・
２８・
黑龙江 药医ｔ ｅｔ ｉｌｏ ｎ ￣ ｉ ｎａ ｇ Ｍ ｅｄｉ ｉｃｎ ｅ Ｊ ｏｕ ｒｎ ａｌ ｏ Ｖ ． １２６ Ｎ ．ｏ ６ ２ ０１ ３
连
续 硅胶 柱谱色法快 速 纯化 紫杉醇 李丽丽
周；启超， 曦晓孙 ， 姚欢欢 ， 叶， 柳杨 ，磊 祖元 刚
哈尔 滨 ５ １０４ ００ ）
东 林 业 北 学大生 物 资源 生 态利用 国 地家 联 合方 程工 验实室 （黑 龙江
摘
要
采用连续中 压硅胶 柱谱色 法化紫杉纯。优醇化 的工 艺条 为件 ：以 中压玻 璃为柱色 谱 柱，１ ２—０ ６ １０ 岬
层
析硅片 吏为 填 料 ｌ，％ 紫 杉醇负 载量 为２ ｇ ／ Ｏｌ ｇＯ硅 ， 胶品二样 氯甲 烷溶上解 ， 二氯样甲烷： 乙 （腈 ７： ） ３脱，洗洗 脱速流 为 ６ ０
ｍｌ Ｊ ｍ ｎ ｉ一次。柱 谱过程色 即可 得纯到 大于 ９ 度ｏ ％杉 紫醇， 回率收７ ５ ％ 以 上， 醇甲： 水３ ： ｌ （ｖ ｖ／ ） 重晶后结 得度纯 ９ ９ ％ 杉紫醇产，品低 纯组 度作 为分析原层再次料化。使 用纯 后的析层柱用 氯二甲烷 ：乙腈 （ １ ： １ ）再生， 二 甲氯烷平衡， 平衡后 的层 柱析重使复 ，用 使 用５ 柱次 离分率效不仍降 。与低传统 方相 法溶比剂 用量少 层、填析料 价低格、生产周 期
短 、 分离果效好 ， 易 实于现连 工业续化 清 生 产 。 洁
关键词 ： 紫 醇杉 柱 色； ；谱 纯化
中图 分 类 号： ２Ｒ８ ４ ．２ 文献标识 ：码 Ａ 章文编号： １ ０ ６—２ ０８８ ２ 【 ２０ １ ３ ） ０ １ —０ ２— ８０ ４
Ｓ ｕ ｃ ｃ ｓｅ ｓｉ ｖ ｅ Ｐ ｕ ｒ ｉ ｆｉ ａｃｔ ｉ ｎ ｏ ｏ ｆ Ｐ ａ ｃ ｉ ｌｔａ ｘ ｅｌ ｙｂ Ｃ ｏ ｌ ｍｎｕ ｈ Ｃ ｒ ｍｏａ ｔ ｏｇ ｒ ｐａ ｈ ｙ
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Ｂｉ ｏ ｒｅ ｓ ｏ ｕ ｒ ｃ ｅＥ ｃｏ— ｔ ｉＵ ｉ ｌ ａｚ ｉｔｏ ｎ， ｏ Ｎｒｔ ｈ ｅ ａ ｓｔＦ ｒｏ ｓｅ ｔｒ ｙ
Ｕ ｎｉ ｖ ｒ ｓｅｉ ｔ ｙ （Ｈａｒ ｂ ｉ ｎ Ｈ，ｅ ｉｌ ｏ ｒ ｔ ｇ］ｉ ａ ｎ ｇ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ， １ａ５ ０ ０ ４０
）Ａｂｓ ｔ ａｒ ｃ ｔ： Ａｍ ｅｔ ｈ ｄ ｏｉ ｓ ｄ ｅ ｓ ｃｉｂ ｒ ｅｄ ｆ ｏｒ ｓｕ ｃｃｅ ｓｓｉ ｖ ｅ ｐ ｕ ｉｒｉ ｆ ａｃｔ ｉ ｏｎ ｏｆ ｐ ａｃ ｌ ｉ ａｔ ｅ ｌｘ ｂｙ ｍ ｄｅ ｉ ｕｍ — ｐ ｒ ｓｅ ｕｓ ｒｅ ｓ ｉ ｌ ｉ ａ ｃ ｅ ｇ ｌ
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ｌｅｉ ｔ ｘ ｅａ ｌ ａｗｓ ｏｖ ｅ ｒ ７５ ％ ｔｒ ｏｕｈｇ ｈ ｏｌｌ ｅ ｉｓ ｌ ｃｉ ａ ｅｇｌ ｃ ｈｒ ｏ ａｍｔ ｏ ｇ ａ ｒｐ ｉ ｃ ｈ ｃ ｈ ｏ ｍｌ ． ｎａ ｎ ｄ ｈｔ ｅ ｐ ｉｕ ｒ ｙ ｔｏｆ ｐ ａｃ ｌｉ ｔａｘ ｌ ｅＷ ｓａ ９ ９％ ａｆｔ ｒ ｅ ｃ ｒ ｓｙｔ ａｌ ｌ ｉ ｚａ ｔ ｉ ｎｏ
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豆红杉我是国 稀 珍植 ， 物含 有多种 紫烷 杉类化 物 。 合 紫醇 杉（ｐ ａｃｌ ｉ ｔ ｍ ｅ ｌ ｘ 商，品名 Ｔ ａ ｘ １ｏ） 最 是 从 太平 洋 红 豆 杉
（ ａ ｘ Ｔｕ ｓ ｂｒｅ ｉｖｆ ｌｏｉ ａ ） 茎 皮 中 分 得离到 的一 种具有 独 特 抗 癌 作 用
昂贵。因 此 ，简化紫杉 醇的 化 工纯艺 降，成本低紫是 杉醇 市场
的技术 键 关。
紫 杉纯醇工化多为液液萃取 艺 、树法 脂、膜分 法离和 色柱谱法等 溶。萃剂取常法 于紫杉用醇的 粗提阶段ｊ 。日 本学 对者紫杉醇 的取溶剂提类进行 比较种 ， 乙酸乙以 酯 丙 ：
的二
萜化合类物 』 紫杉。 醇前目 床临应用 对 巢 癌、卵 宫 子
癌、 乳腺癌 、
癌 、 头颈肺部、 软组癌 织等 癌十 种几癌具有症很 好 疗效的 Ｊ 。。 目前， 杉醇紫主要 是 红从 豆杉属植 的茎物
和针叶。皮『 分１离获得， 含量仅 为０ ． ０ １ ％ 一 ０ ｏ，６ ％左右 ， 同时
（酮１ ： １ ） 混 溶合提剂取果最效好 ， 礼徐 等 桑用 采醇甲 一 二
氯
甲烷 （ ９ ５ ： ５）作为萃取 剂溶液。液取萃程 的过终产 端物纯
度不高 ， 且 有机溶消剂量 耗，大产生 水会废环境造成污对 。染
又
有种多类物共存 。 分离纯似化十 分困 ，难导致
紫杉造价醇
基
项 金目 ： 箍公性行 业 研专科 （ ２项０ １ ２０４ ６ １０ ）资
助
者作介简 ：李丽 丽（１ ９ ７８）一， 女 汉族（） ， 黑 龙佳江木 ，斯硕士研 究 ，生 从事天然 产物提取 离分应 和用研究 工作 。 ： ｛ ： 通讯者 ：作祖元 （刚１ ９ ５ 一） ， 胃４（汉 族） ， 椿吉镇赉 ，县教授 ， 博 士， 博士 生导师 ，植 化学物植物 和研 药发 Ｅ，ｍ— ａ ｉ ：ｌ ｙ ｚ ｇ ｄ ＠ ｏ
１ ２ ６．ｃ ｏｎ 。ｒ
黑 龙
江医药Ｈ ｅｉ ｌ ｏ ｎ ｇ ｊ ａｉｎ ｇ Ｍｅ ｉ ｄｃｉ ｎ ｅ Ｊｏ ｕ ｎ ｒ ａ ｌＶ ｏ １ ．２ ６ Ｎ ｏ． ６ ０ ２ ３１
元英 【 ｌ进 人等采 用 多 树种 脂对东北 豆 红杉 提 物取 进行 纯
，化表 明苯聚乙烯强碱型树 脂（ ｓＰ Ａ— 及多 乙）烯 多 胺环氧一
・ ９２・
采用
ＨＰ Ｌ Ｃ 紫对杉进醇分行 ，析 测检长为波 ２ ７２ ｎ ｍ， 动流相 水： 腈 （ ６乙 ０： ４ ０ Ｖ／ ） ，Ｖ 流 速 １ ｍ Ｌ ／ｍ ｉ ｎ 进，量样ｌ ０ Ｌ 。
氯丙
烷 缩聚型弱树碱脂（ Ｐ ｃ —Ａ ）对二氯 甲烷粗提 物 的吸 及脱附性色能较好 ； 学杨峰 等采 Ｐ用Ｓ ｐ ６一大 孔脂从 树南 云红豆 树杉皮及东红北豆杉叶针粗提物 中分 离紫醇杉 半及 合前体 ，成取得 好较果效， 但 产物 纯度远低 于９ ０％ 树脂 ，法目 前 般仅一作为纯化过程 的 间步骤中。Ｃ ａｒ ｖ ｅ ｒ 等人 用 超滤 膜 反渗透膜对 紫杉和烷 类行进 离 分，结 果使 紫杉烷 类 质 物 浓度 提的 高５ 左倍 ；右Ｋ ｅ ｅ ｈ ｕ ｔ ｍＬ ｌ 人 用 等 ０ ． ２ １ａ， ｒｎ 的龙 膜尼 和Ｐ Ｖ Ｄ 膜Ｆ处理 紫醇杉的织培养液组 ，时 现发龙膜截尼 了留 几 所乎 的 １有 Ｏ一去乙酰基 杉紫醇 、 紫杉 以醇及 大部绝分 三尖杉的宁碱 ， 其对他 的 杉紫烷 类 几 没 乎有截 留 用作， 而 Ｐ Ｖ ＦＤ则截 膜留了有所 的杉烷类紫 ， 说明龙膜尼可 择性 选的 附紫吸杉类烷 尽 。在 管论理上讲 ， 有 选 的从膜择 上洗脱 紫 杉 烷是 可类 行 的 ，他们未但获得成 功 ， 有待将尼 龙 膜一进步 化学修 饰 ，实以 分现离 化纯紫 杉 类烷 混合物 的 目 。标综上 所述 ，前液目液取萃 和脂树 仅法能 作为 紫杉醇 纯化过 程 的一
准 标曲线法 定 量分 析。 准 曲线 标： ＝Ｙ ４７７ ９ ３ ６ １６ ．１ ４ ８７ｘ ＋ ８ ０ ３ ０ ． ４ ６ ２ ２ ７， Ｒ ＝０ ２ ９ ． ９ ９８ 说 明紫，杉 醇 ０在． ０ ０４— ． １ ０ ５２ ｍＳ ／ ｍ
Ｌ
内线性 系 良好 关 。
２ ２．硅 胶色谱柱 化纯
２ ． ２
．１ 色柱谱 制备 称 取定一量硅 ，胶 二用氯 烷甲分散 后匀浆湿法装 柱 ，放
置至填料
充分沉 降， 二 氯烷甲 以定一流速洗淋至柱平直衡 。
２ ． ２．２ 柱 析层纯化
取称 定一 的 １量． ２ ５ ％杉紫醇样 品 少 量二， 氯 烷甲溶解
后， 除不溶物滤 ，柱塞式剂溶 进液 ，泵洗脱 剂洗 脱， 洗 脱 后的
流 分段分收集 Ｔ ， ＣＬ 和ＨＰ Ｌ Ｃ 检测， 并 合压 减浓 缩回洗脱收
并浓缩剂至 干 低， 度组 分作纯 层 析为原料 再 次纯 化。效有 成分经 Ｈ ＰＬＣ检识全部流 出后 ，用 氯甲烷 二 ：乙 腈 （ ：ＩＩ ， ｖ ／ｖ ） 生 ，再 二氯烷甲 平 衡 再，上样 次， 反使复 。用
２
． ３ 紫杉 的醇结 晶 重依 照献 ， 文采 甲醇用： （水 ： ３ ， Ｉ ｖ ／ ）ｖ重 结 晶将柱。层
析纯后大度于 ９ｏ ％ 的杉紫 组分醇 合并压 浓缩后减 干的品 ， 按８ ｍ Ｌ ／ｇ的 例溶比于甲醇 中 ， 浴 水加热 到 Ｏ５ ℃，同 在时搅
分部， 膜技术 处于理仅研 究论阶 段 ，纯 高紫杉度 的分醇离
色谱纯化紫 杉柱 的醇法 又方分 两为 ， 类即十烷 基键
八柱
谱色法仍 主流技为术段 。
／ ３甲手醇 体积 的去 子水 离， 慢缓 冷却 至合硅胶相柱反谱法和色胶正硅 色相 法谱反相。色 法谱料 填下拌缓缓的 滴入 １ ４ ， ℃ ４８ ｈ得后紫到 醇针杉 状结晶 过 ， ，滤 ４ ￣ Ｃ５真干 燥得 紫空 昂贵 ， 设 备投资大 ， 单 位柱程过 离 量分 小 ，工业级 分离有 逐 渐被相正色法取谱 代趋势 的。目传 统前正相 柱谱纯 化紫色 杉 醇 产 品 。 杉 醇技的术首为采用先液液萃或树 取脂将法紫 杉醇 粗纯 化品至 ４１ ０ ～作为％柱上料 ， 有原溶机剂 解 溶， 胶硅拌样 ， 样拌
胶上硅于头 柱，至少经 ２ ３—次柱色谱 过 程分 别以丙酮 石一
３ 结 果 与 讨论
３．１ 洗脱 剂极的性影 响
参考 紫杉柱醇层析 用常洗脱剂 ， 分 用二别 甲烷氯 ：乙
＝ ７ 腈： ２（ａ ） 二氯、 甲 烷 乙腈 ：＝ ７： ３ （ｂ ）、 己烷 环： 乙 乙酯酸 ＝３ ： ２ （ｃ 、） 氯 ：仿 酸乙乙酯 ＝２ ３ （： ） ｄ为洗脱剂作洗 ，脱结 果如 图 ：ｌ
醚 、 油乙乙酯 酸一己烷、 氯仿 一异丙 醇 洗为脱 剂，收 集含 紫 杉 大醇于９ ０ ％ 组 分， 回收洗 脱后经 重结 晶得 到紫剂 醇纯 品。填料杉胶硅柱 从卸下后或 高温灼中烧 再生或 作废为弃料
置 。
者笔将 １ ％右紫杉 左粗 品醇经 不任再处 理何 接直采 中用
压硅胶色柱谱 分法纯化离紫杉醇 ， 以 二 甲烷溶 解 氯ｌ 紫％
醇杉粗品直接 上 样 ，氯甲烷二 乙一腈为 脱 洗 ，剂一 便可将 紫次醇的纯杉 度提到 高 ｏ ９％，重 晶后 结度 纯可达 ９９ ％。硅 胶二用氯 烷 甲一乙 腈（ １： １ ） 在线再 ， 二生 氯烷甲 平 ， 衡胶硅柱
重复使 用。艺简工单 ，实用 性强 ，适紫合杉醇的模生规。 产
１ 验实材 料 与仪
器袅
ｂ
ｅ
ｄ
巍爱
鹦紫醇粗 品，杉 度 １纯 ． ２ ５％， 江海浙 正业药份股有公司 限提 供 ； 照对紫杉品醇 Ｓ ， ｇ ｍｉａ公 司产品 ， 度纯＞９ ９；％ 层析 硅胶 （ ２１ ０— １ ０ ６ ）购 青 于岛 海洋 化有 限工 司；公色 谱纯 乙 腈 购于，Ｊ ＆ Ｋ ＨＣ ＭＩ Ｅ ＡＣ司 ，公 色谱分 析二 用重次蒸 馏水自 制 其。余剂试均国为产工业 级。 Ｗ ｔａｅ ｒｓ 高效液相 色 仪谱，包括 １ ５ ２ ５型泵， ７１ ７ ｐ ｕ ｌｓ 型 自 进样器动， ２４ ８７双型 波长 紫外检 器 测， 色柱谱为Ｈ ｐｙ ｅ ｍ ｌ ｉ Ｄ ＳＯ（ ２ ０５ ｍ × ｍ４ ６． ｍ ｍ ，５ ｇ ， ） ； Ｒｍ ２００ ２ｋ 旋 转发蒸仪（ 海申上 胜
生物技有术公限司 ）； Ｓ Ｈ Ｂ １ 一 １ 循Ｉ 环水 多式用 真空泵 （ 郑
图 １ 不 同 洗脱 剂 对 紫杉 醇 分 离 效 果 的 影响
由图１可以 看 ，出由于 仿氯 ：酸乙酯乙 ＝２： ３ （ ｄ） 极的性
太大， 紫 杉醇的 分离果效最差； 环己烷 ： 乙酸 酯乙 ３＝ ：２ （ ｃ） ，
于洗由剂脱性太小极 ，紫杉在醇 上柱的 死吸附 便增 量大 ，导 回致收率的低降； 二 甲氯烷： 乙 ＝腈７ ：２ ａ （ ）二 氯和甲烷 乙 ： 腈 ７＝： ３ ｂ（ ）杉紫醇 纯 度均 可的达 ０ ９ ％上 ， 但 以的ａ收回率 明显 低于 ｂ， 所 以们 选择我 氯二 烷 甲 ：腈乙 ＝ ７ ：３为 紫作杉 醇分 离洗的剂 脱。 ３ ． ２径 高 的影比 响 ’
长城州工科有贸 限司公） ，玻 璃层 柱析（ 根 据 文 献 ‘ Ｊ 自制 ，
柱长 ｌ２ ０ ０ ｍ ｉ ｌｌ 内，径８ ０ ｍｍ ， 压耐１ ０ Ｍ Ｐ ａ ）；２ Ｊ— Ｘ１ ６／ １ ５柱 塞
样上量持 维２ｇ ／ １０ ０ ｇ胶硅， 考察 高 径的比 影响， 结果 如 图 ２所。 由图 ２示以看 出可，当径 高 比 １ ：８降 低 到 １ ４：时 ，
得获纯的度＞ ９０ 的％杉醇紫 占量 总脱量洗百 分比 ７由 ％７下
式 计 量剂泵溶 （杭之州江科 学器厂 仪） 。
２ 验 实 方法
降
２ １到％， 变化非常 大 虽。 径高 然
比由１ ： 继续增８ 大到１ ：
１ Ｏ 时， 得 的获 纯 ＞度 ０９％ 的 杉醇量 占紫洗总脱量 百 比也 分
２ ． １
分析方法
３・ ・ Ｏ
黑龙 江医 药Ｈｅ ｉ ｌ ｏｎ ｇ ｊｉａ ｎ ｇ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃｉｎ ｅ Ｊ ｏｕ ｎ ａｒ ｌＶ ｏ １ ．２ ６ Ｎ ｏ ．６ ２ ０１ ３
＞ ９０ 紫杉％醇占紫杉醇 量总的 ７７ ． ９６％。１ ％杉紫醇原 和
柱色料谱产 ＨＰ Ｌ物Ｃ谱 见图 ６ ａ和 ｂ
＾ 矗 。） Ｉ． 尊 鞋譬照 鬟＝苦撼 蟹 ２ ０ ０
０ ８ ０ ６０ ４ ０
２ ＯＯ
增大 ，
但 紫 杉在 柱醇上的 死吸附 也增加较 多， 收回率 降低，
速 流 减 。因慢此 ，我们择径高 选 １ 比 ： 。
８
０ 嚷
翟蔫
５
ｌ
０
１
５
Ｏ２
５ ２
３ Ｏ
瓶 号
图 ２
径高 对 比 离分效 果 的 影 响
５ 紫 图 醇 杉洗脱 曲 线
３． ３ 载负 的确量
定３ ． ６验实证结果 按验上 优述工化艺条件， 向二氯经 烷甲 ：乙腈 （ ： １ １ ）再、生
负
载量小过 ，附剂 吸能 未充 利用 ，分柱效 率低 ； 负 载 量 过大又
会造成色谱柱的量超过 ， 影响载分 效离果 。此 因， 必
二氯 甲烷平后衡的层 析进柱 行 复重上样 次 ５，进行验 证
实验 ，结果 表见 。１由表 ｌ可 ：知５ 次试 所验 得到 度纯大 于
须
择选一个合 适负的 载。保量其 持 他件不 条 ， 变改 变负 量， 结果如载图 ３ 示所。１ 紫杉醇％载量负在 ｌ 一４ ｇ １ ０／０ ｇ 胶 硅范围 内 ，随负载着量 增加的， 纯 度＞９ｏ ％ 杉醇紫的回收率 先
升后上降下 ，在２ ｇ／１ ０ ０ｇ 硅 胶达处最大值。到因此负量载选 择２
ｓ ／ｌＯ Ｏ ｇ 硅 胶
嚣。 ） ＿ 凝
９ 谜 ｏ％紫醇杉 品产收率回达 ７均 ％左５ ， 经右线 再在平 衡生后
层析柱重的复使用 果效好较 。 １ 表证验验试 结果
Ｉ
２
３
｛
３
． ７ 重结 晶
Ｉ
ｌ 触ｎ翱：
强 ‘ ｃ ｌ， 嘲
∞收集
度纯 ＞９ｏ ％ 的紫 杉醇， 甲醇用 ：水 ３ ：１（ ｖ ／ ｖ 重结）
３图 １ 紫杉％醇负载对分 离量效 的影响果 ３
４． 速流 影的 响
晶，结 晶得 到的白针色状 物 Ｈ，Ｐ Ｌ Ｃ检测 ，结 果如 ６ 图ｃ ，纯度 ＞
９９％ 。
分
别控制 流 速 ３ ０ Ｌｍ／ ｍ ｉ ｎ、 ６ ０ ｍＬ ／ｍ ｉ ｎ、 ０ ９ ｍ Ｌ ｍ／ ｎｉ和
１ ２ ０
ｍ ｌ Ｊ ｍ ｉ ｎ， 察 考同流 速对不 杉紫醇分 效果 的影 离响。结
见果图 。随４着速流的
增加 ，纯 ＞度９ ０％紫 杉醇 的回 率收
逐渐低 ，降但 速流过低导致柱层析周 会期长 过 ，所以 选择 流 速
６０ Ｌｍ／ｗｉ ｎ 。
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ａ １ 紫杉醇％： ｂ 色柱 谱化纯 产物 ；ｃ重结晶 后 紫杉醇品纯
图６ 纯 化 过 程ＰＨＬ Ｃ 谱４ 结 论
藏建Ｌ ，ｌ ｉ
硅胶
柱谱色法 纯化 紫杉醇 的优化 工艺条 件为 以 ：压中
图４流 对速离效分果影的响 ３ ． ５ 洗 曲线 脱
璃玻柱为色柱 谱 １ ２，０ １— ０ ６ 层 析ｍ硅胶为填 料 ， 紫杉 醇 粗二品氯烷溶解 后甲， 滤 除溶 物不， 塞式柱溶剂 泵进 ， 二氯液 甲 ：烷 乙 腈（ ：７ ３） 洗 ， 洗脱 脱流为 速 ０６ｍ Ｌ／ ｍｉ ， １ ｎ％紫杉醇负 量载为２ ｇ １ ０／０ ｇ 硅胶 ， 洗后 脱流分的段收分集 ，ＴＬ 和Ｃ Ｈ ＬＰＣ 检 测 合并减，浓压缩回洗脱收剂 并浓 缩干 至，低 度纯分作组 层析为原料再次纯化。一次柱 色 过程谱 即可得 纯到度大于
０９ ％杉醇 ，紫回收 率７５ ％ 以 上， 醇 ： 水３ 甲 １： ｖ ／（ ｖ） 重 结晶后
依据上述化条件优 ，硅胶 柱谱分离色 化紫杉醇 ， 并用纯 细 口瓶分收段集 每瓶 ，２ ０ ００ ｍ Ｌ ， Ｈ ＬＰＣ 测 检 ， 脱 曲线洗如 图 ５可。 看 出，以 从六瓶开始第有紫杉醇 ，但含量比较 低 主， 为一些要性 小极的 杂 质 从第 ；瓶 开 ８始 ，紫 杉醇 量 含逐 渐增 加 ，第 １ ２ 瓶 时紫杉 醇就到 达 ９ ％０ 上以； 从第 １ ８ 开始 瓶， 一 和些杉醇紫极 相性 的杂近开 质始随 着紫 杉醇被 洗 下脱 ， 来一
得度 ９ ９ 纯紫杉％醇产品。 使 后 用的析柱 用二层 氯烷 ： 甲 乙腈 （】 ： １） 再 生 二氯，甲烷 衡 平 ，衡后的层平柱析复使用重， 使 用 ５次分离柱率仍不效降 低该工艺。程简 流单 、 效高 ， 合
直适第到 ２５ 瓶， 紫杉洗醇脱全 。完并台第８—１ 】 、 ｌ ８２～５
瓶
作为料继原续上柱。紫杉醇总 收率回９ ５ ． ６７ ％ ，获得纯的度
黑
江 龙医药 Ｈ ｅｉ ｌ ｎｏ ｇ ｊｉ ａ ｎ ｇ Ｍｅｄ ｃｉ ｎ ｅ ｉＪ ｕ ｎ ｏ ｒｌａ ｏ Ｖ１ ２ ． ６ ｏＮ ． ６ ２ ０ １
３
３・１・
Ｅ
Ｇ Ｃ Ｇ及其 衍 生 物 抗病的 作毒用研 进 展
刘究华帅 ，李 春英 ， 李朝 ， 德刘曼， 昆明施 ， 春赵建
ａ ５ ４ｏ ０ ｏ）
北林业东大学 森林 物植生 学教 态育部重 实验 点室 （哈 尔滨
要摘
表
没子食茶素没儿子食酸￣ （ Ｅ Ｇ Ｃ ） Ｇ 作为 叶茶中重最要的活 性组，分具 抗有化氧 抗、、 抗病癌、毒清除 自由
基等
多种生 理 性活现。 广已泛应的 于医用保药健、 食 品添 加等领域 。剂文综述 了 Ｅ 本ＧＣ Ｇ 其及衍生物抗病毒 的活性。
键词关 ：Ｅ ＧＣ Ｇ；衍 生，物 病毒
抗图分中号 ：类Ｒ ２ ８ ５ 文献 识码标： Ａ 文 章 号编 ：１０ ０ ６— ２８ ８ ２ （ ２０ ３１） Ｏ —１０ ３ １ — ３ ０
ｅ Ｒｓｅ ａ ｃ ｈ Ｐ ｒ ｏｒｇ ｅ ｓｒ ｓｉ ｎ ｔｈ Ｅ ｅｆ ｆ ｅｃ ｔ ｏ ｆ Ａｎ ｔ ｉ ｖｉ ｒ ｕ ｓ ｏ ｆ Ｅ ＣＧＧ ａｎ ｄ ｉ ｔｓ Ｄｅ ｒｉ ｖ ｔ ａｉｖ ｅｓ Ｌ
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茶酚多是叶中的茶一活类成分 性，茶多 酚又 以茶素类 儿
成分
主体为。 表没子食儿茶没食 素酸子酯 Ｅ （Ｇ ＧＣ ， ）儿茶 是
基项金 目 ：央中 高校 本科研基 务业 费项专金资（ Ｄ Ｌ １２Ｅ ０Ａ １ — ０ ４ ）、国家自然 科学金 基（３ １ ２００ ７ ４ ８ 和） 黑龙江博 省士后科研 动
启（ 金 ＬＢＨ —Ｑ １ １ ７ １ ７） 助资．
作
者简 介 ：帅刘华 １ ９（ ８ 一６ ，） ，女硕士研 究 ，生植 物 分成性活作 研 用究。
通讯
作 ： 者春赵建 （１ ９ ７一７）， ，男副 授教 ，博士 ，主要从 事药用物 的研 植与究 发开。 —Ｅｍ ａｉ ｌ： ｚ ｃ ｊｓｊ ＠ ｙ Ｊａｌ ０ ｏ ｃ．ｏ ．ｍ ｃｎ
紫杉 的醇规生产 模。
参 文考献
［ １ Ｗａ ］ ｎ ｉ Ｃ， Ｍ Ｔ ａｙ ｌ ｏ ｒ ＨＬ ，Ｗａｌ ｌ Ｍ ， Ｅｅｔ ａ １ ．Ｔ ｈ ｅｉ ｓｏ ａｌｉ ｔｏ ｎ ａｎ ｄ ｔｓｕｃ ｒ ｔ ｕ ｒ
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效率的
抽 方出法 Ｐ ［］．日 本专利 ６：— １ ５７ ３ ２ ９ １ ，９ ９ ４ ０ ６ ０ ３ ． ［ ］７ 徐 礼桑 刘爱， 茹 ．Ｈ ＬＰＣ法 定测 南方 红豆杉中 紫杉的含醇萤 ［ Ｊ ．］ 学学报 ， 药１ ９９ １ ，２ ６ ７ ） （： ５ ３７．
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初
步讨探［ Ｊ］ 离子．交换与 附 吸 １ ， ９ ４ ，９ １ ０ （ ６） ：５ ３ ４． ［ ９ 杨雪峰］ ， 开刘录 ． 备制液相 谱色法离提 分紫取醇及杉类其 似 物 Ｐ［ ］中．专利 ：国ｌ １４ ０ １７ ０Ａ， ９ ９ ７ １ ．
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２ ］Ｗ ｏｏ Ｈ Ｌ ，Ｓ ｗ ｅ ｎｅ ｒ ｔｏ ｎ ＤＫ， Ｈ ｏ ｓｋ ｉｎ ｓ Ｐ Ｊ． Ｔ ｘａｏ ｌ ｉｓ ａｃ ￣ｖ ｅ ｎ ｉ ｐ ｌ ｎａ ｔ ｎ ｉｕ ｍ ｅ ｓｒ ｓ ｉ ｔａ ｎ ｔ ｅ ｎ ｄ ｏ ｅ ｔ ｍｒ ｉ ａ ｌａ ｓ ｅ ｎ ｏｃ ａｒ ｅ ｉ ｎｏ ｍ ［ ａ ］Ｊ． Ａｎ ｎ ＣＪｌ ｉｎ ｎ ｃ ｏ Ｏｌ， １ ９９ ６ ， １ ９ （
３） ２： ９ ０．
３［］ Ｊ ｎ ｅ ｓ ｏＷＢ Ｓ， ｈｃｎ ｅ ｄｉｅ ｒ Ｊ Ｓ ，ｈ ａ ｐｉ ｒ ｏ Ｆ ， 以 Ｔ ｒ ｅａ ｔ ｅ ｎ ｍｔ ｏ ｆ ｅ ｒ ｓ ｉｓ ａ ｎ ｔｔ ｇ ｅ ｓ — ａｔｔ ｏ ｎ ｉａ ｌ ｃｈｏ ｌ ｆｏ ｅ ａ ｅ ｒ ｉｎ ｏ ｍａ ｉ ｔ ｗｈ Ｔ ａ ｘ ｏｌ ： Ａ ｒ ｅ ｐ ｎｏ ｏ ｆ ｔ ｗ ｏ ｅ ａ ｓ ｅ ［ｓ ］ Ｊ
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１ ９ ４９．
￣ ｒｖｎ ｅ ｌ Ｏ ｎ ｃ ￣ｏ ｌ，１ ９ ９ ， ６６１ （ １ ） １ ２：６ ．
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Ｃ ｈ ｏｒｍ ａｔ ｏ ｒｇ ，１ ９ ５９， １ ８（ ） ：６ １ ９０ ．３
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９１９ ６ １ ２， ２ （４ ）： ２ ４ １．
１ ２ ［］ 斯霍特曼 泰Ｋ， 马 顿 Ａ斯， 霍泰特曼斯 Ｍ ． 备制谱色技术 ［
Ｍ］
．
北京
： 学科 出版 ， 社 ０ ０２０： １０ —１６ １ ９ ．
５ ［ 韩金］玉 ，剑肖， 王华 ， 等紫．醇杉的提 取纯 技术化 ［ ｊ］ ．中草
， 药２ ０ ００ ３，１ （ １ ０ ） ： ８ ９—７ ７ ２９．
［ １ ］３ 肖国 勇， 炳林 昌 ，子马都 从．北东 豆红枝叶中杉提取紫 醇杉 的过程分 析 Ｊ ］［． 鞍钢山学院铁报学， １ ９ ９ ， ９２ （２２ 一 １ ） ： １５ １ ７． 收稿
日期 ： ２ １０２ １ ——０１ ５
［
６ ］ 锅怎助 田， 田崎之弘， 部洋史江， 等 ． 年 夕 ｌ７一 Ｌ ， 类， 有含
二 ／
・
２８・
黑龙江 药医ｔ ｅｔ ｉｌｏ ｎ ￣ ｉ ｎａ ｇ Ｍ ｅｄｉ ｉｃｎ ｅ Ｊ ｏｕ ｒｎ ａｌ ｏ Ｖ ． １２６ Ｎ ．ｏ ６ ２ ０１ ３
连
续 硅胶 柱谱色法快 速 纯化 紫杉醇 李丽丽
周；启超， 曦晓孙 ， 姚欢欢 ， 叶， 柳杨 ，磊 祖元 刚
哈尔 滨 ５ １０４ ００ ）
东 林 业 北 学大生 物 资源 生 态利用 国 地家 联 合方 程工 验实室 （黑 龙江
摘
要
采用连续中 压硅胶 柱谱色 法化紫杉纯。优醇化 的工 艺条 为件 ：以 中压玻 璃为柱色 谱 柱，１ ２—０ ６ １０ 岬
层
析硅片 吏为 填 料 ｌ，％ 紫 杉醇负 载量 为２ ｇ ／ Ｏｌ ｇＯ硅 ， 胶品二样 氯甲 烷溶上解 ， 二氯样甲烷： 乙 （腈 ７： ） ３脱，洗洗 脱速流 为 ６ ０
ｍｌ Ｊ ｍ ｎ ｉ一次。柱 谱过程色 即可 得纯到 大于 ９ 度ｏ ％杉 紫醇， 回率收７ ５ ％ 以 上， 醇甲： 水３ ： ｌ （ｖ ｖ／ ） 重晶后结 得度纯 ９ ９ ％ 杉紫醇产，品低 纯组 度作 为分析原层再次料化。使 用纯 后的析层柱用 氯二甲烷 ：乙腈 （ １ ： １ ）再生， 二 甲氯烷平衡， 平衡后 的层 柱析重使复 ，用 使 用５ 柱次 离分率效不仍降 。与低传统 方相 法溶比剂 用量少 层、填析料 价低格、生产周 期
短 、 分离果效好 ， 易 实于现连 工业续化 清 生 产 。 洁
关键词 ： 紫 醇杉 柱 色； ；谱 纯化
中图 分 类 号： ２Ｒ８ ４ ．２ 文献标识 ：码 Ａ 章文编号： １ ０ ６—２ ０８８ ２ 【 ２０ １ ３ ） ０ １ —０ ２— ８０ ４
Ｓ ｕ ｃ ｃ ｓｅ ｓｉ ｖ ｅ Ｐ ｕ ｒ ｉ ｆｉ ａｃｔ ｉ ｎ ｏ ｏ ｆ Ｐ ａ ｃ ｉ ｌｔａ ｘ ｅｌ ｙｂ Ｃ ｏ ｌ ｍｎｕ ｈ Ｃ ｒ ｍｏａ ｔ ｏｇ ｒ ｐａ ｈ ｙ
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Ｕ ｎｉ ｖ ｒ ｓｅｉ ｔ ｙ （Ｈａｒ ｂ ｉ ｎ Ｈ，ｅ ｉｌ ｏ ｒ ｔ ｇ］ｉ ａ ｎ ｇ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ， １ａ５ ０ ０ ４０
）Ａｂｓ ｔ ａｒ ｃ ｔ： Ａｍ ｅｔ ｈ ｄ ｏｉ ｓ ｄ ｅ ｓ ｃｉｂ ｒ ｅｄ ｆ ｏｒ ｓｕ ｃｃｅ ｓｓｉ ｖ ｅ ｐ ｕ ｉｒｉ ｆ ａｃｔ ｉ ｏｎ ｏｆ ｐ ａｃ ｌ ｉ ａｔ ｅ ｌｘ ｂｙ ｍ ｄｅ ｉ ｕｍ — ｐ ｒ ｓｅ ｕｓ ｒｅ ｓ ｉ ｌ ｉ ａ ｃ ｅ ｇ ｌ
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豆红杉我是国 稀 珍植 ， 物含 有多种 紫烷 杉类化 物 。 合 紫醇 杉（ｐ ａｃｌ ｉ ｔ ｍ ｅ ｌ ｘ 商，品名 Ｔ ａ ｘ １ｏ） 最 是 从 太平 洋 红 豆 杉
（ ａ ｘ Ｔｕ ｓ ｂｒｅ ｉｖｆ ｌｏｉ ａ ） 茎 皮 中 分 得离到 的一 种具有 独 特 抗 癌 作 用
昂贵。因 此 ，简化紫杉 醇的 化 工纯艺 降，成本低紫是 杉醇 市场
的技术 键 关。
紫 杉纯醇工化多为液液萃取 艺 、树法 脂、膜分 法离和 色柱谱法等 溶。萃剂取常法 于紫杉用醇的 粗提阶段ｊ 。日 本学 对者紫杉醇 的取溶剂提类进行 比较种 ， 乙酸乙以 酯 丙 ：
的二
萜化合类物 』 紫杉。 醇前目 床临应用 对 巢 癌、卵 宫 子
癌、 乳腺癌 、
癌 、 头颈肺部、 软组癌 织等 癌十 种几癌具有症很 好 疗效的 Ｊ 。。 目前， 杉醇紫主要 是 红从 豆杉属植 的茎物
和针叶。皮『 分１离获得， 含量仅 为０ ． ０ １ ％ 一 ０ ｏ，６ ％左右 ， 同时
（酮１ ： １ ） 混 溶合提剂取果最效好 ， 礼徐 等 桑用 采醇甲 一 二
氯
甲烷 （ ９ ５ ： ５）作为萃取 剂溶液。液取萃程 的过终产 端物纯
度不高 ， 且 有机溶消剂量 耗，大产生 水会废环境造成污对 。染
又
有种多类物共存 。 分离纯似化十 分困 ，难导致
紫杉造价醇
基
项 金目 ： 箍公性行 业 研专科 （ ２项０ １ ２０４ ６ １０ ）资
助
者作介简 ：李丽 丽（１ ９ ７８）一， 女 汉族（） ， 黑 龙佳江木 ，斯硕士研 究 ，生 从事天然 产物提取 离分应 和用研究 工作 。 ： ｛ ： 通讯者 ：作祖元 （刚１ ９ ５ 一） ， 胃４（汉 族） ， 椿吉镇赉 ，县教授 ， 博 士， 博士 生导师 ，植 化学物植物 和研 药发 Ｅ，ｍ— ａ ｉ ：ｌ ｙ ｚ ｇ ｄ ＠ ｏ
１ ２ ６．ｃ ｏｎ 。ｒ
黑 龙
江医药Ｈ ｅｉ ｌ ｏ ｎ ｇ ｊ ａｉｎ ｇ Ｍｅ ｉ ｄｃｉ ｎ ｅ Ｊｏ ｕ ｎ ｒ ａ ｌＶ ｏ １ ．２ ６ Ｎ ｏ． ６ ０ ２ ３１
元英 【 ｌ进 人等采 用 多 树种 脂对东北 豆 红杉 提 物取 进行 纯
，化表 明苯聚乙烯强碱型树 脂（ ｓＰ Ａ— 及多 乙）烯 多 胺环氧一
・ ９２・
采用
ＨＰ Ｌ Ｃ 紫对杉进醇分行 ，析 测检长为波 ２ ７２ ｎ ｍ， 动流相 水： 腈 （ ６乙 ０： ４ ０ Ｖ／ ） ，Ｖ 流 速 １ ｍ Ｌ ／ｍ ｉ ｎ 进，量样ｌ ０ Ｌ 。
氯丙
烷 缩聚型弱树碱脂（ Ｐ ｃ —Ａ ）对二氯 甲烷粗提 物 的吸 及脱附性色能较好 ； 学杨峰 等采 Ｐ用Ｓ ｐ ６一大 孔脂从 树南 云红豆 树杉皮及东红北豆杉叶针粗提物 中分 离紫醇杉 半及 合前体 ，成取得 好较果效， 但 产物 纯度远低 于９ ０％ 树脂 ，法目 前 般仅一作为纯化过程 的 间步骤中。Ｃ ａｒ ｖ ｅ ｒ 等人 用 超滤 膜 反渗透膜对 紫杉和烷 类行进 离 分，结 果使 紫杉烷 类 质 物 浓度 提的 高５ 左倍 ；右Ｋ ｅ ｅ ｈ ｕ ｔ ｍＬ ｌ 人 用 等 ０ ． ２ １ａ， ｒｎ 的龙 膜尼 和Ｐ Ｖ Ｄ 膜Ｆ处理 紫醇杉的织培养液组 ，时 现发龙膜截尼 了留 几 所乎 的 １有 Ｏ一去乙酰基 杉紫醇 、 紫杉 以醇及 大部绝分 三尖杉的宁碱 ， 其对他 的 杉紫烷 类 几 没 乎有截 留 用作， 而 Ｐ Ｖ ＦＤ则截 膜留了有所 的杉烷类紫 ， 说明龙膜尼可 择性 选的 附紫吸杉类烷 尽 。在 管论理上讲 ， 有 选 的从膜择 上洗脱 紫 杉 烷是 可类 行 的 ，他们未但获得成 功 ， 有待将尼 龙 膜一进步 化学修 饰 ，实以 分现离 化纯紫 杉 类烷 混合物 的 目 。标综上 所述 ，前液目液取萃 和脂树 仅法能 作为 紫杉醇 纯化过 程 的一
准 标曲线法 定 量分 析。 准 曲线 标： ＝Ｙ ４７７ ９ ３ ６ １６ ．１ ４ ８７ｘ ＋ ８ ０ ３ ０ ． ４ ６ ２ ２ ７， Ｒ ＝０ ２ ９ ． ９ ９８ 说 明紫，杉 醇 ０在． ０ ０４— ． １ ０ ５２ ｍＳ ／ ｍ
Ｌ
内线性 系 良好 关 。
２ ２．硅 胶色谱柱 化纯
２ ． ２
．１ 色柱谱 制备 称 取定一量硅 ，胶 二用氯 烷甲分散 后匀浆湿法装 柱 ，放
置至填料
充分沉 降， 二 氯烷甲 以定一流速洗淋至柱平直衡 。
２ ． ２．２ 柱 析层纯化
取称 定一 的 １量． ２ ５ ％杉紫醇样 品 少 量二， 氯 烷甲溶解
后， 除不溶物滤 ，柱塞式剂溶 进液 ，泵洗脱 剂洗 脱， 洗 脱 后的
流 分段分收集 Ｔ ， ＣＬ 和ＨＰ Ｌ Ｃ 检测， 并 合压 减浓 缩回洗脱收
并浓缩剂至 干 低， 度组 分作纯 层 析为原料 再 次纯 化。效有 成分经 Ｈ ＰＬＣ检识全部流 出后 ，用 氯甲烷 二 ：乙 腈 （ ：ＩＩ ， ｖ ／ｖ ） 生 ，再 二氯烷甲 平 衡 再，上样 次， 反使复 。用
２
． ３ 紫杉 的醇结 晶 重依 照献 ， 文采 甲醇用： （水 ： ３ ， Ｉ ｖ ／ ）ｖ重 结 晶将柱。层
析纯后大度于 ９ｏ ％ 的杉紫 组分醇 合并压 浓缩后减 干的品 ， 按８ ｍ Ｌ ／ｇ的 例溶比于甲醇 中 ， 浴 水加热 到 Ｏ５ ℃，同 在时搅
分部， 膜技术 处于理仅研 究论阶 段 ，纯 高紫杉度 的分醇离
色谱纯化紫 杉柱 的醇法 又方分 两为 ， 类即十烷 基键
八柱
谱色法仍 主流技为术段 。
／ ３甲手醇 体积 的去 子水 离， 慢缓 冷却 至合硅胶相柱反谱法和色胶正硅 色相 法谱反相。色 法谱料 填下拌缓缓的 滴入 １ ４ ， ℃ ４８ ｈ得后紫到 醇针杉 状结晶 过 ， ，滤 ４ ￣ Ｃ５真干 燥得 紫空 昂贵 ， 设 备投资大 ， 单 位柱程过 离 量分 小 ，工业级 分离有 逐 渐被相正色法取谱 代趋势 的。目传 统前正相 柱谱纯 化紫色 杉 醇 产 品 。 杉 醇技的术首为采用先液液萃或树 取脂将法紫 杉醇 粗纯 化品至 ４１ ０ ～作为％柱上料 ， 有原溶机剂 解 溶， 胶硅拌样 ， 样拌
胶上硅于头 柱，至少经 ２ ３—次柱色谱 过 程分 别以丙酮 石一
３ 结 果 与 讨论
３．１ 洗脱 剂极的性影 响
参考 紫杉柱醇层析 用常洗脱剂 ， 分 用二别 甲烷氯 ：乙
＝ ７ 腈： ２（ａ ） 二氯、 甲 烷 乙腈 ：＝ ７： ３ （ｂ ）、 己烷 环： 乙 乙酯酸 ＝３ ： ２ （ｃ 、） 氯 ：仿 酸乙乙酯 ＝２ ３ （： ） ｄ为洗脱剂作洗 ，脱结 果如 图 ：ｌ
醚 、 油乙乙酯 酸一己烷、 氯仿 一异丙 醇 洗为脱 剂，收 集含 紫 杉 大醇于９ ０ ％ 组 分， 回收洗 脱后经 重结 晶得 到紫剂 醇纯 品。填料杉胶硅柱 从卸下后或 高温灼中烧 再生或 作废为弃料
置 。
者笔将 １ ％右紫杉 左粗 品醇经 不任再处 理何 接直采 中用
压硅胶色柱谱 分法纯化离紫杉醇 ， 以 二 甲烷溶 解 氯ｌ 紫％
醇杉粗品直接 上 样 ，氯甲烷二 乙一腈为 脱 洗 ，剂一 便可将 紫次醇的纯杉 度提到 高 ｏ ９％，重 晶后 结度 纯可达 ９９ ％。硅 胶二用氯 烷 甲一乙 腈（ １： １ ） 在线再 ， 二生 氯烷甲 平 ， 衡胶硅柱
重复使 用。艺简工单 ，实用 性强 ，适紫合杉醇的模生规。 产
１ 验实材 料 与仪
器袅
ｂ
ｅ
ｄ
巍爱
鹦紫醇粗 品，杉 度 １纯 ． ２ ５％， 江海浙 正业药份股有公司 限提 供 ； 照对紫杉品醇 Ｓ ， ｇ ｍｉａ公 司产品 ， 度纯＞９ ９；％ 层析 硅胶 （ ２１ ０— １ ０ ６ ）购 青 于岛 海洋 化有 限工 司；公色 谱纯 乙 腈 购于，Ｊ ＆ Ｋ ＨＣ ＭＩ Ｅ ＡＣ司 ，公 色谱分 析二 用重次蒸 馏水自 制 其。余剂试均国为产工业 级。 Ｗ ｔａｅ ｒｓ 高效液相 色 仪谱，包括 １ ５ ２ ５型泵， ７１ ７ ｐ ｕ ｌｓ 型 自 进样器动， ２４ ８７双型 波长 紫外检 器 测， 色柱谱为Ｈ ｐｙ ｅ ｍ ｌ ｉ Ｄ ＳＯ（ ２ ０５ ｍ × ｍ４ ６． ｍ ｍ ，５ ｇ ， ） ； Ｒｍ ２００ ２ｋ 旋 转发蒸仪（ 海申上 胜
生物技有术公限司 ）； Ｓ Ｈ Ｂ １ 一 １ 循Ｉ 环水 多式用 真空泵 （ 郑
图 １ 不 同 洗脱 剂 对 紫杉 醇 分 离 效 果 的 影响
由图１可以 看 ，出由于 仿氯 ：酸乙酯乙 ＝２： ３ （ ｄ） 极的性
太大， 紫 杉醇的 分离果效最差； 环己烷 ： 乙酸 酯乙 ３＝ ：２ （ ｃ） ，
于洗由剂脱性太小极 ，紫杉在醇 上柱的 死吸附 便增 量大 ，导 回致收率的低降； 二 甲氯烷： 乙 ＝腈７ ：２ ａ （ ）二 氯和甲烷 乙 ： 腈 ７＝： ３ ｂ（ ）杉紫醇 纯 度均 可的达 ０ ９ ％上 ， 但 以的ａ收回率 明显 低于 ｂ， 所 以们 选择我 氯二 烷 甲 ：腈乙 ＝ ７ ：３为 紫作杉 醇分 离洗的剂 脱。 ３ ． ２径 高 的影比 响 ’
长城州工科有贸 限司公） ，玻 璃层 柱析（ 根 据 文 献 ‘ Ｊ 自制 ，
柱长 ｌ２ ０ ０ ｍ ｉ ｌｌ 内，径８ ０ ｍｍ ， 压耐１ ０ Ｍ Ｐ ａ ）；２ Ｊ— Ｘ１ ６／ １ ５柱 塞
样上量持 维２ｇ ／ １０ ０ ｇ胶硅， 考察 高 径的比 影响， 结果 如 图 ２所。 由图 ２示以看 出可，当径 高 比 １ ：８降 低 到 １ ４：时 ，
得获纯的度＞ ９０ 的％杉醇紫 占量 总脱量洗百 分比 ７由 ％７下
式 计 量剂泵溶 （杭之州江科 学器厂 仪） 。
２ 验 实 方法
降
２ １到％， 变化非常 大 虽。 径高 然
比由１ ： 继续增８ 大到１ ：
１ Ｏ 时， 得 的获 纯 ＞度 ０９％ 的 杉醇量 占紫洗总脱量 百 比也 分
２ ． １
分析方法
３・ ・ Ｏ
黑龙 江医 药Ｈｅ ｉ ｌ ｏｎ ｇ ｊｉａ ｎ ｇ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃｉｎ ｅ Ｊ ｏｕ ｎ ａｒ ｌＶ ｏ １ ．２ ６ Ｎ ｏ ．６ ２ ０１ ３
＞ ９０ 紫杉％醇占紫杉醇 量总的 ７７ ． ９６％。１ ％杉紫醇原 和
柱色料谱产 ＨＰ Ｌ物Ｃ谱 见图 ６ ａ和 ｂ
＾ 矗 。） Ｉ． 尊 鞋譬照 鬟＝苦撼 蟹 ２ ０ ０
０ ８ ０ ６０ ４ ０
２ ＯＯ
增大 ，
但 紫 杉在 柱醇上的 死吸附 也增加较 多， 收回率 降低，
速 流 减 。因慢此 ，我们择径高 选 １ 比 ： 。
８
０ 嚷
翟蔫
５
ｌ
０
１
５
Ｏ２
５ ２
３ Ｏ
瓶 号
图 ２
径高 对 比 离分效 果 的 影 响
５ 紫 图 醇 杉洗脱 曲 线
３． ３ 载负 的确量
定３ ． ６验实证结果 按验上 优述工化艺条件， 向二氯经 烷甲 ：乙腈 （ ： １ １ ）再、生
负
载量小过 ，附剂 吸能 未充 利用 ，分柱效 率低 ； 负 载 量 过大又
会造成色谱柱的量超过 ， 影响载分 效离果 。此 因， 必
二氯 甲烷平后衡的层 析进柱 行 复重上样 次 ５，进行验 证
实验 ，结果 表见 。１由表 ｌ可 ：知５ 次试 所验 得到 度纯大 于
须
择选一个合 适负的 载。保量其 持 他件不 条 ， 变改 变负 量， 结果如载图 ３ 示所。１ 紫杉醇％载量负在 ｌ 一４ ｇ １ ０／０ ｇ 胶 硅范围 内 ，随负载着量 增加的， 纯 度＞９ｏ ％ 杉醇紫的回收率 先
升后上降下 ，在２ ｇ／１ ０ ０ｇ 硅 胶达处最大值。到因此负量载选 择２
ｓ ／ｌＯ Ｏ ｇ 硅 胶
嚣。 ） ＿ 凝
９ 谜 ｏ％紫醇杉 品产收率回达 ７均 ％左５ ， 经右线 再在平 衡生后
层析柱重的复使用 果效好较 。 １ 表证验验试 结果
Ｉ
２
３
｛
３
． ７ 重结 晶
Ｉ
ｌ 触ｎ翱：
强 ‘ ｃ ｌ， 嘲
∞收集
度纯 ＞９ｏ ％ 的紫 杉醇， 甲醇用 ：水 ３ ：１（ ｖ ／ ｖ 重结）
３图 １ 紫杉％醇负载对分 离量效 的影响果 ３
４． 速流 影的 响
晶，结 晶得 到的白针色状 物 Ｈ，Ｐ Ｌ Ｃ检测 ，结 果如 ６ 图ｃ ，纯度 ＞
９９％ 。
分
别控制 流 速 ３ ０ Ｌｍ／ ｍ ｉ ｎ、 ６ ０ ｍＬ ／ｍ ｉ ｎ、 ０ ９ ｍ Ｌ ｍ／ ｎｉ和
１ ２ ０
ｍ ｌ Ｊ ｍ ｉ ｎ， 察 考同流 速对不 杉紫醇分 效果 的影 离响。结
见果图 。随４着速流的
增加 ，纯 ＞度９ ０％紫 杉醇 的回 率收
逐渐低 ，降但 速流过低导致柱层析周 会期长 过 ，所以 选择 流 速
６０ Ｌｍ／ｗｉ ｎ 。
１ ０一０
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ａ １ 紫杉醇％： ｂ 色柱 谱化纯 产物 ；ｃ重结晶 后 紫杉醇品纯
图６ 纯 化 过 程ＰＨＬ Ｃ 谱４ 结 论
藏建Ｌ ，ｌ ｉ
硅胶
柱谱色法 纯化 紫杉醇 的优化 工艺条 件为 以 ：压中
图４流 对速离效分果影的响 ３ ． ５ 洗 曲线 脱
璃玻柱为色柱 谱 １ ２，０ １— ０ ６ 层 析ｍ硅胶为填 料 ， 紫杉 醇 粗二品氯烷溶解 后甲， 滤 除溶 物不， 塞式柱溶剂 泵进 ， 二氯液 甲 ：烷 乙 腈（ ：７ ３） 洗 ， 洗脱 脱流为 速 ０６ｍ Ｌ／ ｍｉ ， １ ｎ％紫杉醇负 量载为２ ｇ １ ０／０ ｇ 硅胶 ， 洗后 脱流分的段收分集 ，ＴＬ 和Ｃ Ｈ ＬＰＣ 检 测 合并减，浓压缩回洗脱收剂 并浓 缩干 至，低 度纯分作组 层析为原料再次纯化。一次柱 色 过程谱 即可得 纯到度大于
０９ ％杉醇 ，紫回收 率７５ ％ 以 上， 醇 ： 水３ 甲 １： ｖ ／（ ｖ） 重 结晶后
依据上述化条件优 ，硅胶 柱谱分离色 化紫杉醇 ， 并用纯 细 口瓶分收段集 每瓶 ，２ ０ ００ ｍ Ｌ ， Ｈ ＬＰＣ 测 检 ， 脱 曲线洗如 图 ５可。 看 出，以 从六瓶开始第有紫杉醇 ，但含量比较 低 主， 为一些要性 小极的 杂 质 从第 ；瓶 开 ８始 ，紫 杉醇 量 含逐 渐增 加 ，第 １ ２ 瓶 时紫杉 醇就到 达 ９ ％０ 上以； 从第 １ ８ 开始 瓶， 一 和些杉醇紫极 相性 的杂近开 质始随 着紫 杉醇被 洗 下脱 ， 来一
得度 ９ ９ 纯紫杉％醇产品。 使 后 用的析柱 用二层 氯烷 ： 甲 乙腈 （】 ： １） 再 生 二氯，甲烷 衡 平 ，衡后的层平柱析复使用重， 使 用 ５次分离柱率仍不效降 低该工艺。程简 流单 、 效高 ， 合
直适第到 ２５ 瓶， 紫杉洗醇脱全 。完并台第８—１ 】 、 ｌ ８２～５
瓶
作为料继原续上柱。紫杉醇总 收率回９ ５ ． ６７ ％ ，获得纯的度
黑
江 龙医药 Ｈ ｅｉ ｌ ｎｏ ｇ ｊｉ ａ ｎ ｇ Ｍｅｄ ｃｉ ｎ ｅ ｉＪ ｕ ｎ ｏ ｒｌａ ｏ Ｖ１ ２ ． ６ ｏＮ ． ６ ２ ０ １
３
３・１・
Ｅ
Ｇ Ｃ Ｇ及其 衍 生 物 抗病的 作毒用研 进 展
刘究华帅 ，李 春英 ， 李朝 ， 德刘曼， 昆明施 ， 春赵建
ａ ５ ４ｏ ０ ｏ）
北林业东大学 森林 物植生 学教 态育部重 实验 点室 （哈 尔滨
要摘
表
没子食茶素没儿子食酸￣ （ Ｅ Ｇ Ｃ ） Ｇ 作为 叶茶中重最要的活 性组，分具 抗有化氧 抗、、 抗病癌、毒清除 自由
基等
多种生 理 性活现。 广已泛应的 于医用保药健、 食 品添 加等领域 。剂文综述 了 Ｅ 本ＧＣ Ｇ 其及衍生物抗病毒 的活性。
键词关 ：Ｅ ＧＣ Ｇ；衍 生，物 病毒
抗图分中号 ：类Ｒ ２ ８ ５ 文献 识码标： Ａ 文 章 号编 ：１０ ０ ６— ２８ ８ ２ （ ２０ ３１） Ｏ —１０ ３ １ — ３ ０
ｅ Ｒｓｅ ａ ｃ ｈ Ｐ ｒ ｏｒｇ ｅ ｓｒ ｓｉ ｎ ｔｈ Ｅ ｅｆ ｆ ｅｃ ｔ ｏ ｆ Ａｎ ｔ ｉ ｖｉ ｒ ｕ ｓ ｏ ｆ Ｅ ＣＧＧ ａｎ ｄ ｉ ｔｓ Ｄｅ ｒｉ ｖ ｔ ａｉｖ ｅｓ Ｌ
ｉｕ Ｓｈ ｕ ａ ｉ ｈ ａ ， ｅ ｔｕ ａ ｌ
Ｋｅ
ｙ Ｌａ ｂ ｏ ｒａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ Ｆ ｏｆｒ ｅ ｓ ｔ Ｐｌ ａ ｎ ｔ Ｅ ｃ ｏ ｏ ｇ ｙｌ ｏ Ｍｆ ｎｉ ｉｓ ｔｒ ｙ ｆＥ ｏｄ ｃ ｕ ａ ｔｉ ｏ，ｎ
Ｎｏｒ ｔ ｈｅ ａ ｓ ｔ Ｆ ｒ ｏｅ ｓ ｙ ｔｒ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｉ ｔｓｙ （Ｈａ ｒ ｂ ｉ ｎ ５１０ ０ ４ ０
）ｂ Ａｓｔ ｒ ａ ｃ ｔ： Ｔ ｈｅ ｗ ｉ ｄ ｅｓｐ ｒ ｅ ａｄ ｎ ｄａ ｉ ｍ ｐ ｒｏ ｔａ ｎ ｔ ｂｉ ｌ ｏ ｇｏｉ ｃａ ｌ ａ ｃｔ ｖｉｉ ｔ ｉｅ ｓｏｆ ｇ ｒｅ ｅ ｎ ｔ ｅ ａ ａ ｌ ｅ ｏ ｆ ｔｅ ａ ｎｔｔ ｉ ｂ ｕ ｒｔｅ ｄ ｔ ｏ ｔ ａ ｅ ｅ ａ ｔ ｅ ｅ ｈ ｉ ｎｓ ｉ ．ｎ ｐ ａ ｒ ｉ ｃ ｔ －ｕ
ｌ
ａ ， ｒ ｐｅｉ ｇ ｌ ａ ｌ ｏｅａ ｅ ｅ ｔ ｉ ｎ ｈ ｇ ｌ ａ ｌ ａｔ ｅ（ Ｅ Ｇ Ｃ ） ｗ Ｇｈｉ ｈ ｃ ｘｅ ｈｉ ｉ ｂｔｅ ｄｍ ａｎｙ ｐｏ ｔｅｎ ｉ ａ ｌ ｔｐ ｈ ｒ ｍａ ａ ｏ ｌｃｏ ｇ ｃ ｉ ａ ｌ ａ ｃｔ ｉｖｉ ｔ ｅ ｉ ｓ ｉｎｃ ｕ ｌｄｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｔ ｉｏ ｘ ｉｄ ａｎｔ ａ ｎ ｔ，ｉ ｅ ａｒ ｃ －ｉ
ｎｏｇ ｅ ｎ ｉ ，ｃ ａｎ ｔ ｂｉ ａ ｃｔ ｒ ｉ ｌｅ ａ ｎｔ，ａ ｉ ｖ ｉｒ ｕ ｓ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ａ ｃｐａ ｃ ｉ ｔ ｙ ｏ ｔ ｓ ｃ ｖａ ｅｎ ｅｇ ｆ ｒ ｅｅ ｒａ ｄｉ ｌｓｃ ａ． Ｎ ｏ ａ ｗ ａｄ ｙｓ ｉ ｔ ｉｓ ｗ ｉｄ ｅ ｙｌ ｕ ｓ ｅ ｄ ｉ ｎ ｅ ｄｍｉ ｉ ｃ ｅ ｎ ，ｆｏ ｏｄ ａｄ ｄ ｉ ・ ｉｆ ｖ ｅ
ｓ ａ ｄ ｏｎ ｔ ｈ ｒｅ ｉ ｅｆ ｌ ｄ ．ｓ Ｔｈ ｉ ｓ ａ ｒ ｔｉ ｃ ｌｅ ｉ＇ｅ ｉｖ ｅ ｗｓ ｔ ｈ ｅ ａ ｎｔ ｖ ｉ ｍｉｓ ａ ｔｃｉ ｖｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｅ ＧＣＧ ａ ｎ ｄｉｔ ｓ ｄｅｒ ｉ ｖ ａ ｔ ｉｖ ｅ ｓ．
ｅＫｙ ｗ ｏｒ ｄ ｓ Ｅ：ＧＣＧ； ｄ ｅ ｖｉ ｒ ｔ ｉ ｖａｅ ｓ ； ａ ｎ ｔｉ ｖ ｉｍｓ
茶酚多是叶中的茶一活类成分 性，茶多 酚又 以茶素类 儿
成分
主体为。 表没子食儿茶没食 素酸子酯 Ｅ （Ｇ ＧＣ ， ）儿茶 是
基项金 目 ：央中 高校 本科研基 务业 费项专金资（ Ｄ Ｌ １２Ｅ ０Ａ １ — ０ ４ ）、国家自然 科学金 基（３ １ ２００ ７ ４ ８ 和） 黑龙江博 省士后科研 动
启（ 金 ＬＢＨ —Ｑ １ １ ７ １ ７） 助资．
作
者简 介 ：帅刘华 １ ９（ ８ 一６ ，） ，女硕士研 究 ，生植 物 分成性活作 研 用究。
通讯
作 ： 者春赵建 （１ ９ ７一７）， ，男副 授教 ，博士 ，主要从 事药用物 的研 植与究 发开。 —Ｅｍ ａｉ ｌ： ｚ ｃ ｊｓｊ ＠ ｙ Ｊａｌ ０ ｏ ｃ．ｏ ．ｍ ｃｎ
紫杉 的醇规生产 模。
参 文考献
［ １ Ｗａ ］ ｎ ｉ Ｃ， Ｍ Ｔ ａｙ ｌ ｏ ｒ ＨＬ ，Ｗａｌ ｌ Ｍ ， Ｅｅｔ ａ １ ．Ｔ ｈ ｅｉ ｓｏ ａｌｉ ｔｏ ｎ ａｎ ｄ ｔｓｕｃ ｒ ｔ ｕ ｒ
ｏ ｅ ｆ ｔ ｘ ｏａ ｌ ，８ ｎ ｏ ｅ ｖｌ ａｎ ｔ ｉｌ ｅ ｕｋ ｅ ｉｍ ｃ ｎａ ｄ ｎａ ｔｉｔ ｕ ｍｏ ｒ ａ ｇｅ ｎｔ ｆｒ ｍ ｏｔ ａ ｕｘｓ ｂ ｒ ｅ ｖ—
效率的
抽 方出法 Ｐ ［］．日 本专利 ６：— １ ５７ ３ ２ ９ １ ，９ ９ ４ ０ ６ ０ ３ ． ［ ］７ 徐 礼桑 刘爱， 茹 ．Ｈ ＬＰＣ法 定测 南方 红豆杉中 紫杉的含醇萤 ［ Ｊ ．］ 学学报 ， 药１ ９９ １ ，２ ６ ７ ） （： ５ ３７．
［８］ 元 英 进 ，那平 ，胡定宗， 等．东 红豆北提杉 取物附吸脱 法的色
ｉ ｆｏ ｌ ｉ ａ Ｊ ［ ］ ．Ｊ Ａ ｍ Ｃ ｅ ｈｍ Ｓ ｏｃ １ ９ ， ７ ， ９１３ （９ ） ： ２ ３２ —５ ２３ ２ ．７
初
步讨探［ Ｊ］ 离子．交换与 附 吸 １ ， ９ ４ ，９ １ ０ （ ６） ：５ ３ ４． ［ ９ 杨雪峰］ ， 开刘录 ． 备制液相 谱色法离提 分紫取醇及杉类其 似 物 Ｐ［ ］中．专利 ：国ｌ １４ ０ １７ ０Ａ， ９ ９ ７ １ ．
ａ ｒ ｖ ｅ ｒ Ｄ Ｒ， ｒ Ｄ ｕｏｔ Ｔ ， Ｒｏ ｒＷ ｋ ａ ｎ ｍＣ Ｔ ｅ 。口ｔＬ
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２ ］Ｗ ｏｏ Ｈ Ｌ ，Ｓ ｗ ｅ ｎｅ ｒ ｔｏ ｎ ＤＫ， Ｈ ｏ ｓｋ ｉｎ ｓ Ｐ Ｊ． Ｔ ｘａｏ ｌ ｉｓ ａｃ ￣ｖ ｅ ｎ ｉ ｐ ｌ ｎａ ｔ ｎ ｉｕ ｍ ｅ ｓｒ ｓ ｉ ｔａ ｎ ｔ ｅ ｎ ｄ ｏ ｅ ｔ ｍｒ ｉ ａ ｌａ ｓ ｅ ｎ ｏｃ ａｒ ｅ ｉ ｎｏ ｍ ［ ａ ］Ｊ． Ａｎ ｎ ＣＪｌ ｉｎ ｎ ｃ ｏ Ｏｌ， １ ９９ ６ ， １ ９ （
３） ２： ９ ０．
３［］ Ｊ ｎ ｅ ｓ ｏＷＢ Ｓ， ｈｃｎ ｅ ｄｉｅ ｒ Ｊ Ｓ ，ｈ ａ ｐｉ ｒ ｏ Ｆ ， 以 Ｔ ｒ ｅａ ｔ ｅ ｎ ｍｔ ｏ ｆ ｅ ｒ ｓ ｉｓ ａ ｎ ｔｔ ｇ ｅ ｓ — ａｔｔ ｏ ｎ ｉａ ｌ ｃｈｏ ｌ ｆｏ ｅ ａ ｅ ｒ ｉｎ ｏ ｍａ ｉ ｔ ｗｈ Ｔ ａ ｘ ｏｌ ： Ａ ｒ ｅ ｐ ｎｏ ｏ ｆ ｔ ｗ ｏ ｅ ａ ｓ ｅ ［ｓ ］ Ｊ
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ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ｌ ｆ ｒ ｏ ｍ ｈｅａ ｄ ａ ｎｄ ｎ ｅ ｃ ｋ ｃ ａ ｌ ｃｌｃ ［ ｒＪ ］ ．Ｊ Ｃ ａ胝 ｎ ｌＣｉ ｎ Ｏ ｎｃ ｏ ｌ ，
９１９ ６ １ ２， ２ （４ ）： ２ ４ １．
１ ２ ［］ 斯霍特曼 泰Ｋ， 马 顿 Ａ斯， 霍泰特曼斯 Ｍ ． 备制谱色技术 ［
Ｍ］
．
北京
： 学科 出版 ， 社 ０ ０２０： １０ —１６ １ ９ ．
５ ［ 韩金］玉 ，剑肖， 王华 ， 等紫．醇杉的提 取纯 技术化 ［ ｊ］ ．中草
， 药２ ０ ００ ３，１ （ １ ０ ） ： ８ ９—７ ７ ２９．
［ １ ］３ 肖国 勇， 炳林 昌 ，子马都 从．北东 豆红枝叶中杉提取紫 醇杉 的过程分 析 Ｊ ］［． 鞍钢山学院铁报学， １ ９ ９ ， ９２ （２２ 一 １ ） ： １５ １ ７． 收稿
日期 ： ２ １０２ １ ——０１ ５
［
６ ］ 锅怎助 田， 田崎之弘， 部洋史江， 等 ． 年 夕 ｌ７一 Ｌ ， 类， 有含
二 ／