【药品名称】
甲胎蛋白(AFP)定量测定试剂盒(化学发光法)
【商品名】
Lumiassay AFP定量检测试剂盒
【英文名】
Quantitative Determination Kit for alpha-fetoprotein (AFP) with Chemiluminescent Immunoassay (CLIA)
【汉语拼音】
jia tai tan bai ding liang ce ding（ hua xue fa guang）shi ji he
【概述】
甲胎蛋白（AFP）为最常用的肿瘤标志物之一。AFP主要由胎盘合成，其次为卵黄囊，胃肠道黏膜，肾脏可合成少许。属糖蛋白，分子量70000，含糖4%。胎儿6周开始合成，12-15周达高峰，血清浓度1-3g/L，出生时脐血为10-100mg/L；出生后1-2年降至成人水平；正常妊娠中期可达90-500ng/ml;正常人血清AFP含量在2-8ng/ml之间，许多疾病特别是肝炎都影响AFP值，AFP正常值一般低于25ng/ml。
【方法原理】
采用双抗体一步夹心法，用纯化抗甲胎蛋白（AFP）单克隆抗体包被，用碱性磷酸酶（ALP）标记抗AFP多克隆抗体。当样品加到固相有抗AFP抗体的白色不透明的条板微孔中，再加入抗AFP-碱性磷酸酶结合物，此抗AFP与固相已结合的AFP上的另一位点特异性结合。洗掉游离成分。加入底物工作液，ALP催化底物脱磷酸酯,并发出463nm的可见光。于第10分钟测定各加样品孔的发光值RLU。样品的RLU与其中的AFP浓度呈正相相关。样品中的AFP浓度依据由标准品AFP浓度和对应的RLU建立的数学模型进行定量。
【适用仪器】
1. 96孔微孔板式发光检测仪。 2. 96孔微孔板洗板机。
【样本要求】
1.样本应为血清标本，即抽取静脉血，离心前使样本充分凝固。 2.样本贮存：2~8℃保存一周，-20℃可长期保存。不要使用在室温放置超过8小时的样本。 3.样本运输：泡沫箱加冰密封条件下运输。
【组成成分】
1.固相化微孔条板 8×12 2.抗AFP-ALP结合物 1瓶 3.校准品600.0、150.0、50.0、25.0、10.0、0ng/ml各一管，装量0.3ml/管 4.发光底物 1瓶 5.浓缩清洗液（20×） 1瓶 6.说明书 1份 7.自封袋 1片 8.质孔血清： 4个浓度，装量0.3ml/管
【检测过程】
1.准备：自4℃冰箱取出试剂，室温平衡15分钟；浓缩洗液以1：20稀释成工作液。 2.加样定位：将样品及标准品分别定位于微孔条板。标准品各浓度各设一孔。另设一孔作空白对照。对于含量超过600ng/ml的样品需用样品稀释液进行稀释，然后再行检测。 3.加样：样品或标准品于相应孔分别加25ul后，每孔再各加抗AFP-ALP 75ul，在震荡器上混匀一分钟，置37℃恒温反应60分钟。 4.洗板：吸除板孔中的反应液，各孔加入洗液约400ul，静置20秒左右，除去其中液体。如此共洗五次,最后一遍将板中液体拍尽。或在吸除板孔中的反应液后，用洗板机洗板五次。 5.加底物：开启化学发光检测仪及主控制计算机，设定测定模式与参数。将微孔板置化学发光检测仪测定室，用加样器或内置加样器加底物，每孔50ul，加底物时应避免产生气泡。用内置加样器时，操作详见化学发光检测仪操作指南。 6.测定发光值：于加底物后的第10分钟测定各孔的发光值RLU。并将数据用化学发光检测仪定量软件进行定量分析，稀释标本应把测定值乘以稀释倍数。
【标准曲线拟和及定量方法】
根据各标准品测定的RLU，建立AFP浓度—RLU的回归方程，使用三次样条（Cubic Spline）或是双对数拟和方程，并绘制标准曲线。根据各样品RLU值，由定量软件直接计算转换成其相应的AFP含量。存入AFP文档资料，再输入至病人的检测报告单。
【实验成立条件】
每次实验的校准品曲线相关系数r≥0.9900(双对数)；检测由华美公司提供或是中检所提供的质控血清在以下范围内。 QCL: 17.5ng/ml-26.3ng/ml QCM: 48.8ng/ml-73.2ng/ml QCH: 124ng/ml-185ng/ml QCHH: 243ng/ml-364ng/ml
【性能特点】
1.检测范围 2.0-600.0ng/ml 2.检测限 2.0ng/ml 3.精密性 CV
【规格】
96人份
【包装】
96人份/包装盒
【保存及有效期】
1.保存条件：2℃-8℃ 2.效期：自检定合格之日起效期为6个月
【注意事项】
1.试剂启用后应尽快用完，不同批号试剂组分请勿混用。用时请将瓶内容物混匀。 2.免疫反应过程中，务必保持温度恒定准确，控制于37℃。 3.稀释浓缩洗液的去离子水应为新鲜制备的，用前应煮沸并冷却以灭活其中的磷酸酶。 4.以洗板机洗板时，每孔注液量不应少于400ul，洗板次数不应少于5次，浸泡时间不短于20秒，并注意检查加液头是否堵塞。 5.洗板时，勿用带纸屑的吸水材料，以防止磷酸酶与底物发生反应，影响检测结果的准确性。 6.加发光底物的加样器应准确，加样器头应为干净无污染的。在加发光物的过程中应避免加样器头与板孔或手指接触，以防止底物受到污染。加底物时速度应均匀，应在5min内完成加样；发光仪测定间隔时间的设置应与加底物的间隔时间保持一致。 7.临床样本均应视为有潜在传染性，请按传染疾病实验室检查规程操作。 8.每个实验室在长期实践中应建立自己的正常值范围。
【正常值参考范围】
【批准文号】
国药准字S20050003
【药品名称】
甲胎蛋白(AFP)定量测定试剂盒(化学发光法)
【商品名】
Lumiassay AFP定量检测试剂盒
【英文名】
Quantitative Determination Kit for alpha-fetoprotein (AFP) with Chemiluminescent Immunoassay (CLIA)
【汉语拼音】
jia tai tan bai ding liang ce ding（ hua xue fa guang）shi ji he
【概述】
甲胎蛋白（AFP）为最常用的肿瘤标志物之一。AFP主要由胎盘合成，其次为卵黄囊，胃肠道黏膜，肾脏可合成少许。属糖蛋白，分子量70000，含糖4%。胎儿6周开始合成，12-15周达高峰，血清浓度1-3g/L，出生时脐血为10-100mg/L；出生后1-2年降至成人水平；正常妊娠中期可达90-500ng/ml;正常人血清AFP含量在2-8ng/ml之间，许多疾病特别是肝炎都影响AFP值，AFP正常值一般低于25ng/ml。
【方法原理】
采用双抗体一步夹心法，用纯化抗甲胎蛋白（AFP）单克隆抗体包被，用碱性磷酸酶（ALP）标记抗AFP多克隆抗体。当样品加到固相有抗AFP抗体的白色不透明的条板微孔中，再加入抗AFP-碱性磷酸酶结合物，此抗AFP与固相已结合的AFP上的另一位点特异性结合。洗掉游离成分。加入底物工作液，ALP催化底物脱磷酸酯,并发出463nm的可见光。于第10分钟测定各加样品孔的发光值RLU。样品的RLU与其中的AFP浓度呈正相相关。样品中的AFP浓度依据由标准品AFP浓度和对应的RLU建立的数学模型进行定量。
【适用仪器】
1. 96孔微孔板式发光检测仪。 2. 96孔微孔板洗板机。
【样本要求】
1.样本应为血清标本，即抽取静脉血，离心前使样本充分凝固。 2.样本贮存：2~8℃保存一周，-20℃可长期保存。不要使用在室温放置超过8小时的样本。 3.样本运输：泡沫箱加冰密封条件下运输。
【组成成分】
1.固相化微孔条板 8×12 2.抗AFP-ALP结合物 1瓶 3.校准品600.0、150.0、50.0、25.0、10.0、0ng/ml各一管，装量0.3ml/管 4.发光底物 1瓶 5.浓缩清洗液（20×） 1瓶 6.说明书 1份 7.自封袋 1片 8.质孔血清： 4个浓度，装量0.3ml/管
【检测过程】
1.准备：自4℃冰箱取出试剂，室温平衡15分钟；浓缩洗液以1：20稀释成工作液。 2.加样定位：将样品及标准品分别定位于微孔条板。标准品各浓度各设一孔。另设一孔作空白对照。对于含量超过600ng/ml的样品需用样品稀释液进行稀释，然后再行检测。 3.加样：样品或标准品于相应孔分别加25ul后，每孔再各加抗AFP-ALP 75ul，在震荡器上混匀一分钟，置37℃恒温反应60分钟。 4.洗板：吸除板孔中的反应液，各孔加入洗液约400ul，静置20秒左右，除去其中液体。如此共洗五次,最后一遍将板中液体拍尽。或在吸除板孔中的反应液后，用洗板机洗板五次。 5.加底物：开启化学发光检测仪及主控制计算机，设定测定模式与参数。将微孔板置化学发光检测仪测定室，用加样器或内置加样器加底物，每孔50ul，加底物时应避免产生气泡。用内置加样器时，操作详见化学发光检测仪操作指南。 6.测定发光值：于加底物后的第10分钟测定各孔的发光值RLU。并将数据用化学发光检测仪定量软件进行定量分析，稀释标本应把测定值乘以稀释倍数。
【标准曲线拟和及定量方法】
根据各标准品测定的RLU，建立AFP浓度—RLU的回归方程，使用三次样条（Cubic Spline）或是双对数拟和方程，并绘制标准曲线。根据各样品RLU值，由定量软件直接计算转换成其相应的AFP含量。存入AFP文档资料，再输入至病人的检测报告单。
【实验成立条件】
每次实验的校准品曲线相关系数r≥0.9900(双对数)；检测由华美公司提供或是中检所提供的质控血清在以下范围内。 QCL: 17.5ng/ml-26.3ng/ml QCM: 48.8ng/ml-73.2ng/ml QCH: 124ng/ml-185ng/ml QCHH: 243ng/ml-364ng/ml
【性能特点】
1.检测范围 2.0-600.0ng/ml 2.检测限 2.0ng/ml 3.精密性 CV
【规格】
96人份
【包装】
96人份/包装盒
【保存及有效期】
1.保存条件：2℃-8℃ 2.效期：自检定合格之日起效期为6个月
【注意事项】
1.试剂启用后应尽快用完，不同批号试剂组分请勿混用。用时请将瓶内容物混匀。 2.免疫反应过程中，务必保持温度恒定准确，控制于37℃。 3.稀释浓缩洗液的去离子水应为新鲜制备的，用前应煮沸并冷却以灭活其中的磷酸酶。 4.以洗板机洗板时，每孔注液量不应少于400ul，洗板次数不应少于5次，浸泡时间不短于20秒，并注意检查加液头是否堵塞。 5.洗板时，勿用带纸屑的吸水材料，以防止磷酸酶与底物发生反应，影响检测结果的准确性。 6.加发光底物的加样器应准确，加样器头应为干净无污染的。在加发光物的过程中应避免加样器头与板孔或手指接触，以防止底物受到污染。加底物时速度应均匀，应在5min内完成加样；发光仪测定间隔时间的设置应与加底物的间隔时间保持一致。 7.临床样本均应视为有潜在传染性，请按传染疾病实验室检查规程操作。 8.每个实验室在长期实践中应建立自己的正常值范围。
【正常值参考范围】
【批准文号】
国药准字S20050003