Ｅ Ｍ患者 ３ ６例异位 内膜 、２例 在位 内膜和 ２ 正常子宫 内膜组织 中Ｖ Ｇ ３ ２例 Ｅ Ｆ的表达情 况。结果 （ ） Ｅ Ｆ蛋 白在 正常 内 １Ｖ Ｇ 膜、 异位 内膜和在位 内膜组织 中阳性表达 率依 次升 高。（ ） ２ 异位 内膜组和在位 内膜组 分泌期 Ｖ Ｇ Ｅ Ｆ表达 强于增 生期 ， 差异有统计 学意义（ Ｐ＜００ ） 对 照组增生期和分泌期表达强度均较弱 ， ．５ ， 差异无统计学意义（ ０ ０ ） ３ 分泌期 Ｖ Ｇ Ｐ＞ ．５ 。（ ） Ｅ Ｆ表达 ， 位和异位 在内膜强于对照组 ， 在位和异位 内膜之 间 差异 无统 计 学意 义 （ Ｐ＞０ ０ ） 增 生期 Ｖ Ｇ ．５ ； Ｅ Ｆ表 达 ， 组 内膜之 间 差异 无统 计 学意 义 三（ Ｐ＞００ ） ．５ 。结论 ＶＧ Ｅ Ｆ的表 达异常与 Ｅ 的发病有关。 Ｍ 【 关键词 】 子 宫内膜异位症 ； 管 内皮生长因子； 血 免疫组织化学 【 中图分 类号 】 Ｒ ７ １７ ； ９ １． ｌ Ｒ ３２ 【 文献标识码 】 Ａ 【 文章编 号】 ０ ５ ４３ ４ ２０ ）７０ ８ －２ ２３ ０ （０ ８ ０ － ８０ ９液 固定 ， 石蜡包埋 ， ， ５ｐ ｍ连续切 片 ５张 ， １张行常规 ＨＥ染色进 子 宫内膜异位 症 （ ｎｏ ｔｏｉ， Ｍ）是生 育期妇女 的常 ｅｄｍｅ ｉ ｓ Ｅ ｒｓ见病 ， 特点是子宫 内膜在子宫腔被 覆面 以外 的地方 种植生 长 ， 包 括 内膜 间质 和上 皮细胞 在 子宫腔 以外 部位 的异位 生长 ， 其发病机制 尚不 明了。研究 发 现新生 血管 的形 成与 Ｅ 的发 Ｍ 病密切相关 。我们通过检 测 Ｅ Ｍ患 者异 位及在位 子宫 内膜组 织、 正常子宫 内膜组织 中血 管 内皮 生长 因子 （ａｃｌ ｎ ｏ ｅ ｖｓｕ ｒｅｄｔ ． ａ ｈ １ ｌ ｒｗｈｆｃ ｒ ｅｅｔ ， Ｅ Ｆ 的表 达 ， ｉ ｏ ｔ ｔ ｃｐｏ Ｖ Ｇ ） ａｇ ａｏｒ ｒ 探讨 Ｖ Ｇ Ｅ Ｆ在 Ｅ Ｍ发 行病理形态学观察 ， 其余用于免疫组织化学染色 。 １４ 免疫 组织化学检测 切片常规二 甲苯脱蜡 ， 度 乙醇 至 ． 梯水 。采用 ｓ ｅｔ ｉｉ ｐ ｒ ｄｓ ｏｊｇｔｄｍ ｔｏ ｔｐａ ｄｎ ｅｏ ａｅｃｎ ａ ｅ ｄ免疫组 化 方 ｒ ｖ ｘ ｕ ｅ ｈ法， ｓ 即 Ｐ法进行 免疫组 织化 学染 色 ， 实验操作 严格 按说 明 书 进行 。以 ０ ０ Ｍ Ｐ Ｓ代 替一抗 作为 阴性对 照 ， 已知 阳性 标 ．１ Ｂ 以 本为 阳性对照 。 生发展 中的作用及其 临床 意义 。 １５ 结果判 定 ．阳性信 号呈棕黄色着色。根据文献 ［ ］ 半 ２按１ 资料 与方 法 １ １ 临床 资料 ２ ０ ． ０ ５年 １ ２月至 ２ ０ ０ ７年 ５月在我 院就诊 、 经 开腹手术后病理 检查 证实 为 Ｅ 的患 者 ３ Ｍ ６例 ， 年龄 （ ６ ３± ３． 定量的方法评定 每一 张标 本 ：随机选 取高倍 镜 （× ０ ） 至 ４０ 下 少 ５个视 野 ， 计数 阳性 细胞的百分率 ， 并进 行计分 （ ０～４分 ） ，同时对 阳性细胞 免疫染色强度进行 计分 （ ３分 ） 免疫组 化 ０～ ，染色评分 ＝阳性 细胞百分 数评分 ×染色 强度评 分。０分为 阴 ４５ 岁 ， ． ） 增殖期 ２ ２例 ， 分泌期 １ 。通过刮 宫或切 开手 术取 ４例Ｅ 患者的在位子宫内膜共 ３ Ｍ ２例 ， 龄 （５ ８± ． ）岁 ， 年 ３． ６２ 增殖 性（ 一）， ２分为弱 阳性 （＋）３～ １～ ， ４分为中等阳性（＋＋）４ ， 分 以上为强 阳性 （＋＋＋） 。期１ 例， ６ 分泌期 １ 例 。选择 同期因子宫肌瘤行子宫切除术的 ６２ ２例正常子宫 内膜为对照组 ， 龄（ ６ １ ． ） ， 殖期 １ 年 ３ ． ±５ ８ 岁 增 ２１６ 统计 学方 法 ．数 据 以 ±ｓ 表示 ， 应用 Ｓ Ｓ １ ． Ｐ Ｓ １仅软件进 行统计学处理，２ Ｘ 检验比较各组问免疫组化结果。 ２ 结 果 例， 分泌期 ｌ 。所 有病例均无 内分泌 和感染 性疾病 ， ０例 术前 ３ 个月无激素治疗史， 手术均在增殖期或分泌早期进行。三组 年龄 比较差异无统计学意义 （ ０ ０ ） Ｐ＞ ．５ 。 １２ 实验 试剂 鼠抗人 Ｖ Ｇ ． Ｅ Ｆ单克隆抗体 、Ｐ免疫试剂 盒和 ｓ 山羊血清 、 Ａ Ｄ Ｂ显色试剂 盒均 购 自深圳 晶美 生物工 程有 限公 司。 ２ １ 三组 内膜 Ｖ Ｇ ． Ｅ Ｆ的 表达 情 况 免 疫组 织化 学检 测结果 显示 ， 在正 常 内膜 、 位 内膜 和在 位 内膜 组织 中均 可检 测 到 异 ＶＧ Ｅ Ｆ的表 达 ， 阳性率 分别 为 ２ ． ％ 、５ ６ 和 ７ ． ％ ， 其 ７３ ５ ．％ ８ １ 三 组阳性表达率依次 升高 ， 差别有统计学意义 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ，５ 。１３ 标 本 制 备 ．所 有 组 织 术 后 立 即 取 材 ， ４ 多 聚 甲醛 溶 经 ％
维普资讯 http://www.cqvip.com９６ ８ Ｍｅ ｉａ ｏ ｒ ａ ，ｕ ． ０ ８， ｏ． ０， ． ｄｃ ｌ ｕｎ ｌＪ １２ ０ Ｖ １３ Ｎｏ ７ Ｊ给 作为一种治疗手段 ， 明显 提高 老年 冠心 病 患者整 体健 康水 对老年冠心病患 者积极 进行 常规 药物治 疗 的基础 上 ， 予行 可平及生活质量 。 之有效 的心理干预 ， 无论 是对心理健 康状 况的提高 ， 是对生 还 老 年冠 心 病 患 者 普 遍 存 在 焦 虑 、 郁 、 怖 等 情 绪 问 活满意度 的改善都具有重要意义 。 抑 恐 题 ］究其原 因可能是 ： １ 疾病 本身 给老年 人带 来各 种躯 体 ， （） 上不适感觉 ， 如心绞 痛 、 心悸 、 闷 等弓 起老 年人 的焦 虑与 恐 胸 Ｉ 参 考 文 献 怖 。（ ） ２ 由于长 期患病 ， 致经济 负担 增加 ， 活 自理 能 力下 ［ ］ 叶志荣 ， 菊贤． 心病 、 血压与心理 障碍 ［ ］ 中国行为医学 导 生 １ 杨 冠 高 Ｊ． 降以及社交 困难 等造成 对 生活失 去 信心 ， 而产 生焦 虑或 抑 从 科学 ，９７，（ ） ３ ３— １ ． １９ ６ ４ ：１ ３ ５ 郁情绪 。（ ） ３ 对疾病 的过 度担 心和 对死 亡 的 害怕 而 产生 焦虑 ［ ］ 张鸿修 ， ２ 黄体钢． 实用冠心病 学 ［ ．第 ４ 天津： Ｍ］ 版． 天津科技 翻 与恐怖 。而焦虑 、 郁 和恐惧这 种 强烈 而持 久 的负性 情 绪反 抑应可造成躯体生理机能失调 ， 甚至神经 内分泌机能 紊乱 ， Ｉ 弓 发 一译 出 版 公 司 ，０ ５ ４０— １． ２ ０ ：１ ４ ２ ［ ］ Ｅ ｔ ｃ Ｃｃ Ａ Ｒ ｄｃ ． ｉ ｏｄ ｒ ｓｒ， ｌ ｈｌ ｎ ｒ ３ ｓｕｈＲ，ｏａ ， ｏ ｉｏ Ｌ Ｈｓ ｂ ｏ ｅ ｕ ａ ｏｏ ａｄ ａ ｒ ｉＪ ｈｌ ｐｓ ｅ ｃ ｃ－ ｄ ｖ ｅｌ ｓ［ ］ Ｊ ｙｅ ｅｓ２０ ， （ ）２ ６ ２９ ｉ ａ ｕ ｒｉ Ｊ ． ｐｒ ｎ ， ５ ２ １ ： — ２ ． ｏ ｓ ａ ｒｋ Ｈ ｔ ０ ３ ２ 系列生理 、 病理 改变 ， 感神经 活 动增 强 Ｊ Ｉ Ｌ 酚胺 交 。￣ Ｊ 茶 Ｉ４ 季晓莉． Ｅ 市 １ ８ 例老 年人生 活满意度相关 因素分 ｊ京 ０ ３ 的过量分泌 、 脂类代谢紊乱 、 多种 促凝物 质 和有 强烈血 管收缩 ［ ］ 陶 国枢 ，作用 Ｔ Ａ Ｘ ２的释 放、 率加 快 、 压上 升等 ， 结果 是心 肌供 心 血 其 血 、 氧减少 ， 供 而心肌 氧耗 增 多 ， 如此 负性 情绪 就促 发或 加重 了心绞痛 、 心肌梗死 、 心律失 常及心 衰。本文 两组患者 在治疗 前Ｓ Ｌ９ 各 因子分与 中 国常模 比较 ， Ｃ－ ０ 差异 均有统 计学 意义 （ Ｐ均 ＜００ １ ， ． ０ ） 说明老年冠心病 患者存 在 比较 严重 的心理 障 碍 。观察组经治疗 和心理 干预后 ， Ｃ 一 Ｓ Ｌ９ ０各 因子 分与 治疗前 比较 ， 差异均有统计学意义（ Ｐ均 ＜０ ０ ） 且与对 照组治疗后 ．１ ； 比较 ，Ｃ 一 Ｓ Ｌ９ ０各因子分 的差异也有 统计学 意义 （ 尸均 ＜ ． １ ， ０ ０ ） 析 ［］中国心理卫 生杂志 ， ９ ， （ ）３８ ３０ Ｊ． １ ８ １ ６ ： — ６． ９ ２ ３ ［］ 金 ５ 华， 吴文源 ， 张明园． 中国正常人 Ｓ Ｌ９ Ｃ －０评定结果 的初 步分 析 ［ ］ 中国神经精 神疾病 杂志 ，９ ６ １ （ ）２ ０－ ６ ． Ｊ． １８ ， ５ ： ２ ６ ２３ ［ ］ Ｄ ｎ ｅｙＳ ｕｌ — －ｆ ａ ｅｓ ｅｔｎ ａｖｎｅ ａｃｒ Ｊ ． ｕｒ ６ ｏｎｌ ．Ｑ ａｔ ｏ ｌｅ ｓ ｓ ｎ ｉ ｄａｃｄｃｎｅ［ ］ Ｃ ｒ ｌ ｉ ｆｉ ｓ ｍ ｙ Ｏｎｏ Ｒ ｐ２ ０ ， （ ）：３ ｃｌ ｅ ，０ ｏ ２ ４ ３ ８—３２ ４．［ ］ 李冬梅． ７ 心理干预对 改善老年 冠心病焦 虑抑郁状 况 的临床研究 ［ ］ 现代医药卫生 ， ０ ，２ ９ ： ２ ３一 ４ ｊ． ２ ６２ （） １ ８ ｌ ． ０ ８ ２ ［ ］ 安思训， 晓华 ， ８ 杨 张为众． 理干预对 中老年妇 女冠心 病治疗 的 心 影响及 意义［ ］ 中国妇幼保健 ， ０ ， （０ ： ６ ｌ ２ ７ ． Ｊ． ２ ５２ ２ ）２ ７ 一 ２ ０ ０ ６ ［ ］ 黄开群． ９ 健康教 育在冠 心病二 级预防 中应 用的探讨 ［ ］ 广西 医 Ｊ．学 ，０ ３ ２ （ ２ ： ７ ２ ０ ，５ １ ） ２５ ６—２５ ７ ７ 表 明心理 干预能有效 稳定 病人 情绪 ， 消除 焦虑 、 郁及 恐惧 ， 抑 改善躯 体症状 ， 使患者的心理 障碍得到明显改善 。 随着时 间的延长 ， 老年 冠心 病患 者对 生 活 的满意 度逐 渐 降低 ， 心理 障碍越来越 重 ； 心理 障碍 的加 重 ， 而 反之 影 响患 者 对生活的满意程度 ， 并直 接影 响疾病 的康 复和预后 。因此 ， 在 （ 收稿 １ ： ８— １—１ 修 回 １期 ：０ ８— ２—１ ） ３期 加Ｏ ０ ｌ ３ ２０ ０ ７ Ａ Ｏ血 型 遗 传 异 常 的 亲 子 鉴 定 案 例 分 析 Ｂ唐秋 民 申卫 东 何 保仁 李恒聪 周 燕 廖 燕 莫秋 红 黄 丹翊 （ 广西南宁 中心血站 、 广西南宁输血 医学研究所 ， 南宁市 ５ ００ ） ３ ０ ３ 采 用 Ｐ Ｒ复合 扩增技 Ｃ【 摘要 】 目的 探 讨应用短 串联重复序 列（ Ｔ ） 因位 点检测技术 开展 亲子鉴 定的可行性 。方法 ＳＲ 基术 、 细管电泳及五 色荧光 自动化检 测技 术对 ２例 亲子鉴定案例 ６份血液样本 ， 毛 进行 了 ｌ ５个 Ｓ Ｒ基 因位点和 １个 Ａ ｅｏｅｉ Ｔ ｍ ｌ ｎｎ性 ｇ 别基 因位点捡测分析 。认定亲权关 系的均 以亲子关 系指数 （ Ｃ ） ９ ．３ 为准， Ｒ Ｐ Ｉ ９７％ ＞ 排除亲权 关系的则 以＞３个 以上基 因位 点不符 １ 为依据 。结果 ｌ 例排 除亲子关 系， ｌ 不排 除亲子关 系。结 论 另 例 Ｓ Ｒ位 点的基 因扫描 方 法简便、 Ｔ 省时 、 快速 、 灵敏度 高 ， 结果 准确可靠 。 【 关键词 １ 法 医物证 学 ； 亲子鉴定 ； 串联 重复序列基 因位点 ；Ｃ 短 Ｐ Ｒ复合扩增技术 ；Ｂ Ａ Ｏ血 型遗传异 常 【 中图分类号 】 Ｒ４６ １ ．１ ４ 【 文献标识 码】 Ａ 【 文章编号 】 ０５－ ０ （０８０－ ８－ ２３ ３４ ２０ ）７０ ６ ３ ４ ９ ０自人类 发 现血 型物 质并 证 明 了它 是 个 体的 一种 遗 传标 记， 即用于亲子鉴定 。Ａ Ｏ系统是人类 发现最 早的血 型系统 ， Ｂ １ 简要 案情 案例 １ 小孩在某红 十字 会医院出生 ， ： 检验其血型为 Ａ型 ， 遵循孟 德尔遗传学定律 ， 常表现为 简单 的显性或 隐性遗传ｎ 。 ］ 它 的血 清学分 型简便 、 稳定 、 可靠 ， 一般 Ａ Ｈ抗原 检测结 果都 Ｂ父母血型均为 ０型 ， 被告 知他们之 问不会生 出 Ａ型的小孩 ， 逐 案例 ２ 小孩在某 市人民医院出生 ， ： 检验其血型为 Ｂ型 ， 父 符合孟德尔遗传规律 ， 在一个家庭中， 孩子的血型基因必定来 怀疑 医院换错 婴儿 ， 而要求进行亲子鉴定。 自父母 ， 型可 以作 为 一种 遗 传标 记 用 于 亲子 鉴 定。 因此 ， 血 Ａ Ｏ血型系统是亲子鉴定 中使用得最早 、 多 、 Ｂ 最 最经 典的多态 母血 型均 为 ０型 ， 可能出生 血型为 Ｂ型的小孩 ， 不 逐怀 疑医院 换错婴儿 ， 而要求进行亲子鉴定 。 性遗 传标记 。本文 报告 ２例 Ａ Ｏ血 清学 分 型结果 与孟 德 Ｂ 尔遗传规律矛盾 的亲 子鉴 定案 例 ， 通过 Ｄ Ａ多态 性 分析 ， Ｎ 结 果 １ 排 除 亲 权 关 系 ， １ 不排 除 亲 权 关 系 。 例 另 例 维普资讯 http://www.cqvip.com广 番 医学 ２ ０ ０８年 ７月第 ３ 第 ７期 Ｏ卷９７ ８ ２ 材料 与 方法 ２ １ 材料 ．凝剂 。 ２２ ． 方 法 表 ２ 案 例 ２的 Ｓ Ｒ 检 测 结 果 Ｔ分别抽取 当事人静脉血 ２～ ｌ加 ５ Ｅ Ｔ ３ｍ ， ％ Ｄ Ａ抗 ２ ２ １ Ｄ Ａ 提 取 ： Ｃ ｄ ｘ１０法 提 取 Ｄ Ａ（ ｉ— ａ 司 ） ． ． Ｎ 用 ｈ ｅ一０ Ｎ ＢｏＲ ｄ公 ，详 细操作步骤见文献 ［ ］ ３。２ ２ ２ 多 重 Ｐ Ｒ扩 增 ： Ａ Ｉ 司的 Ｉｅｔ ｌｒ ．． Ｃ 用 Ｂ公 ｄｎｉ ｅ 法医鉴 定试 ｉ ｆ剂盒进行 Ｐ Ｒ扩增 Ｓ Ｒ基因位点 。反应总体系为 ２ ， 中 Ｃ Ｔ ５ 其Ｐ Ｒ Ｒ ａｔｎ Ｍｉ ９ ５ ， ｒ ｅ ， Ｅ Ｔ ｑＧ ｌ（ ／ ） Ｃ ｅｃ ｏ ｘ ． Ｐｉ ｒ ｉ ｍ ５ Ｐ ａ ｏ ５ Ｕ １ ｄ ０ ５ 。加 适量的 Ｄ Ａ模板 ， ． Ｎ 用去离子 水补足 ２ 。Ｐ Ｒ反 ５ Ｃ应在 Ｇ ｎＡ ｐ⑤ ９０ ｅｅ ｍ ７０扩增 仪上进 行 ， 扩增 条件为 ：５ ９℃预 变 性 １ ｎ 然后 ９ 变 性 １ｍ ｎ ５ 复 性 １ｍｎ ７ ℃ 延 伸 １ｍｉ， ４ ｉ，９ ｉ，２１ｍｉ， ２ ｎ 共 ８个循环 ， 最后 ６ ℃延伸 ６ ｉ。 Ｏ ０ｍ ｎ ２２ ３ 扩增 产物 的检测 ： Ｈ — ｉ ．． 取 ｉ 甲酰胺 ８ ７ ， Ｓ５ ０ＬＺ Ｄ ． Ｇ －０ Ｉ 分子 量标记 ０ ３ 和 １ ｌ Ｃ ． Ｒ产物或 Ｌｄ ｅ 混合在Ｇ ｎＡ ｐ Ｐ ａｄ ｒ ｅｅ ｍ ⑩ ９ ０ 增 仪 上 ９ ℃变 性 ３ ｒｎ制 备 电 泳样 品 ， ７ ０扩 ５ ｉ ａ 通过 Ａ Ｉ Ｂ ３ ３ Ｎ １０Ｄ Ａ遗传 分析 仪进 行 电泳 分 析 ， ３３ ａ ｏ ｅｔｎ 用 １０ ｄ ｔ Ｃ ｌ ｃｏ ａ ｌ ｉ３ ０收集电泳信息 ， ． 再用 Ｇ ｎ Ｍａｐ ｒ ３２软 件对 片段大 小 ｅ ｅ ｐ ｅｌ ｖ ． Ｄ注 ：Ｐ ＝２８ ６９ ７ ７ Ｃ Ｉ １ ２ ．５ Ｒ Ｐ＝ ． ９ ９ Ｃ ０ ９９９９ ６亲子鉴定又称 亲权鉴定 ， 是法 医物 证学鉴 定 的重 要 内容 之一 ， 是指应用医学 、 物学 和遗传 学方 法 ， 人类 遗传 标记 生 对 进行检测分析来判 断父母 与子女 是否 存在 亲 生关 系的鉴 定 。 人类血型被发现后 ， 明了它是 个体 的一 种遗 传标记 ， 证 并很快 进行 分析 ， 最后得 出 Ｓ 分型结果。 １ ３ 结 果 与分析 以上 ２例亲子鉴 定 ， 父亲 与孩子 的遗传 标记 均不 符合 血 型遗传规律 。对 ２例案件采用 Ｓ Ｒ基 因扫 描技术 ， Ｔ 进行 了 １ ５ 个 Ｓ Ｒ基 因位点和 １ Ａ ｅ ｇｎｎ性别基 因位 点检 测分 析 ， Ｔ 个 ｍ ｌ ｅｉ ｏ 被用于亲子鉴定 ， 由于血 型的多态性 程度有 限 ， 多人可 以 但 许 表现 同一血型 ， 单凭血 型检查结果 ， 一般 只 能在 某些 情况下 作 出排除的结论 ， 以作 出肯 定的 结论 。近年 来 由于 Ｄ Ａ技术 难 Ｎ 的飞速发展 ， Ｆ Ｐ 限制性 片段 长 度多 态性 ） Ｓ Ｒ（ 串联 ＲＬ （ 和 Ｔ 短 重复序列 ） 等新的基 因分型 方法在 法 医学个 体 识别 和亲子鉴 结果 见表 １２ 、 。案例 １中分别在 Ｄ Ｓ １ ５ ８ ８等 ４个基 因位点 中 ， 父亲与孩子的基 因型不符 合遗 传规律 ， 小孩 与母 亲 的基 因型 符合遗 传规律 。案例 ２父亲 与孩子 及母亲 与小孩 的各种标 记 均符合遗 传规律 ， 计算 Ｒ Ｐ分别 达 到 ９ ． ９ 经 Ｃ ９ ９ ％ Ｊ 。因此 ， 从检 测结 果可以看 出， 例 １中的孩 子 与父 亲无 生 物学 父子 案 关系， 即不是其父亲 亲生 ， 案例 ２中 的孩 子 为父 亲亲 生 ， 而 父 亲的血型经检测 ， 存在基 因突变 （ 果另文发表 ） 在 ２例案例 结 ， 中医院均没有换错 婴儿 。 表 １ 案例 １的 Ｓ Ｒ 分 型 结 果 Ｔ定的应用越来越广 泛 ， 目前 国 内外权 威机构 进行 亲 子鉴定 是 最常用的方法之一 Ｊ 。短 串联重 复序 列 （ｈ ｒｔｎ ｅ ｅｅｔ， ｓｏｔａｄｍ ｒｐａ ｓＳ Ｒ） Ｔ 是一类广泛存在 于真核 生物基 因组 中的 Ｄ Ａ 串联重 复 Ｎ 序列 。它 由２～ ｐ的核心序列构成 ， ６ｂ 重复次数通常在 １ ３ ５～ Ｏ 次 ，Ｎ Ｄ Ａ片段长度为 １０～３ ０ｂ 由于 Ｓ Ｒ很容易通过 Ｐ Ｒ ０ ５ ｐ， Ｔ Ｃ 扩增 、 电泳分型 ， 以是 目前 常用 的遗 传标 记 ， 所 特别 是应 用 于法医学领域有诸 多优点 ：（ ） Ｔ １ Ｓ Ｒ在人 类基 因组 中广 泛 分 布， 目的片段 小 ， 合 度 高。 （ ） Ｔ 杂 ２ Ｓ Ｒ扩 增 片 段 短 ， 般 在 一 １０～ ５ ｐ ０ ３ ０ｂ 之间 ， 扩增率 高 ， 敏 度 比传统 的 Ｄ Ａ指纹 高得 灵 Ｎ 多 。（ ） ３ 各个 Ｓ Ｒ位点扩增 片段长 度近似 ， 增条 件相似 ， Ｔ 扩 可进行复合扩增。 （ ） Ｔ ４ Ｓ Ｒ核 心序 列重 复单 位少 （ ６ ｂ ） ２～ ｐ ，Ａ —Ｌ ｍｐＦ Ｐ时不会造成小 片段 优先 扩增 的错误 。（ ） 测方法 ５检简单省时 ， 且易实现 自动化 、 准化 』 标 。 因此 ， 在短短的几 年间 ， 由于 Ｓ Ｒ具 有高 信息 量 ， Ｔ 在基 因 组 中分布广泛 ， 以及可 以用 Ｐ Ｒ扩 增 ， Ｃ 电泳分 型等 优点 ， 使其 在生物学各领域 中得 到广 泛应 用 ， 并取 得惊 人 的进 展。在亲 子鉴定 、 个体识别应用 中， 由于 ＳＲ 系统 的使 用 ， 其检 测进 Ｔ 使 入 了一个新 的阶段 ， 检测水平有 了空前 的提高 。同时 ， 也将为 人类基 因组研究 、 基因诊断 、 物考古等领 域 的研究 开辟 一条 生新 途径。 参 考 文 献 ［ ］ 赵桐茂 ． １ 人类血型遗传学 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 科学出版社 ， ８ ：８ ５ ． １ ７２ — ７ ９ ［ ］ 郭景 元． ２ 法医 物证 学 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 国人 民公 安 大学 出 版社 ， 中 注 ： Ｈ ＝ ．０ ０ ３ Ｃ ０ ０ １ Ｒ Ｐ＝０ ０ １ Ｃ ．００ ３１ ９ ７０—８ ９ ７： ２．维普资讯 http://www.cqvip.com９８ ８ ［ ］ Ｗａ ｈＰ ． ｈｌｘ１０ ａ ｅ ｉｍ ｆ ｉｐｅｅｔ ｔ ｎｏ Ｎ ｒ ３ ｌ Ｓ Ｃ ｅ 一０ ｓａｍ ｄｕ ｏ ｓ ｌ ｘｒ ｉ ｆ Ａ ｆ ｓ ｅ ｒ ｍ ａｏ Ｄ ｏ Ｐ Ｒ ｂｓｄｔｐｎ ｏ ｒｎｉ ｔｒｌ Ｊ ． ｉ Ｔ ｃｎｑ ｅ ，９ １ Ｃ ａｅ ｉｇｆ ｍ ｆ ｅ ｓ ｍａ ｉ ［ ］ Ｂｏ ｅｈ ｉｕｓ １９ ， ｙ ｒ ｏ ｃ ｅａ １ （ ） ５ ６— ｌ ． ０ ４ ：０ ５ ３ Ｍｅ ｉａ ｏ ｒａ ，ｕ． ０ ８ Ｖ １３ Ｎｏ ７ ｄｃ ２ ｕｎ ２Ｊ １２ ０ ， ｏ． ０， ． Ｊ『 ］ Ｗｅ ｅ ７ ｂｒ儿 ， ｙＰ ． ｂ ｎ ａｔｃａｓｏ ｕ ｎ Ｎ Ｍａ Ｅ Ａ ｕｄ ｎ ｌ ｆｈ ｍａ Ｄ Ａ ｓ ｙ ｒｈｓ ｍｏｐｉ ｍ ｗ ｉｈｃｎｂ ｐｄｕｉｇｔｅｐｌｍ ｒｓ ｈｉ ｅｃ ｏ Ｊ ． ｍ Ｊ ｈｃ ａ ｅｔ ｅ ｓ ｏｙ ｅａｅｃａ ｒａｔ ｎ［ ］ Ａ ｙ ｎ ｈ ｎ ｉＨ ｍ Ｇ ｎｔ１８ ，４ ３ ３ ８—３９ ｕ ｅｅ，９ ９ ４ （ ）：８ ８．『 ］ Ｍｏｅ ｉ Ｒ， ａ ｍｓ ｒ ， ｅｅ ｂ ｕ ｈ Ｄ ｅ １Ｖ ｉａ ｏ ｆ ｈ ｒ ８ ｒｔ ｔ Ｔ Ｂ ｕ ｔ ｋ ＡＬ Ｄ ｆｎ ａ ｇ Ａ，ｔ ． ａ ｄ ｔ ｎ ｏ ｏ ａ ａ ｌ ｉ ｓ ｔ［ ］ Ａ ｒ ａＡｓ ｃ ｔｎｏ ｌｏ ａｋ． ｎ ｕ ｐｒ ｓｍ ｒ ｒｔｓ ４ ｍｅ ｃ ｓ ｉ ｉ ｆＢｏｄＢ ｎ ｓＡ ｎ ａ ｒ ｏｔ ｕ ｍａ ｆ — ｉ ｏ ａｏ ｌｅ ｙｏ ｅ ｉ ｉ２０ ［ Ｂ Ｏ ］ ｒ ｇｎ ０２ Ｄ ／ Ｌ ． ｎ ［ Ｊｆｅ ５ ｅｒｙＷＭ． ｉｓ ｔｔ ａ ｅａｕｔ ｎｏ ￣ｄｎｅｆ ｍ ｃｎｉｕｕ ｌ Ｂｏｔ ｉｉ ｌ ｖｌａｏ ｆ ｅ ｃ ｒ ｏｔ ｏｓａ— ａｓｃ ｉ ｅ ｏ ｎ ｌ ｌ ｒ ｑ ｅ ｃ ｉｔｉ ｕ ｉ ｎ ＤＮＡ ｒ ｂ ｓ ｉ ｅｅ ｅ ｃ ｏ ｄ ｓ ｕ ｅ ａ ｅｅ ｆｅ ｕ ｎ ｙ ｄ ｓｒｂ ｔ ｏ ｐ ｏ ｅ ｎ ｒ ｆｒ ｎ ｅ ｔ ｉｐ ｔｄ ｐ —ｔ ｄ ｍｒｐ ａ Ｓ Ｒ ）ｆｒｏ ｎｉｕａｅ ｐｒ ｒ ａｃ ｓｎ ｆ ｕ ａ ｅ ｅｔ Ｔ ｓ ｏ ｒ ｓ ｓｇ ：ｅ ｏｍ ｅ ｅｔ ｇｏｆ — ｎ ｅ ｓ（ ｆ ｅ ｃ ｆ ｎ ｔ ｉ ｌＯ ｓ ｅ ｔｍｕ ｔ ｌ Ｘ Ｓ Ｒ ｙ ｔｍｓ ａ ｄ ａ ａ ｙ ｉ ｆａ ｔ ｅ ｔ ｄ ｓｍｕ ａ ｅ ｒ ｃ ｎ ｌ ｐ ｅ Ｔ ｓ ｓｅ ｎ ｌ ｓｓ ｏ ｕ ｈ ｎ ｃ ａ ｉ ｌ — ｉ ｎ ｉ ｎｔ ｏ ｎｉ ｓｍｐｅ［ ］ ＪＦｒｎｉ Ｓｉ２ ０ ，６（ ） ６７— ６ ． ｅ ｒ ｓ ａ ｌｓ Ｊ ． ｏ ｓ ｃ，０ １４ ３ ：４ ６ ０ ｄｆｅ ｃ ｅ ｃ［ ］ Ｓ ｃｈ ｔ ， ａｃｇ ｏ Ｃ ｔ Ｉｅ ． ｆｃｅｃ ｆ＇ｏ ｉｅｅｔ ｉｅ ９ ａｃｅｔＬ Ｃ ａｎ ｏｅ ，ｔ Ｅ ｉｎｙｏｔ ｆｒｎ ｎ— ｉ ｌ Ｇ， ａ ｉ １ ａｄ ｎｔ ｎ ｙ ｎ ｄｎ ｔ Ｊ ． Ｆ ｒ ｓ ｃ， ８ ， （ ） １ １ — １ ． ｅ ｉ ｄｉ ｔ 【 ｊ Ｊ ｏｅ ｉ Ｓｉ ９９ ３ ６ ： ３ １ １ ７ ｒ ｔａ ｅｉ ｙ ｎｃ １ ４ ３ ［ ］ ＭｏｄＲ ， ｍ ｎ Ｃ ｔ Ｉｅ ａ． ａ ｉ ａｄｅ ｃｅｔ ｅｏ ｔ ｎ ６ ｒ Ｌ Ｈａ ｍｏｄＨＡ， ｏ ，ｔ Ｒ ｐｄ ｎ ｆ ｉ ｓｌ ｉ ｏ １ ｉ ｎｒ ｕｏ ｏ ａｅｔｇ ｙａ ｌ ｃｔ ｎｏ ｈｒｔｎ ｅ ｅｅｔ［ ］ Ａ ｕ ｆ ｒｎａｅｂ ｍｐｉ ａｏ ｆ ｏ ａｄｍ ｒｐ ａ Ｊ ． ｍ ＪＨ ｍ ｐ ｉ ｆ ｉ ｓｔ ｓＧ ｎｔ１９ ，５ １ １０—１５ ｅｅ，９ ４ ５ （ ）：９ ９．ｌｃ ｓｏ ｎ ｅ ｐａ ｙｔ ｒＤ ｐｎ ｕｐｓｓＪ ． ｌ ｉ ｏｉ ｈｒ ｔ ｄ ｍ ｒ ｅｔ ｓ ｍｓｆ ＮＡｔ ｉｇｐｒｏｅ ［］ Ｃｉ — ｔａ ｅ ｓ ｅ ｏ ｙ ｎ ｃｌＣ ｅ ｉｔ ，９ ９，５ ２ ：７ ａ ｈｍ ｓｙ １９ ４ （ ） １８—１３ ｒ ８． （ 收稿 日 ：０ ８ ０ — ３ 修 回日期 ： ０ — ３— ２ 期 ２０ — １ ２ ２ ８ ０ ０） ０子宫 内膜异位症患者血管内皮生长 因子 的表达及其临床意义 韦 明 雷 志英 （ １广西 田阳县人 民医院 ， 田阳县 ５３ ０ ； ３ ６０ ２右江 民族 医学 院 ， 百色市 ５３ ０ ） ３ ００ 【 要】 目的 摘 探讨血 管 内皮生长因子（ Ｅ Ｆ Ｖ Ｇ ）在子 宫 内膜 异位症 （ Ｍ） 生发展 中的作用及其 临床意 义。方法 用 ｓ Ｅ 发 Ｐ法检 测 Ｅ Ｍ患者 ３ ６例异位 内膜 、２例 在位 内膜和 ２ 正常子宫 内膜组织 中Ｖ Ｇ ３ ２例 Ｅ Ｆ的表达情 况。结果 （ ） Ｅ Ｆ蛋 白在 正常 内 １Ｖ Ｇ 膜、 异位 内膜和在位 内膜组织 中阳性表达 率依 次升 高。（ ） ２ 异位 内膜组和在位 内膜组 分泌期 Ｖ Ｇ Ｅ Ｆ表达 强于增 生期 ， 差异有统计 学意义（ Ｐ＜００ ） 对 照组增生期和分泌期表达强度均较弱 ， ．５ ， 差异无统计学意义（ ０ ０ ） ３ 分泌期 Ｖ Ｇ Ｐ＞ ．５ 。（ ） Ｅ Ｆ表达 ， 位和异位 在内膜强于对照组 ， 在位和异位 内膜之 间 差异 无统 计 学意 义 （ Ｐ＞０ ０ ） 增 生期 Ｖ Ｇ ．５ ； Ｅ Ｆ表 达 ， 组 内膜之 间 差异 无统 计 学意 义 三（ Ｐ＞００ ） ．５ 。结论 ＶＧ Ｅ Ｆ的表 达异常与 Ｅ 的发病有关。 Ｍ 【 关键词 】 子 宫内膜异位症 ； 管 内皮生长因子； 血 免疫组织化学 【 中图分 类号 】 Ｒ ７ １７ ； ９ １． ｌ Ｒ ３２ 【 文献标识码 】 Ａ 【 文章编 号】 ０ ５ ４３ ４ ２０ ）７０ ８ －２ ２３ ０ （０ ８ ０ － ８０ ９液 固定 ， 石蜡包埋 ， ， ５ｐ ｍ连续切 片 ５张 ， １张行常规 ＨＥ染色进 子 宫内膜异位 症 （ ｎｏ ｔｏｉ， Ｍ）是生 育期妇女 的常 ｅｄｍｅ ｉ ｓ Ｅ ｒｓ见病 ， 特点是子宫 内膜在子宫腔被 覆面 以外 的地方 种植生 长 ， 包 括 内膜 间质 和上 皮细胞 在 子宫腔 以外 部位 的异位 生长 ， 其发病机制 尚不 明了。研究 发 现新生 血管 的形 成与 Ｅ 的发 Ｍ 病密切相关 。我们通过检 测 Ｅ Ｍ患 者异 位及在位 子宫 内膜组 织、 正常子宫 内膜组织 中血 管 内皮 生长 因子 （ａｃｌ ｎ ｏ ｅ ｖｓｕ ｒｅｄｔ ． ａ ｈ １ ｌ ｒｗｈｆｃ ｒ ｅｅｔ ， Ｅ Ｆ 的表 达 ， ｉ ｏ ｔ ｔ ｃｐｏ Ｖ Ｇ ） ａｇ ａｏｒ ｒ 探讨 Ｖ Ｇ Ｅ Ｆ在 Ｅ Ｍ发 行病理形态学观察 ， 其余用于免疫组织化学染色 。 １４ 免疫 组织化学检测 切片常规二 甲苯脱蜡 ， 度 乙醇 至 ． 梯水 。采用 ｓ ｅｔ ｉｉ ｐ ｒ ｄｓ ｏｊｇｔｄｍ ｔｏ ｔｐａ ｄｎ ｅｏ ａｅｃｎ ａ ｅ ｄ免疫组 化 方 ｒ ｖ ｘ ｕ ｅ ｈ法， ｓ 即 Ｐ法进行 免疫组 织化 学染 色 ， 实验操作 严格 按说 明 书 进行 。以 ０ ０ Ｍ Ｐ Ｓ代 替一抗 作为 阴性对 照 ， 已知 阳性 标 ．１ Ｂ 以 本为 阳性对照 。 生发展 中的作用及其 临床 意义 。 １５ 结果判 定 ．阳性信 号呈棕黄色着色。根据文献 ［ ］ 半 ２按１ 资料 与方 法 １ １ 临床 资料 ２ ０ ． ０ ５年 １ ２月至 ２ ０ ０ ７年 ５月在我 院就诊 、 经 开腹手术后病理 检查 证实 为 Ｅ 的患 者 ３ Ｍ ６例 ， 年龄 （ ６ ３± ３． 定量的方法评定 每一 张标 本 ：随机选 取高倍 镜 （× ０ ） 至 ４０ 下 少 ５个视 野 ， 计数 阳性 细胞的百分率 ， 并进 行计分 （ ０～４分 ） ，同时对 阳性细胞 免疫染色强度进行 计分 （ ３分 ） 免疫组 化 ０～ ，染色评分 ＝阳性 细胞百分 数评分 ×染色 强度评 分。０分为 阴 ４５ 岁 ， ． ） 增殖期 ２ ２例 ， 分泌期 １ 。通过刮 宫或切 开手 术取 ４例Ｅ 患者的在位子宫内膜共 ３ Ｍ ２例 ， 龄 （５ ８± ． ）岁 ， 年 ３． ６２ 增殖 性（ 一）， ２分为弱 阳性 （＋）３～ １～ ， ４分为中等阳性（＋＋）４ ， 分 以上为强 阳性 （＋＋＋） 。期１ 例， ６ 分泌期 １ 例 。选择 同期因子宫肌瘤行子宫切除术的 ６２ ２例正常子宫 内膜为对照组 ， 龄（ ６ １ ． ） ， 殖期 １ 年 ３ ． ±５ ８ 岁 增 ２１６ 统计 学方 法 ．数 据 以 ±ｓ 表示 ， 应用 Ｓ Ｓ １ ． Ｐ Ｓ １仅软件进 行统计学处理，２ Ｘ 检验比较各组问免疫组化结果。 ２ 结 果 例， 分泌期 ｌ 。所 有病例均无 内分泌 和感染 性疾病 ， ０例 术前 ３ 个月无激素治疗史， 手术均在增殖期或分泌早期进行。三组 年龄 比较差异无统计学意义 （ ０ ０ ） Ｐ＞ ．５ 。 １２ 实验 试剂 鼠抗人 Ｖ Ｇ ． Ｅ Ｆ单克隆抗体 、Ｐ免疫试剂 盒和 ｓ 山羊血清 、 Ａ Ｄ Ｂ显色试剂 盒均 购 自深圳 晶美 生物工 程有 限公 司。 ２ １ 三组 内膜 Ｖ Ｇ ． Ｅ Ｆ的 表达 情 况 免 疫组 织化 学检 测结果 显示 ， 在正 常 内膜 、 位 内膜 和在 位 内膜 组织 中均 可检 测 到 异 ＶＧ Ｅ Ｆ的表 达 ， 阳性率 分别 为 ２ ． ％ 、５ ６ 和 ７ ． ％ ， 其 ７３ ５ ．％ ８ １ 三 组阳性表达率依次 升高 ， 差别有统计学意义 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ，５ 。１３ 标 本 制 备 ．所 有 组 织 术 后 立 即 取 材 ， ４ 多 聚 甲醛 溶 经 ％