贴壁细胞培养流程
1.
2.
3.
4. 将自己的细胞取出来，观察密度。（细胞密度大于等于80%就可以处理了） 准备传代需要的实验器材及试剂（5ml、1ml枪头，PBS,培养基，废液缸） 将培养瓶中培养液倒出（培养瓶举高一点，不要太靠近废液缸，以免污染） 每次加3ml左右PBS洗细胞，洗两次（注意不要将细胞吹打下来。用PBS洗的目的：传代细胞所用的培养基一般含有血清，而血清能影响胰酶的活性，使其失效，因此一般在加胰酶之前会用PBS洗一下，避免胰酶活性降低）
5. 加入1ml胰酶，前后摇匀，在显微镜下观察其形态（为什么用胰酶消化：细胞外含有多种胞外蛋白,如胶原蛋白。这些蛋白使细胞间或细胞与培养瓶内壁粘连起来。用胰蛋白酶分解这些蛋白质后它们就分开了。胰酶消化过度：消化过度，一方面会对细胞本身造成伤害，另一方面，造成细胞流失，也就是吸取消化液时，由于消化过度，其中大量溶在消化液中的细胞被吸走，导致细胞数量减少）
6.
7.
8.
9. 等到细胞变圆，没有连成一片且开始慢慢脱落下来的时候就可以终止消化了（如果想加速消化，就把细胞放回培养箱） 终止消化：加入5ml左右培养基，并将细胞吹打下来。吹打完后在显微镜下观察吹打情况。（注意四个角落的细胞是否吹打下来） 把细胞吸到离心管中，离心5分钟1000转。 离心完后取出离心管，离心管底部有一团白色的细胞。
10. 倒出培养液，加入2ml左右培养基并吹散细胞。
11. 取出一个培养瓶，加入7ml左右培养基。
12. 吸取0.4ml左右细胞加入培养瓶，混匀培养瓶中细胞并前后摇匀。做好标记，放入培养箱。（吸取前先混匀离心管中细胞。）
贴壁细胞培养流程
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4. 将自己的细胞取出来，观察密度。（细胞密度大于等于80%就可以处理了） 准备传代需要的实验器材及试剂（5ml、1ml枪头，PBS,培养基，废液缸） 将培养瓶中培养液倒出（培养瓶举高一点，不要太靠近废液缸，以免污染） 每次加3ml左右PBS洗细胞，洗两次（注意不要将细胞吹打下来。用PBS洗的目的：传代细胞所用的培养基一般含有血清，而血清能影响胰酶的活性，使其失效，因此一般在加胰酶之前会用PBS洗一下，避免胰酶活性降低）
5. 加入1ml胰酶，前后摇匀，在显微镜下观察其形态（为什么用胰酶消化：细胞外含有多种胞外蛋白,如胶原蛋白。这些蛋白使细胞间或细胞与培养瓶内壁粘连起来。用胰蛋白酶分解这些蛋白质后它们就分开了。胰酶消化过度：消化过度，一方面会对细胞本身造成伤害，另一方面，造成细胞流失，也就是吸取消化液时，由于消化过度，其中大量溶在消化液中的细胞被吸走，导致细胞数量减少）
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9. 等到细胞变圆，没有连成一片且开始慢慢脱落下来的时候就可以终止消化了（如果想加速消化，就把细胞放回培养箱） 终止消化：加入5ml左右培养基，并将细胞吹打下来。吹打完后在显微镜下观察吹打情况。（注意四个角落的细胞是否吹打下来） 把细胞吸到离心管中，离心5分钟1000转。 离心完后取出离心管，离心管底部有一团白色的细胞。
10. 倒出培养液，加入2ml左右培养基并吹散细胞。
11. 取出一个培养瓶，加入7ml左右培养基。
12. 吸取0.4ml左右细胞加入培养瓶，混匀培养瓶中细胞并前后摇匀。做好标记，放入培养箱。（吸取前先混匀离心管中细胞。）