邻菲罗啉分光光度法 测微量铁
本方法采用GB/T 3049的规定
4.5.2.1原理
试样经水提取后, 用抗坏血酸将三价铁还原成二价铁, 在pH 值2—9范围内，二价铁与邻菲罗啉反应生成橙红色的配合物，在510nm 波长处, 测定溶液的吸光度。
4.5.2.2试剂和溶液
4.5.2.2.1盐酸：1+1溶液
4.5.2.2.2氨水：1+9溶液
4.5.2.2.3乙酸-乙酸钠缓冲溶液：pH 值为4.4
4.5.2.2.4硫酸
4.5.2.2.5抗坏血酸：2%溶液，使用时配制。
4.5.2.2.6邻菲罗啉显色剂：0.2%溶液. 该溶液应避光保存, 仅能使用无色溶液。
4.5.2.2.7铁标准储备液：0.100mg/mL。准确称取0.863g 硫酸铁铵[NH4Fe(SO4)2.12H2O],精确至0.001g, 加水100 mL硫酸(4.5.2.2.4),加热溶解, 定量转移到1000 mL容量瓶中, 用水稀释至刻度, 混匀, 贮存于塑料瓶中. 此溶液1 mL含0.100mg 铁。
4.5.2.2.8铁标准溶液：0.010mg/ mL.准确吸取10 mL铁标准储备液(4.5.2.2.7)于100 mL容量瓶中, 用水稀释至刻度, 混匀, 贮存于塑料瓶中. 使用时配制。
4.5.2.3 仪器设备
常用实验室仪器、设备和
a. 分光光度计：带有3cm 光路长度的吸收池；
b. pH试纸或pH 计。
4.5.2.4 分析步骤
4.5.2.4.1标准溶液系列配制及标准曲线绘制
分别吸取0.010mg/mL铁标准溶液（4.5.2.2.8）0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mL ，于6个100 mL 烧杯中，加水至约60 mL中。用盐酸（4.5.2.2.1）或氨水(4.5.2.2.2)调节溶液pH 约为2(用精密pH 试纸或pH 计检验) ，加2.5 mL 抗坏血酸溶液（4.5.2.2.5），10 mL 乙酸-乙酸钠缓冲溶液（4.5.2.2.3）5 mL邻菲罗啉显色剂(4.5.2.2.6)，混匀，用水定容，半小时后在分光光度计上，用1cm 吸收池于波长510nm 处，以零标准溶液为参比溶液，依次测定标准溶液系列的吸光度，以标准溶液中铁的质量（ug ）为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4.5.2.4.2试样溶液测定
移取试样溶液(4.5.1.4.1)2.0—10.0 mL(预计试样中铁的含量在10—100ug 之间) 置于100 mL烧杯中, 接着按4.5.2.4.1中“加水至约60 mL „„”开始到“以零标准溶液为参比”为止，测定试样溶液的吸光度。
同时按4.5.2.4.2规定的步骤进行空白试验
4.5.2.5 分析结果的表述
铁(Fe)的含量X8，以质量百分数（%）表示，按式（8）计算：
„„„„„„„„（8）
注：选择零标准溶液定量加入盐酸（4.5.2.2.1）使pH 值在3—5之间, 记录盐酸用量, 在标准溶液系列加入等量盐酸(4.5.2.2.1)
式中：m1——从标准曲线查得试样溶液铁质量，ug ；
m0——从标准曲线查得空白溶液铁质量，ug ；
m ——称取试样质量，g ；
V ——比色时所取试样体积，mL 。
4.5.2.6允许差
取平行测定结果的算术平均值为测定结果；平行测定结果的绝对差值应符合表9要求。
表 9
铁含量，% 0.200—0.500 ＞0.500—1.00 ＞1.00—3.00 ＞3.00 绝对差值，% 0.050 0.100 0.200 0.300
邻菲罗啉分光光度法 测微量铁
本方法采用GB/T 3049的规定
4.5.2.1原理
试样经水提取后, 用抗坏血酸将三价铁还原成二价铁, 在pH 值2—9范围内，二价铁与邻菲罗啉反应生成橙红色的配合物，在510nm 波长处, 测定溶液的吸光度。
4.5.2.2试剂和溶液
4.5.2.2.1盐酸：1+1溶液
4.5.2.2.2氨水：1+9溶液
4.5.2.2.3乙酸-乙酸钠缓冲溶液：pH 值为4.4
4.5.2.2.4硫酸
4.5.2.2.5抗坏血酸：2%溶液，使用时配制。
4.5.2.2.6邻菲罗啉显色剂：0.2%溶液. 该溶液应避光保存, 仅能使用无色溶液。
4.5.2.2.7铁标准储备液：0.100mg/mL。准确称取0.863g 硫酸铁铵[NH4Fe(SO4)2.12H2O],精确至0.001g, 加水100 mL硫酸(4.5.2.2.4),加热溶解, 定量转移到1000 mL容量瓶中, 用水稀释至刻度, 混匀, 贮存于塑料瓶中. 此溶液1 mL含0.100mg 铁。
4.5.2.2.8铁标准溶液：0.010mg/ mL.准确吸取10 mL铁标准储备液(4.5.2.2.7)于100 mL容量瓶中, 用水稀释至刻度, 混匀, 贮存于塑料瓶中. 使用时配制。
4.5.2.3 仪器设备
常用实验室仪器、设备和
a. 分光光度计：带有3cm 光路长度的吸收池；
b. pH试纸或pH 计。
4.5.2.4 分析步骤
4.5.2.4.1标准溶液系列配制及标准曲线绘制
分别吸取0.010mg/mL铁标准溶液（4.5.2.2.8）0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mL ，于6个100 mL 烧杯中，加水至约60 mL中。用盐酸（4.5.2.2.1）或氨水(4.5.2.2.2)调节溶液pH 约为2(用精密pH 试纸或pH 计检验) ，加2.5 mL 抗坏血酸溶液（4.5.2.2.5），10 mL 乙酸-乙酸钠缓冲溶液（4.5.2.2.3）5 mL邻菲罗啉显色剂(4.5.2.2.6)，混匀，用水定容，半小时后在分光光度计上，用1cm 吸收池于波长510nm 处，以零标准溶液为参比溶液，依次测定标准溶液系列的吸光度，以标准溶液中铁的质量（ug ）为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4.5.2.4.2试样溶液测定
移取试样溶液(4.5.1.4.1)2.0—10.0 mL(预计试样中铁的含量在10—100ug 之间) 置于100 mL烧杯中, 接着按4.5.2.4.1中“加水至约60 mL „„”开始到“以零标准溶液为参比”为止，测定试样溶液的吸光度。
同时按4.5.2.4.2规定的步骤进行空白试验
4.5.2.5 分析结果的表述
铁(Fe)的含量X8，以质量百分数（%）表示，按式（8）计算：
„„„„„„„„（8）
注：选择零标准溶液定量加入盐酸（4.5.2.2.1）使pH 值在3—5之间, 记录盐酸用量, 在标准溶液系列加入等量盐酸(4.5.2.2.1)
式中：m1——从标准曲线查得试样溶液铁质量，ug ；
m0——从标准曲线查得空白溶液铁质量，ug ；
m ——称取试样质量，g ；
V ——比色时所取试样体积，mL 。
4.5.2.6允许差
取平行测定结果的算术平均值为测定结果；平行测定结果的绝对差值应符合表9要求。
表 9
铁含量，% 0.200—0.500 ＞0.500—1.00 ＞1.00—3.00 ＞3.00 绝对差值，% 0.050 0.100 0.200 0.300