第ｌ９卷．第４期
２ｏｏ光谱实验室Ｃｈｉ饨ｅ靶Ｊ锄ｍｄ主ｏ｝ｓ扯ｃｔｒｏｓｃｏ争，Ｉ抽０ｒｍｏｒ了ＶｏｌＮｏ．４００２年７月Ｊｕｌｙ２
快速测定植物叶片叶绿素含量方法的探讨
杨敏文①
（台州职业技术学院医学院浙Ⅱ省台州市高等教育园区３１８０００）
摘要
本文应用分光光度珐研究了３种提取溶剂对测定植物叶片叶绿素台量的影响，结果表明．用不同提
取溶剂提取叶绿素，提取液吸收光谱相似．其中丙酮一乙醇提取法速度快。叶绿素得率高、稳定性好．精密
度高．并提出了一种快速测定叶绿素含量的方法．
关键词叶绿素含量．测定，方法．叶片．
中图分类号：０６５７．３２文献标识码：Ａ文章编号：１００４—８１３８（２００２）０４－０４７８一０４
１前言
植物叶片叶绿紊含量与光合速率、营养状况等密切相关，实践上通常测定叶绿素含量以表征植
物生长状况，也往往把叶色变化作为看苗诊断和肥水管理的重要指标。叶绿素含量测定方法主要有分光光度法和活体叶绿素仪法两大类［“，最近又发展了光声光谱法“］。其中，应用最为广泛的是分光光度法。用得较多的是由Ｍａｃｋｉｎｎｅｙ“提出经Ａｒｎｏｎ…解释和推导的Ａｒｎｏｎ法以及８０年代初提出的乙醇提取法［“，本试验提出另一种提取溶剂——丙酮一乙醇混合法提取叶绿紊，以常规的Ａｍｏｎ法（提取溶剂为８０％丙酮）和乙醇提取法作对比，就３种提取液对测定植物叶片叶绿素台量的影响进行了研究比较，并提出了一种快速测定叶绿素含量的方法。
２实验部分
２．１仪器与试剂
ｕｖ２４０１Ｐｃ型紫外可见分光光度计（日本岛津，狭缝宽度ｏ．２ｎｍ，吸光池厚１ｃｍ），ＦｓＨ一Ⅱ高速
电动匀浆器（金坛望华科教仪器厂），ＦＡｌ００４Ａ型电子天平（上海精天电子仪器厂）。
将珊瑚树嫩叶用双蒸水洗净，吸水纸吸千表面水分，作为试验材料。叶绿素提取溶剂为：９５％丙
酮一乙醇（用体积比为２：１的丙酮一无水乙醇混合液配成９５％的水溶液，下同）、９５“乙醇和８０％丙酮，均为分析纯。
２．２实验方法
叶绿素的提取；将材料去脉剪碎（约ｌ一２ｍｍ见方），随机取样，准确称重取ｏ．５９（精确到
ｏ．１ｍｇ），放入５０ｍＬ比色管中，分别加入上述三种提取液２５ｍＬ；另称ｏ．５９样品，加６ｍＬ双蒸水和少量ｃａｃｏ。，匀浆，定容至２５ｍＬ，过滤，取２．ｚ５ｍＬ滤液放人５０ｍＬ比色管中，加ｚ３．７５ｍＩ。丙酮一乙①联系八．电话；（ｏｓ７６）５１５７１３Ｂ
作者简舟，橱敏文ｎ９６５一），女．浙扛省台州市人，高级讲师，华东师范大学２∞１年在职教育碰士，从事『七学教学与研究
收稿日期ｔ２００２一ｏｌ—ｏｌ－
第ｉ朝杨敏文：快速删定植物叶片叶绿素台量方珐的探讨
醇【２：１），使之成为９ｊ％丙酮一乙醇匀桨提取液。比色管加塞放置于２５ｃ生化培养箱内暗中提取叶
绿素。每种提取方法重复３次。
叶绿素提取液吸收光谱的测定：用分光光度计在６００一７００ｎｍ范围内对不同叶绿素提取液进
行扫描，波长精度为ｏ．２ｎｍ。
叶绿素含量测定：分别以提取溶剂作空白，测定叶绿素提取液吸光度“。。，１。。利用Ａｒｎ。ｎ公
式：
叶绿素Ⅱ浓度（ｍｇ／Ｉ。）：Ｃ一１２．７Ａｍ一２．６９ＡⅢ；
叶绿素６浓度（ｍｇ／Ｌ）：已一２ｚ．９—６。５—４，６８Ａ６６３；
叶绿素总浓度（ｍｇ／Ｌ）：ｃ。。一Ｃ＋（ｊ。
计算提取液中叶绿素浓度，换算为每克鲜叶叶绿素含量（ｍｇ／ｇ鲜重）。
３结果与讨论
３．１叶绿素提取液的吸收光谱
４种叶绿素提取液的吸收光谱在６００一
７００ｎｍ范围内基本相似（图１），说明４种叶绿
素提取液的光吸收性质基本相似，可以用
Ａｒｎｏｎ公式进行叶绿素含量的计算。
３．２不同提取溶荆对叶绿素提取总量的影响
不同提取溶剂对叶绿素提取总量有着明显
的ｇ；响（表１】，９５％丙酮一乙醇提取的叶绿素总
量最高，高于传统的８０％丙酮提取法２９．５％，被长』ｍｍ
９５％乙醇提取的叶绿素总量亦比８０％丙酮法
高９．５％。９５％丙酮乙醇提取叶片匀浆的叶绿图ｌ珊瑚树叶片叶绿素在不同提取液中的吸收觅洁
索电量与提取叶片碎片的叶绿素总量没有显著３—８０“丙酮；４ｊ＿一９５“酉酮一乙醇；？一％“乙醇；
９５蟛丙酮乙醇（匀浆１。
差异。
３．３不同提取溶剂提取叶绿素的进程
不同提取溶剂提取叶绿素速度差异较大，提取完全程度也不同（表１）。提取速度最快的是９ｊ％
丙酮乙醇，叶绿素经过８ｈ已经基本提取完全，叶片碎片变白；其次是９５％乙醇，而８０％丙酮提取
速度最慢，后两者在２４ｈ内没有完全提取出叶绿素。从提取速度来看．９５％丙酮一乙醇要优于９５％
乙醇和８０％丙酮。叶片匀浆后用９５％丙酮一乙醇在ｏ．５ｈ就已经提取完全，大大加快了叶绿素提取
速度。
表１不同提取溶剂提取叶绿素的进程和叶绿泵总量。ｐ括号内的数据为叶绿素相对含量．
光谱实验室第ｌ９卷
３．４不同提取液中叶绿素的稳定性
用不同提取溶剂提取珊瑚树叶片叶绿素，在２５ｃ生化培养箱中暗中放置ｏ、３、６天后测定提取
液中叶绿素含量，结果见表２。叶绿素提取液放置６天后，叶绿素ｎＴ降了ｊ．８％一１１．９％，叶绿素＾下降了２．７％一７．４％，叶绿素总量下降了４．９％一ｌｏ．ｊ％。这些都说明，在这些提取液中，叶绿素６比叶绿素ｎ稳定。叶绿素提取液中叶绿紊ｎ、叶绿素６的含量、稳定性与提取材料、提取液性质和提取液含水量有关“…。为了提高叶绿素提取液的稳定性．可通过降低提取液中的含水量来实现。但若昕用的材料是干粉，提取液中最好含有适量的水分，使叶绿素分子中亲水的基因易与蛋白质分离．利于叶绿素从类囊体膜中游离出来。有些学者曾采用比传统丙酮法含水量更低的丙酮提取液提取鲜叶叶绿素，效果较好”’…。本试验结果表明，叶绿素在不同提取液中稳定性的大小依次为：９ｊ％丙酮乙醇＞９５％乙醇＞８０％丙酮。
表２不同提取液中叶绿素的稳定性。
放西天数（ｍｇ／ｇ鲜重）８０％两酮叶绿素
。９５“丙酮乙醇９５“乙醇
。
ｍ
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。３∞５
ｊ卅
。
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、ｌ括号内的数据为叶绿素相对含量。”¨”
３．５精密度实验
９５％丙酮一乙醇提取效果好，提取速
度快，具有较高的精密度（表３）。
４表３不同提取方法的精密度“结论
分光光度法测定植物叶片叶绿素含
①５次重复量．由于所用提取溶剂不同，测定结果差
异显著。一种好的提取溶剂应该提取速度快，叶绿素得率高。稳定性好，测定结果精密度高．吸收光谱与传统丙酮法一致，能用Ａｒｎｏｎ公式计算叶绿素含量。本试验结果表明，９５％丙酮一乙醇法具有上述特点，是～种较好的叶绿素提取溶剂，而传统的８０％丙酮法和９５％乙醇法提取叶绿素速度慢，提取不完全，应慎用。叶片经匀浆后再用丙酮一乙醇提取，叶绿素得率与叶片浸泡法伯似，但大大提高了提取速度，这对于快速测定大量样品叶绿紊含量具有实际意义。
杨敏文ｚ快速测定植物叶片叶绿素含量方法的探’对————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————４８１第４期
参考文献
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ｍｅｔｈｏｄ．ｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｌｅａｖｅｓｗａｓａｒｅｓｔｕｄｉｅｄｂｙｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃＴｈｅｒｅｓｕｔｔｓｓｈｏｗｔｈａｔｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｓｐｅｃｔｒｕｍｓ
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‘光谱实验室，编辑部
快速测定植物叶片叶绿素含量方法的探讨
作者：
作者单位：
刊名：
英文刊名：
年，卷(期)：
被引用次数：杨敏文台州职业技术学院医学院,浙江省台州市高等教育园区,318000光谱实验室CHINESE JOURNAL OF SPECTROSCOPY LABORATORY2002，19(4)84次
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相似文献(10条)
1.期刊论文 曾建敏.姚恒.李天福.欧阳文韬.曹忠祥.Zeng Jianmin.Yao Heng.Li Tianfu.Ouyang Wentao.CaoZhongxiang 烤烟叶片叶绿素含量的测定及其与SPAD值的关系 -分子植物育种2009,7(1)
实时监测烤烟叶片叶绿素含量对植株氮素营养状况的跟踪和烟叶成熟的判断具有重要的指导作用.本实验选用两个烤烟品种K326和红花大金元
(HD),分别在移栽后的45 d和50 d,进行不同试剂叶绿素提取效果的比较研究;并在移栽后的50 d、67 d和68 d进行了叶片叶绿素含量与SPAD值的关系研究.研究结果表明,不同提取试剂对烤烟K326和红花大金元叶片叶绿素提取进程的影响差异显著.试剂A(将体积比为2:1的丙酮与无水乙醇混合液配制成95%的水溶液)提取的叶绿素总量明显比另外3种试剂的高,提取能力强,速度快,效率高,在浸提K326叶片2 h后,浸提液的叶绿素浓度是80%的丙酮提取的2倍多.试剂A维持叶K326叶片绿素的稳定性也比其它3种试剂好,其在浸提4 d后,总叶绿素含量比1 d的还高,而浸提7 d后则稍有下降;其它3种提取试剂在浸提4 d和7 d后,均比1 d后的低,特别是95%的乙醇和80%的丙酮,下降幅度为1.24%～4.82%左右,在HD中观察到的趋势相似.在K326品种移栽后的50 d(R2=0.799**)和67 d(R2=0.866 2**)以及红花大金元移栽后的68 d(R2=0.883 4**)中均发现,叶片叶绿素含量与SPAD值存在极显著的正相关.采用SPAD仪测定时,应选择全展开叶片的中部,于主脉两侧,分别读取3个读数,并将6个读数值平均代表这个叶片的SPAD值.
2.学位论文 聂继云 荧光法测定作物叶片中叶绿素含量的数学模型研究 1999
现有叶绿素浓度的荧光测定法均建立在线性基础上,所测浓度过低,通常为ppb级,最高不超过1mg/L,因而很难在作物叶片的叶绿素含量测定中得到广泛应用.为此,该文以水稻、小麦、玉米、棉花、芹菜、油菜、生菜、佛手和山定子等10种作物为试材,通过数理统计的方法,对通常浓度(mg/L)叶片提取溶液中叶绿素a、b浓度与F(618,673)、F(580,673)、F(540,673)、F(429,673)、F(408,673)和F(460,653)等6个荧光参数间的定量关系进行了研究.
3.学位论文 汪雪芳 油菜籽叶绿素测定方法研究及应用 2008
我国是世界油菜生产和消费大国，油菜为我国第一大植物油源，我国年均油菜面积和总产居世界首位。菜籽中的叶绿素含量高低直接影响菜籽油品质和加工成本，因此日益受到育种家及油脂加工行业的重视。日本、加拿大、澳大利亚等国已将油菜籽中叶绿素的含量作为油菜籽分等分级的重要技术依据。菜籽叶绿素含量高，高温高湿加工时形成脱镁叶绿素，一方面会使菜籽油色泽加深，呈墨绿色，影响菜籽油外观品质，加工过程中脱色脱嗅工艺越复杂，加工成本越高；另一方面它是一种光敏剂，能引发自由基反应，促进油脂氧化反应，导致油脂酸败变质，稳定性大为降低，极大缩短了产品货架期。因此研究建立适合我国国情并与国际接轨的油菜籽叶绿素测定技术具有重要的现实意义。
本文在对油菜籽中叶绿素的提取试剂、提取技术、检测仪器条件等进行了研究，建立了混合溶剂研磨提取，多波长分光光度法检测油菜籽叶绿素的方法，并利用所建立的方法，对2004-2006年全国油菜品质普查样品以及国外收集样品进行了叶绿素含量的测定，主要研究结果如下：
1.通过对油菜籽叶绿素提取方式，样品的研磨细度、提取试剂、提取方式、提取时间、提取温度等提取条件及提取过程中叶绿素稳定性的系统研究，建立了溶剂研磨-紫外可见光谱联用技术测定油菜籽中叶绿素含量的检测技术标准方法。即样品研磨细度40目后，石油醚+无水乙醇混合溶剂提取叶绿素，专用不锈钢制提取管加入研磨钢珠，水平摇床震荡提取1小时，中速定性滤纸滤，625nm、665nm、705nm分光光度计多波长测定吸光度值，计算叶绿素含量。在优化的实验条件下，叶绿素a的重现性(RSD)分别为1.62％，检出限(3d)为0.155mg/L，回收率为94.4～98.0％，本方法已经作为农业行业标准颁布：NY/T1287-2007《油菜籽中叶绿素含量的测定(光度法)》，为油菜籽中叶绿素含量测定的提供了科学的依据。
2.采用所建立的标准方法，对我国油菜主产区征集的120份油菜籽样品、加拿大、澳大利亚等油菜主产国征集的26油菜籽进行了检测，分析比较了我国不同种植区域、不同种皮颜色、国内外不同收获年份的油菜籽样品叶绿素含量，初步探明了油菜籽叶绿素含量分布与差异，冬油菜叶绿素含量
1～10mg/kg，明显低于春油菜叶绿素含量10～40mg/kg；品种的种皮颜色对叶绿素影响不大；而我国菜籽叶绿素含量明显低于加拿大、澳大利亚等国。本文还讨论了影响绿素含量测定的原因。
4.期刊论文 郭胜伟.高云东 比色法测定中华芦荟叶片中叶绿素含量方法的研究 -中医药学刊2004,22(1)
目的:采用分光光度法测定中华芦荟叶片中叶绿素含量,比较不同提取溶剂对结果的影响.方法:应用4种不同提取溶剂提取中华芦荟叶片中的叶绿素,以提取溶剂为空白,扫描测定叶绿素的吸收值,根据Amon公式计算含量.为了探讨各提取法测定中华芦荟叶绿素含量的可能性和科学性,本试验在前人研究的基础上,就不同的提取液对中华芦荟叶绿素含量的影响进行了比较.结果:不同提取溶剂提取叶绿素,提取液吸收光谱相似,其中以无水乙醇提取速度快,叶绿素得率高,稳定性好.结论:本法可以应用于叶绿素的含量测定.
植物叶片的叶绿素含量与其光合速率、营养状况等密切相关。实践上常用测定叶绿素含量的方法来检测植物的生长状况，也往往把叶色变化作为看苗诊断和肥水管理的重要指标。传统的叶绿素测定方法具有耗时长、环节多、操作复杂等问题。随着计算机技术和图像处理技术的发展，基于计算机视觉技术的叶绿素检测方法已成为植物叶绿素信息获取的新手段，该方法快捷、便利，具有无损伤和实时等特点。
本论文主要是设计了一个基于计算机视觉技术的叶绿素含量测定仪的软件系统，该系统能正确的测定农作物叶绿素的含量，并可最终用于指导生产实践，其测定的速度和精度都符合设计要求。
在设计的软件系统中，首先在对图像进行了滤波、放大等预处理后，采用了阈值分割技术和K—均值聚类分割技术，并在RGB色彩模型下对作物图像进行了分割。然后结合形态学和目标区提取等方面的相关知识，实现了对作物图像特征的提取与分析。最后结合C＃语言开发了一个交互性良好的樱花树叶叶绿素的测定软件，此项研究成果还能进行推广，用于其他作物叶绿素含量的测定。
6.期刊论文 李亚江.董雁 杨树新无性系叶绿素含量和光合速率的测定 -辽宁林业科技2002(6)
对选育出适宜辽北地区的耐寒、速生新无性系辽育1号、辽育2号与当地主栽品种昌图小钻杨在叶绿素含量和光合速率方面进行比较.分析测试结果表明,在同等光照以及外界条件下,辽育1号、辽育2号叶绿素含量和光合速率明显高于昌图小钻杨.通过生态测试,表明了新无性系辽育1号、辽育2号在生理、抗性以及物质能量积累方面均优于当地主栽品种昌图小钻杨.
7.期刊论文 徐芬芬.叶利民.徐卫红.郑静萍.XU Fen-fen.YE Li-min.XU Wei-hong.ZHENG Jing-ping 小白菜叶绿素含量的测定方法比较 -北方园艺2010(23)
以小白菜为试材,研究了5种提取方法对小白菜叶片叶绿素提取效果的影响,并测定叶绿素在5种不同提取液中的稳定性.结果表明:小白菜叶绿素提取效果最好的是混合液(乙醇∶丙酮=1∶1)浸提法,其次为混合液(乙醇∶丙酮∶水＝4.5∶4.5∶1)浸提法和混合液(乙醇∶丙酮=2∶1)浸提法,丙酮研磨法和乙醇浸提法效果较差.
8.期刊论文 陈小龙.陈灿.周莉.CHEN Xiao-long.CHEN Can.ZHOU Li 水稻不同生育期叶绿素含量的测定及其相关性分析 -现代农业科技2010(17)
监测水稻各生育期叶片中叶绿素含量对植株氮素营养状况的跟踪和农业生产科学施肥具有重要的指导作用.选用我国南方水稻区栽培常用的早、晚稻品种各3个品种(系),在水稻主要生育期(苗期、分蘖期、拔节期、孕穗期、抽穗期、灌浆期、蜡熟期、完熟期)分别采用活体法和离体法进行了剑叶叶绿素含量的测定,并对各生育期叶绿素含量的关系进行分析.研究表明,2种测定方法对水稻叶绿素含量的测定值在不同时期均呈现不同的差异,离体法测定的叶绿素舍量及活体法测定的叶绿素相对含量(SPAD值)最高值均分布在抽穗期、灌浆期,即生殖生长与营养生长交替时期;最低值出现在苗期、分蘖期.通过对早稻进行水稻叶绿素含量与SPAD值进行相关性分析,金优974的R2=0.8327**,湘早籼31号的R2=0.838 6**,沈农606的R2=0.705 7**,表明SPAD值与叶绿素含量之间的关系存在极显著相关.
9.学位论文 高大同 套袋对梨、苹果果实生长发育及性状影响的研究 2006
本文以落叶果树梨、苹果为研究对象，选取砀山酥梨、翠冠梨、嘎啦苹果为试材，果袋选用生产中果农经常使用的三层纸袋(外黄、中黑、内白)，双层纸袋(外黄、内黑)，单层黄色条纹纸袋，黄色塑膜袋四种果袋，以不套袋为对照，对套袋后果袋微环境、果实的生长发育、果皮叶绿素、果皮花青苷、果面锈斑、果实的外观品质与内在品质进行了系统地研究。
1.通过对套袋后不同果袋的透光率，及套袋后果袋内外的温度和湿度差的测定，研究了果袋微环境条件，结果表明：(1)三层袋与双层袋的透光率分别为0.004％、0.006％，数值接近为0，膜袋透光率最高，为86.9％；单层黄色条纹纸袋透光率为12.7％。(2)同一天中不同果袋内外温差的变化呈动态变化，一般白天袋内温度高于袋外温度，夜晚袋外温度高于袋内温度，一天中白天温度绝对差值大于夜晚。三层袋、双层袋的温差值要高于单层袋与塑膜袋。三层袋和双层袋的温差最大值多会出现在下午2：00左右，单层袋和塑膜袋温差最大值多出现在上午10：00左右。(3)一天中不同果袋内外湿度差的变化也呈动态变化，一般白天袋内湿度高于袋外湿度，夜晚袋外湿度高于袋内湿度，一天中白天的湿度绝对差值高于夜晚，三层袋与双层袋湿度差最大值多出现在下午4：00左右，单层袋与塑膜袋则出现在下午2：00左右，其中塑膜袋的内外湿度最大差值最大，三层纸袋内外湿度最大差值相对较小。
2.通过对不同套袋处理果实生长体积的测定，研究了果实的生长曲线与生长速度。结果表明：不同套袋处理并不能改变果实的生长曲线，各处理果实的生长曲线依然为双s型曲线，但相同测量时间段内果实体积的增加量不同，即不同处理果实生长速度不同，套塑膜袋果实生长速度最快，平均每15天果实体积增加量为40．9ml，套三层纸袋果实生长速度最慢，平均每15天果实体积增加量为31.6 ml，双层袋略低于三层袋，单层袋与对照(CK)相当。
3.通过测定套袋果实与不套袋果实在果柄环剥处理后十天内的体积增加量及果皮叶绿素平均含量，研究了果实套袋后不同时期在相同时间段内由于果皮色素减少对果实生长量的影响，结果表明：果实套袋后由于果皮叶绿素含量的减少，对果实生长量产生一定的影响，并且在果实生长后半期这种影响程度远远大于前半期，充分说明果皮叶绿素对果实本身的生长发育起到一定作用。
4.通过对不同套袋处理果皮叶绿素含量的测定，研究了套不同果袋后果皮叶绿素含量的变化规律，以及果皮叶绿素含量差异。结果表明：果皮叶绿素含量变化在整个果实生长发育过程中有一定规律性，套单层袋与塑膜袋果实中果皮叶绿素含量的变化规律与对照相似，而套三层袋与双层袋果皮叶绿素含量总体呈不断下降趋势，仅在7月底8月初有一个小的回升，然后继续下降。果实在套不同果袋处理后果皮叶绿素含量有明显差异，套双层袋含量最低，含量为0.013mg/g，远远低于对照的含量0.11 4mg/g，果皮呈黄白色；套塑膜袋含量接近对照值，含量为0.102mg/g，果皮呈绿色；套三层袋果皮叶绿素含量略高于双层袋，果皮仍呈黄白色，套单层袋果皮叶绿素含量值居中，果皮呈淡绿色。
5.通过定期对不同套袋处理果实果皮花青苷含量的测定，研究了套袋后果皮花青苷含量的变化规律及果实采收时果皮花青苷含量的差异。结果表明，套袋对果实发育过程中果皮花青苷含量的变化规律有一定影响，但影响不大。套单层袋与塑膜袋，果皮花青苷含量的变化规律与对照基本一致，对促进果实着色作用不大；套三层袋与双层袋则显著促进着色，在幼果期和果实采前除袋后对果皮花青苷的合成都有促进作用，在这两个时期果皮中的花青苷含量都明显高于对照(cK)。不同套袋处理在除袋后果皮花青苷含量有明显差异，套三层袋与双层袋的果实在除袋后花青苷合成快含量高，含量分别为
8.3U、8.65U，与对照相比差异显著；而套塑膜袋的果皮花青苷含量也高于对照；套单层袋的果实，果皮花青苷含量与对照相比差异不明显，对促进着色效果不理想。
6.通过对不同处理条件下翠冠梨锈斑指数的统计，研究了不同种类果袋以及不同套袋时期对果面锈斑形成及相关性状的影响。结果表明，在不同果袋处理中，套塑膜袋+双层袋锈斑指数最低，锈斑指数为41.4，效果最好；对照的锈斑指数最高，为89.2，各处理间均表现差异显著性。在套袋时期上，五月上旬套袋锈斑指数最低数值为37.0，五月下旬套袋锈斑指数最高为59.1。因此综合看在五月上旬(花后20-30天)套袋并且以套塑膜袋+双层袋来预防果锈为宜，套其它种类果袋或其它时期套袋都会不同程度地加重果面锈斑的形成。
7.通过对不同套袋处理条件下果实外观品质与内在品质相关性状的测定，研究了不同套袋处理对果实外观品质和内在品质的影响，结果表明，套三层与双层纸袋能显著改善果实的外观品质，尤其是能增加果实果皮花青含量，提高果实着色指数，减小果点大小、果皮厚度，增加果实表面光洁度，但一定程度上减少单果重；套单层袋与塑膜袋在提高果实外观品质方面相对于套三层、双层纸袋，效果不是太理想，但能起到防病、防虫、防污染的作用，套塑膜袋还能起到增大单果重的作用。对于果实内在品质，不同套袋处理也有一定影响，但影响大多不显著。套袋果的可溶性固形物含量、可溶性糖含量等性状均较对照有所降低，套袋果的酸含量除塑膜袋外均高于对照，果肉硬度，套袋果均低于对照，且差异不显著。
10.会议论文 戴荣继.佟斌.黄春.王蕾 高效液相色谱法测定饮用水中藻类叶绿素含量
高效液相色谱法是一种快速有效的分离方法,广泛地应用于医药、化工等领域的化合物分析.本文研究了高效液相色谱法分析叶绿素的方法.研究了超声波法提取叶绿素的方法和分析条件对分析结果的影响,采用荧光检测器来检测叶绿素.用该方法分析了密云水库的水样,得到了令人满意的结果,与荧光分析法的结果非常接近.
引证文献(84条)
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第ｌ９卷．第４期
２ｏｏ光谱实验室Ｃｈｉ饨ｅ靶Ｊ锄ｍｄ主ｏ｝ｓ扯ｃｔｒｏｓｃｏ争，Ｉ抽０ｒｍｏｒ了ＶｏｌＮｏ．４００２年７月Ｊｕｌｙ２
快速测定植物叶片叶绿素含量方法的探讨
杨敏文①
（台州职业技术学院医学院浙Ⅱ省台州市高等教育园区３１８０００）
摘要
本文应用分光光度珐研究了３种提取溶剂对测定植物叶片叶绿素台量的影响，结果表明．用不同提
取溶剂提取叶绿素，提取液吸收光谱相似．其中丙酮一乙醇提取法速度快。叶绿素得率高、稳定性好．精密
度高．并提出了一种快速测定叶绿素含量的方法．
关键词叶绿素含量．测定，方法．叶片．
中图分类号：０６５７．３２文献标识码：Ａ文章编号：１００４—８１３８（２００２）０４－０４７８一０４
１前言
植物叶片叶绿紊含量与光合速率、营养状况等密切相关，实践上通常测定叶绿素含量以表征植
物生长状况，也往往把叶色变化作为看苗诊断和肥水管理的重要指标。叶绿素含量测定方法主要有分光光度法和活体叶绿素仪法两大类［“，最近又发展了光声光谱法“］。其中，应用最为广泛的是分光光度法。用得较多的是由Ｍａｃｋｉｎｎｅｙ“提出经Ａｒｎｏｎ…解释和推导的Ａｒｎｏｎ法以及８０年代初提出的乙醇提取法［“，本试验提出另一种提取溶剂——丙酮一乙醇混合法提取叶绿紊，以常规的Ａｍｏｎ法（提取溶剂为８０％丙酮）和乙醇提取法作对比，就３种提取液对测定植物叶片叶绿素台量的影响进行了研究比较，并提出了一种快速测定叶绿素含量的方法。
２实验部分
２．１仪器与试剂
ｕｖ２４０１Ｐｃ型紫外可见分光光度计（日本岛津，狭缝宽度ｏ．２ｎｍ，吸光池厚１ｃｍ），ＦｓＨ一Ⅱ高速
电动匀浆器（金坛望华科教仪器厂），ＦＡｌ００４Ａ型电子天平（上海精天电子仪器厂）。
将珊瑚树嫩叶用双蒸水洗净，吸水纸吸千表面水分，作为试验材料。叶绿素提取溶剂为：９５％丙
酮一乙醇（用体积比为２：１的丙酮一无水乙醇混合液配成９５％的水溶液，下同）、９５“乙醇和８０％丙酮，均为分析纯。
２．２实验方法
叶绿素的提取；将材料去脉剪碎（约ｌ一２ｍｍ见方），随机取样，准确称重取ｏ．５９（精确到
ｏ．１ｍｇ），放入５０ｍＬ比色管中，分别加入上述三种提取液２５ｍＬ；另称ｏ．５９样品，加６ｍＬ双蒸水和少量ｃａｃｏ。，匀浆，定容至２５ｍＬ，过滤，取２．ｚ５ｍＬ滤液放人５０ｍＬ比色管中，加ｚ３．７５ｍＩ。丙酮一乙①联系八．电话；（ｏｓ７６）５１５７１３Ｂ
作者简舟，橱敏文ｎ９６５一），女．浙扛省台州市人，高级讲师，华东师范大学２∞１年在职教育碰士，从事『七学教学与研究
收稿日期ｔ２００２一ｏｌ—ｏｌ－
第ｉ朝杨敏文：快速删定植物叶片叶绿素台量方珐的探讨
醇【２：１），使之成为９ｊ％丙酮一乙醇匀桨提取液。比色管加塞放置于２５ｃ生化培养箱内暗中提取叶
绿素。每种提取方法重复３次。
叶绿素提取液吸收光谱的测定：用分光光度计在６００一７００ｎｍ范围内对不同叶绿素提取液进
行扫描，波长精度为ｏ．２ｎｍ。
叶绿素含量测定：分别以提取溶剂作空白，测定叶绿素提取液吸光度“。。，１。。利用Ａｒｎ。ｎ公
式：
叶绿素Ⅱ浓度（ｍｇ／Ｉ。）：Ｃ一１２．７Ａｍ一２．６９ＡⅢ；
叶绿素６浓度（ｍｇ／Ｌ）：已一２ｚ．９—６。５—４，６８Ａ６６３；
叶绿素总浓度（ｍｇ／Ｌ）：ｃ。。一Ｃ＋（ｊ。
计算提取液中叶绿素浓度，换算为每克鲜叶叶绿素含量（ｍｇ／ｇ鲜重）。
３结果与讨论
３．１叶绿素提取液的吸收光谱
４种叶绿素提取液的吸收光谱在６００一
７００ｎｍ范围内基本相似（图１），说明４种叶绿
素提取液的光吸收性质基本相似，可以用
Ａｒｎｏｎ公式进行叶绿素含量的计算。
３．２不同提取溶荆对叶绿素提取总量的影响
不同提取溶剂对叶绿素提取总量有着明显
的ｇ；响（表１】，９５％丙酮一乙醇提取的叶绿素总
量最高，高于传统的８０％丙酮提取法２９．５％，被长』ｍｍ
９５％乙醇提取的叶绿素总量亦比８０％丙酮法
高９．５％。９５％丙酮乙醇提取叶片匀浆的叶绿图ｌ珊瑚树叶片叶绿素在不同提取液中的吸收觅洁
索电量与提取叶片碎片的叶绿素总量没有显著３—８０“丙酮；４ｊ＿一９５“酉酮一乙醇；？一％“乙醇；
９５蟛丙酮乙醇（匀浆１。
差异。
３．３不同提取溶剂提取叶绿素的进程
不同提取溶剂提取叶绿素速度差异较大，提取完全程度也不同（表１）。提取速度最快的是９ｊ％
丙酮乙醇，叶绿素经过８ｈ已经基本提取完全，叶片碎片变白；其次是９５％乙醇，而８０％丙酮提取
速度最慢，后两者在２４ｈ内没有完全提取出叶绿素。从提取速度来看．９５％丙酮一乙醇要优于９５％
乙醇和８０％丙酮。叶片匀浆后用９５％丙酮一乙醇在ｏ．５ｈ就已经提取完全，大大加快了叶绿素提取
速度。
表１不同提取溶剂提取叶绿素的进程和叶绿泵总量。ｐ括号内的数据为叶绿素相对含量．
光谱实验室第ｌ９卷
３．４不同提取液中叶绿素的稳定性
用不同提取溶剂提取珊瑚树叶片叶绿素，在２５ｃ生化培养箱中暗中放置ｏ、３、６天后测定提取
液中叶绿素含量，结果见表２。叶绿素提取液放置６天后，叶绿素ｎＴ降了ｊ．８％一１１．９％，叶绿素＾下降了２．７％一７．４％，叶绿素总量下降了４．９％一ｌｏ．ｊ％。这些都说明，在这些提取液中，叶绿素６比叶绿素ｎ稳定。叶绿素提取液中叶绿紊ｎ、叶绿素６的含量、稳定性与提取材料、提取液性质和提取液含水量有关“…。为了提高叶绿素提取液的稳定性．可通过降低提取液中的含水量来实现。但若昕用的材料是干粉，提取液中最好含有适量的水分，使叶绿素分子中亲水的基因易与蛋白质分离．利于叶绿素从类囊体膜中游离出来。有些学者曾采用比传统丙酮法含水量更低的丙酮提取液提取鲜叶叶绿素，效果较好”’…。本试验结果表明，叶绿素在不同提取液中稳定性的大小依次为：９ｊ％丙酮乙醇＞９５％乙醇＞８０％丙酮。
表２不同提取液中叶绿素的稳定性。
放西天数（ｍｇ／ｇ鲜重）８０％两酮叶绿素
。９５“丙酮乙醇９５“乙醇
。
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、ｌ括号内的数据为叶绿素相对含量。”¨”
３．５精密度实验
９５％丙酮一乙醇提取效果好，提取速
度快，具有较高的精密度（表３）。
４表３不同提取方法的精密度“结论
分光光度法测定植物叶片叶绿素含
①５次重复量．由于所用提取溶剂不同，测定结果差
异显著。一种好的提取溶剂应该提取速度快，叶绿素得率高。稳定性好，测定结果精密度高．吸收光谱与传统丙酮法一致，能用Ａｒｎｏｎ公式计算叶绿素含量。本试验结果表明，９５％丙酮一乙醇法具有上述特点，是～种较好的叶绿素提取溶剂，而传统的８０％丙酮法和９５％乙醇法提取叶绿素速度慢，提取不完全，应慎用。叶片经匀浆后再用丙酮一乙醇提取，叶绿素得率与叶片浸泡法伯似，但大大提高了提取速度，这对于快速测定大量样品叶绿紊含量具有实际意义。
杨敏文ｚ快速测定植物叶片叶绿素含量方法的探’对————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————４８１第４期
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ＳｔｕｄｙｏｎＲａｐｉｄＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＣｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌＣｏｎｔｅｎｔｏｆＬｅａｖｅｓ
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‘光谱实验室，编辑部
快速测定植物叶片叶绿素含量方法的探讨
作者：
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年，卷(期)：
被引用次数：杨敏文台州职业技术学院医学院,浙江省台州市高等教育园区,318000光谱实验室CHINESE JOURNAL OF SPECTROSCOPY LABORATORY2002，19(4)84次
参考文献(9条)
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相似文献(10条)
1.期刊论文 曾建敏.姚恒.李天福.欧阳文韬.曹忠祥.Zeng Jianmin.Yao Heng.Li Tianfu.Ouyang Wentao.CaoZhongxiang 烤烟叶片叶绿素含量的测定及其与SPAD值的关系 -分子植物育种2009,7(1)
实时监测烤烟叶片叶绿素含量对植株氮素营养状况的跟踪和烟叶成熟的判断具有重要的指导作用.本实验选用两个烤烟品种K326和红花大金元
(HD),分别在移栽后的45 d和50 d,进行不同试剂叶绿素提取效果的比较研究;并在移栽后的50 d、67 d和68 d进行了叶片叶绿素含量与SPAD值的关系研究.研究结果表明,不同提取试剂对烤烟K326和红花大金元叶片叶绿素提取进程的影响差异显著.试剂A(将体积比为2:1的丙酮与无水乙醇混合液配制成95%的水溶液)提取的叶绿素总量明显比另外3种试剂的高,提取能力强,速度快,效率高,在浸提K326叶片2 h后,浸提液的叶绿素浓度是80%的丙酮提取的2倍多.试剂A维持叶K326叶片绿素的稳定性也比其它3种试剂好,其在浸提4 d后,总叶绿素含量比1 d的还高,而浸提7 d后则稍有下降;其它3种提取试剂在浸提4 d和7 d后,均比1 d后的低,特别是95%的乙醇和80%的丙酮,下降幅度为1.24%～4.82%左右,在HD中观察到的趋势相似.在K326品种移栽后的50 d(R2=0.799**)和67 d(R2=0.866 2**)以及红花大金元移栽后的68 d(R2=0.883 4**)中均发现,叶片叶绿素含量与SPAD值存在极显著的正相关.采用SPAD仪测定时,应选择全展开叶片的中部,于主脉两侧,分别读取3个读数,并将6个读数值平均代表这个叶片的SPAD值.
2.学位论文 聂继云 荧光法测定作物叶片中叶绿素含量的数学模型研究 1999
现有叶绿素浓度的荧光测定法均建立在线性基础上,所测浓度过低,通常为ppb级,最高不超过1mg/L,因而很难在作物叶片的叶绿素含量测定中得到广泛应用.为此,该文以水稻、小麦、玉米、棉花、芹菜、油菜、生菜、佛手和山定子等10种作物为试材,通过数理统计的方法,对通常浓度(mg/L)叶片提取溶液中叶绿素a、b浓度与F(618,673)、F(580,673)、F(540,673)、F(429,673)、F(408,673)和F(460,653)等6个荧光参数间的定量关系进行了研究.
3.学位论文 汪雪芳 油菜籽叶绿素测定方法研究及应用 2008
我国是世界油菜生产和消费大国，油菜为我国第一大植物油源，我国年均油菜面积和总产居世界首位。菜籽中的叶绿素含量高低直接影响菜籽油品质和加工成本，因此日益受到育种家及油脂加工行业的重视。日本、加拿大、澳大利亚等国已将油菜籽中叶绿素的含量作为油菜籽分等分级的重要技术依据。菜籽叶绿素含量高，高温高湿加工时形成脱镁叶绿素，一方面会使菜籽油色泽加深，呈墨绿色，影响菜籽油外观品质，加工过程中脱色脱嗅工艺越复杂，加工成本越高；另一方面它是一种光敏剂，能引发自由基反应，促进油脂氧化反应，导致油脂酸败变质，稳定性大为降低，极大缩短了产品货架期。因此研究建立适合我国国情并与国际接轨的油菜籽叶绿素测定技术具有重要的现实意义。
本文在对油菜籽中叶绿素的提取试剂、提取技术、检测仪器条件等进行了研究，建立了混合溶剂研磨提取，多波长分光光度法检测油菜籽叶绿素的方法，并利用所建立的方法，对2004-2006年全国油菜品质普查样品以及国外收集样品进行了叶绿素含量的测定，主要研究结果如下：
1.通过对油菜籽叶绿素提取方式，样品的研磨细度、提取试剂、提取方式、提取时间、提取温度等提取条件及提取过程中叶绿素稳定性的系统研究，建立了溶剂研磨-紫外可见光谱联用技术测定油菜籽中叶绿素含量的检测技术标准方法。即样品研磨细度40目后，石油醚+无水乙醇混合溶剂提取叶绿素，专用不锈钢制提取管加入研磨钢珠，水平摇床震荡提取1小时，中速定性滤纸滤，625nm、665nm、705nm分光光度计多波长测定吸光度值，计算叶绿素含量。在优化的实验条件下，叶绿素a的重现性(RSD)分别为1.62％，检出限(3d)为0.155mg/L，回收率为94.4～98.0％，本方法已经作为农业行业标准颁布：NY/T1287-2007《油菜籽中叶绿素含量的测定(光度法)》，为油菜籽中叶绿素含量测定的提供了科学的依据。
2.采用所建立的标准方法，对我国油菜主产区征集的120份油菜籽样品、加拿大、澳大利亚等油菜主产国征集的26油菜籽进行了检测，分析比较了我国不同种植区域、不同种皮颜色、国内外不同收获年份的油菜籽样品叶绿素含量，初步探明了油菜籽叶绿素含量分布与差异，冬油菜叶绿素含量
1～10mg/kg，明显低于春油菜叶绿素含量10～40mg/kg；品种的种皮颜色对叶绿素影响不大；而我国菜籽叶绿素含量明显低于加拿大、澳大利亚等国。本文还讨论了影响绿素含量测定的原因。
4.期刊论文 郭胜伟.高云东 比色法测定中华芦荟叶片中叶绿素含量方法的研究 -中医药学刊2004,22(1)
目的:采用分光光度法测定中华芦荟叶片中叶绿素含量,比较不同提取溶剂对结果的影响.方法:应用4种不同提取溶剂提取中华芦荟叶片中的叶绿素,以提取溶剂为空白,扫描测定叶绿素的吸收值,根据Amon公式计算含量.为了探讨各提取法测定中华芦荟叶绿素含量的可能性和科学性,本试验在前人研究的基础上,就不同的提取液对中华芦荟叶绿素含量的影响进行了比较.结果:不同提取溶剂提取叶绿素,提取液吸收光谱相似,其中以无水乙醇提取速度快,叶绿素得率高,稳定性好.结论:本法可以应用于叶绿素的含量测定.
植物叶片的叶绿素含量与其光合速率、营养状况等密切相关。实践上常用测定叶绿素含量的方法来检测植物的生长状况，也往往把叶色变化作为看苗诊断和肥水管理的重要指标。传统的叶绿素测定方法具有耗时长、环节多、操作复杂等问题。随着计算机技术和图像处理技术的发展，基于计算机视觉技术的叶绿素检测方法已成为植物叶绿素信息获取的新手段，该方法快捷、便利，具有无损伤和实时等特点。
本论文主要是设计了一个基于计算机视觉技术的叶绿素含量测定仪的软件系统，该系统能正确的测定农作物叶绿素的含量，并可最终用于指导生产实践，其测定的速度和精度都符合设计要求。
在设计的软件系统中，首先在对图像进行了滤波、放大等预处理后，采用了阈值分割技术和K—均值聚类分割技术，并在RGB色彩模型下对作物图像进行了分割。然后结合形态学和目标区提取等方面的相关知识，实现了对作物图像特征的提取与分析。最后结合C＃语言开发了一个交互性良好的樱花树叶叶绿素的测定软件，此项研究成果还能进行推广，用于其他作物叶绿素含量的测定。
6.期刊论文 李亚江.董雁 杨树新无性系叶绿素含量和光合速率的测定 -辽宁林业科技2002(6)
对选育出适宜辽北地区的耐寒、速生新无性系辽育1号、辽育2号与当地主栽品种昌图小钻杨在叶绿素含量和光合速率方面进行比较.分析测试结果表明,在同等光照以及外界条件下,辽育1号、辽育2号叶绿素含量和光合速率明显高于昌图小钻杨.通过生态测试,表明了新无性系辽育1号、辽育2号在生理、抗性以及物质能量积累方面均优于当地主栽品种昌图小钻杨.
7.期刊论文 徐芬芬.叶利民.徐卫红.郑静萍.XU Fen-fen.YE Li-min.XU Wei-hong.ZHENG Jing-ping 小白菜叶绿素含量的测定方法比较 -北方园艺2010(23)
以小白菜为试材,研究了5种提取方法对小白菜叶片叶绿素提取效果的影响,并测定叶绿素在5种不同提取液中的稳定性.结果表明:小白菜叶绿素提取效果最好的是混合液(乙醇∶丙酮=1∶1)浸提法,其次为混合液(乙醇∶丙酮∶水＝4.5∶4.5∶1)浸提法和混合液(乙醇∶丙酮=2∶1)浸提法,丙酮研磨法和乙醇浸提法效果较差.
8.期刊论文 陈小龙.陈灿.周莉.CHEN Xiao-long.CHEN Can.ZHOU Li 水稻不同生育期叶绿素含量的测定及其相关性分析 -现代农业科技2010(17)
监测水稻各生育期叶片中叶绿素含量对植株氮素营养状况的跟踪和农业生产科学施肥具有重要的指导作用.选用我国南方水稻区栽培常用的早、晚稻品种各3个品种(系),在水稻主要生育期(苗期、分蘖期、拔节期、孕穗期、抽穗期、灌浆期、蜡熟期、完熟期)分别采用活体法和离体法进行了剑叶叶绿素含量的测定,并对各生育期叶绿素含量的关系进行分析.研究表明,2种测定方法对水稻叶绿素含量的测定值在不同时期均呈现不同的差异,离体法测定的叶绿素舍量及活体法测定的叶绿素相对含量(SPAD值)最高值均分布在抽穗期、灌浆期,即生殖生长与营养生长交替时期;最低值出现在苗期、分蘖期.通过对早稻进行水稻叶绿素含量与SPAD值进行相关性分析,金优974的R2=0.8327**,湘早籼31号的R2=0.838 6**,沈农606的R2=0.705 7**,表明SPAD值与叶绿素含量之间的关系存在极显著相关.
9.学位论文 高大同 套袋对梨、苹果果实生长发育及性状影响的研究 2006
本文以落叶果树梨、苹果为研究对象，选取砀山酥梨、翠冠梨、嘎啦苹果为试材，果袋选用生产中果农经常使用的三层纸袋(外黄、中黑、内白)，双层纸袋(外黄、内黑)，单层黄色条纹纸袋，黄色塑膜袋四种果袋，以不套袋为对照，对套袋后果袋微环境、果实的生长发育、果皮叶绿素、果皮花青苷、果面锈斑、果实的外观品质与内在品质进行了系统地研究。
1.通过对套袋后不同果袋的透光率，及套袋后果袋内外的温度和湿度差的测定，研究了果袋微环境条件，结果表明：(1)三层袋与双层袋的透光率分别为0.004％、0.006％，数值接近为0，膜袋透光率最高，为86.9％；单层黄色条纹纸袋透光率为12.7％。(2)同一天中不同果袋内外温差的变化呈动态变化，一般白天袋内温度高于袋外温度，夜晚袋外温度高于袋内温度，一天中白天温度绝对差值大于夜晚。三层袋、双层袋的温差值要高于单层袋与塑膜袋。三层袋和双层袋的温差最大值多会出现在下午2：00左右，单层袋和塑膜袋温差最大值多出现在上午10：00左右。(3)一天中不同果袋内外湿度差的变化也呈动态变化，一般白天袋内湿度高于袋外湿度，夜晚袋外湿度高于袋内湿度，一天中白天的湿度绝对差值高于夜晚，三层袋与双层袋湿度差最大值多出现在下午4：00左右，单层袋与塑膜袋则出现在下午2：00左右，其中塑膜袋的内外湿度最大差值最大，三层纸袋内外湿度最大差值相对较小。
2.通过对不同套袋处理果实生长体积的测定，研究了果实的生长曲线与生长速度。结果表明：不同套袋处理并不能改变果实的生长曲线，各处理果实的生长曲线依然为双s型曲线，但相同测量时间段内果实体积的增加量不同，即不同处理果实生长速度不同，套塑膜袋果实生长速度最快，平均每15天果实体积增加量为40．9ml，套三层纸袋果实生长速度最慢，平均每15天果实体积增加量为31.6 ml，双层袋略低于三层袋，单层袋与对照(CK)相当。
3.通过测定套袋果实与不套袋果实在果柄环剥处理后十天内的体积增加量及果皮叶绿素平均含量，研究了果实套袋后不同时期在相同时间段内由于果皮色素减少对果实生长量的影响，结果表明：果实套袋后由于果皮叶绿素含量的减少，对果实生长量产生一定的影响，并且在果实生长后半期这种影响程度远远大于前半期，充分说明果皮叶绿素对果实本身的生长发育起到一定作用。
4.通过对不同套袋处理果皮叶绿素含量的测定，研究了套不同果袋后果皮叶绿素含量的变化规律，以及果皮叶绿素含量差异。结果表明：果皮叶绿素含量变化在整个果实生长发育过程中有一定规律性，套单层袋与塑膜袋果实中果皮叶绿素含量的变化规律与对照相似，而套三层袋与双层袋果皮叶绿素含量总体呈不断下降趋势，仅在7月底8月初有一个小的回升，然后继续下降。果实在套不同果袋处理后果皮叶绿素含量有明显差异，套双层袋含量最低，含量为0.013mg/g，远远低于对照的含量0.11 4mg/g，果皮呈黄白色；套塑膜袋含量接近对照值，含量为0.102mg/g，果皮呈绿色；套三层袋果皮叶绿素含量略高于双层袋，果皮仍呈黄白色，套单层袋果皮叶绿素含量值居中，果皮呈淡绿色。
5.通过定期对不同套袋处理果实果皮花青苷含量的测定，研究了套袋后果皮花青苷含量的变化规律及果实采收时果皮花青苷含量的差异。结果表明，套袋对果实发育过程中果皮花青苷含量的变化规律有一定影响，但影响不大。套单层袋与塑膜袋，果皮花青苷含量的变化规律与对照基本一致，对促进果实着色作用不大；套三层袋与双层袋则显著促进着色，在幼果期和果实采前除袋后对果皮花青苷的合成都有促进作用，在这两个时期果皮中的花青苷含量都明显高于对照(cK)。不同套袋处理在除袋后果皮花青苷含量有明显差异，套三层袋与双层袋的果实在除袋后花青苷合成快含量高，含量分别为
8.3U、8.65U，与对照相比差异显著；而套塑膜袋的果皮花青苷含量也高于对照；套单层袋的果实，果皮花青苷含量与对照相比差异不明显，对促进着色效果不理想。
6.通过对不同处理条件下翠冠梨锈斑指数的统计，研究了不同种类果袋以及不同套袋时期对果面锈斑形成及相关性状的影响。结果表明，在不同果袋处理中，套塑膜袋+双层袋锈斑指数最低，锈斑指数为41.4，效果最好；对照的锈斑指数最高，为89.2，各处理间均表现差异显著性。在套袋时期上，五月上旬套袋锈斑指数最低数值为37.0，五月下旬套袋锈斑指数最高为59.1。因此综合看在五月上旬(花后20-30天)套袋并且以套塑膜袋+双层袋来预防果锈为宜，套其它种类果袋或其它时期套袋都会不同程度地加重果面锈斑的形成。
7.通过对不同套袋处理条件下果实外观品质与内在品质相关性状的测定，研究了不同套袋处理对果实外观品质和内在品质的影响，结果表明，套三层与双层纸袋能显著改善果实的外观品质，尤其是能增加果实果皮花青含量，提高果实着色指数，减小果点大小、果皮厚度，增加果实表面光洁度，但一定程度上减少单果重；套单层袋与塑膜袋在提高果实外观品质方面相对于套三层、双层纸袋，效果不是太理想，但能起到防病、防虫、防污染的作用，套塑膜袋还能起到增大单果重的作用。对于果实内在品质，不同套袋处理也有一定影响，但影响大多不显著。套袋果的可溶性固形物含量、可溶性糖含量等性状均较对照有所降低，套袋果的酸含量除塑膜袋外均高于对照，果肉硬度，套袋果均低于对照，且差异不显著。
10.会议论文 戴荣继.佟斌.黄春.王蕾 高效液相色谱法测定饮用水中藻类叶绿素含量
高效液相色谱法是一种快速有效的分离方法,广泛地应用于医药、化工等领域的化合物分析.本文研究了高效液相色谱法分析叶绿素的方法.研究了超声波法提取叶绿素的方法和分析条件对分析结果的影响,采用荧光检测器来检测叶绿素.用该方法分析了密云水库的水样,得到了令人满意的结果,与荧光分析法的结果非常接近.
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下载时间：2011年6月19日