畜牧与饲料科学AnimalHusbandryandFeedScience2012，33（8）:86
反对克隆人技术的原因分析
祝铁钢
（衡水学院生命科学系，河北
衡水
053000）
摘要：在过去要求进行克隆人体的呼声高涨时，科学界曾掀起了一场“反克隆人运动”。无论是从克隆人体的风险性还是伦理道德层面来讲，反对克隆人体都存在一定的原因与道理，在一定程度上都是可以得到理解。笔者就反对克隆人方面进行了分析，使其对现代科技工作者的职业道德、社会责任和科研态度等问题有了新的认识。
关键词：反克隆人运动；伦理；道德中图分类号：R-05
文献标识码：A
文章顺序编号：1672-5190（2012）08-0086-01
科学技术的发展，常常带动人类社会制度和伦理关系的变革，对社会产生巨大的冲击。关于克隆人的相关新闻报道层出不穷，虽然人们无法确定这些报道的真实性，但可以肯定，关于克隆人的操作技术一直处于不断地研究当中。纵观科学界对克隆人所持的反对理由，概括而论就是，克隆人研究存在着“技术不成熟”和“有悖人类伦理道德”等问题。
副院长陈竺院士指出，世界上首例克隆技术成功的是英国科学家的克隆羊技术，因此他们最熟悉关于克隆的相关技术，他们认为，目前的技术还只是初级阶段，距离克隆人还有相当远的一段路。克隆羊“多莉”培育成功，经历了277头克隆羊试验失败的波折，怪胎、畸形层出不穷，这一幕如果在克隆人时重演，有谁能为277条生命的夭折负责，还有，克隆动物被发现存在早衰现象，尚无法解释。不顾这一切而匆忙进行克隆人，很可能酿成大错［2］。
1克隆人将存在着较多的风险
目前，动物克隆试验仍然不够成熟，不够完善，还仅仅处于初级阶段。在动物克隆实验中经常会出现失败、风险性较高以及使用大量重组卵细胞、产生大量畸形后代以及发生排斥现象等问题，这些问题同样会出现在克隆人的科学研究当中。如果仅仅通过某项动物克隆的成功个案来判断克隆技术的普遍可行性是不正确的，是以偏概全的，如果要想将动物（如绵羊）克隆的实验技术，完全照搬照抄用在克隆人身上是不明智的，也是不可能完全成功的。当这种不成熟的技术生搬硬套地应用在人体时，克隆人的结果将会出现各种各样的风险。例如，英国胚胎学家威尔莫特认为，有很多理由可以考虑到，由扎沃斯和安蒂诺里等人宣布的克隆人实验将会出现失败率高的现象，正如试图进行动物克隆时那样。并且，目前或者在可以预见的未来，没有可行的技术方法去检查动物胚胎所有基因组的发育状态［1］。另外，
2克隆人行为违背了社会伦理
对于来自社会的对克隆人行为在伦理层面的指责，科
学界不可能无动于衷。受此影响的科学家就发表了类似观点，如世界医学协会主席恩里克·阿科尔西在2001年8月8日发表声明指出，把克隆技术用于人类自己“有悖于人类价值、伦理和道德原则”。他代表世界医学协会坚决反对克隆人实验计划［3］。从另外一个角度，威尔莫特对媒体说：“试想我的妻子与我和一个复制的‘我’三人生活在一起，那就会产生一个极不寻常的关系，对我们3个人中的每个人，尤其那个复制的‘我’，都将十分尴尬。因此，必须坚决反对克隆人”［4］。当然，科学家不是伦理学家、社会学家和法学家，他们不可能从伦理学、社会学和法学等层面对克隆人问题展开系统的、溯根求源式的学理分析。但是，他们作为现实的社会成员，他们在“克隆人”问题上就必然有着与其他社会成员相似的感觉。这样，科学界从社会伦理层面来反对克隆人研究就很正常了。
由于克隆人技术遭到社会各界以及各国政府部门的反
2002年在上海召开的国际人类基因组大会上，中国科学院
收稿日期：2012－07－16
作者简介：祝铁钢（1982—），男，讲师，硕士，主要研究方向为动
物遗传育种与繁殖。
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
［12］于秀菊，董常生，范阔海，等.β-catenin在不同毛色羊驼
皮肤中的表达和定位［J］.畜牧兽医学报，2010，41（3）：
［17］
的表达和定位［J］.畜牧兽医学报，2012，43（5）：785-790.朱芷葳，贺俊平，于秀菊，等.Mitf-M在羊驼皮肤组织的表达与序列分析及免疫组织化学定位［J］.中国农业科学，
335-340.
［13］LINJY，FISHERDE.Melanocytebiologyandskinpigmen-
2012，45（4）：794-800.
［18］［19］
穆晓丽，孙乐天，耿建军，等.内皮素受体A在不同毛色羊驼皮肤中的分布［J］.山西农业科学，2010，38（9）：63-65.耿建军，穆晓丽，孙乐天，等.内皮素受体B在不同毛色羊驼皮肤中的表达与定位［J］.畜牧兽医学报，2010，41（11）：1478-1484.［20］
刘佳，董常生，范瑞文，等.周期素依赖性蛋白激酶-5在不同毛色羊驼皮肤中的表达［J］.畜牧兽医学报，2010，41（4）：478-483.［21］
董常生.羊驼学［M］.北京：中国农业出版社，2010：299.
（责任编辑：慕宗杰）
tation［J］.Nature，2007，445（7130）：843-850.
［14］DUNNKJ，BRADYM，OCHSENBAUER-JAMBORC，et
al.WNT1andWNT3αpromoteexpansionofmelanocytesthroughdistinctmodesofaction［J］.PigmentCellRes，2005，18（3）：167-180.
［15］TAKEDAK，YASUMOTOK，TAKADAR，etal.Inductionof
melanocyte-specificmicrophthalmia-associatedtranscrip-tionfactorbyWnt-3α［J］.JBiolchem，2000，275（19）：14013-14016.
［16］宋云飞，田雪，卢绪秀，等.Wnt3α在不同毛色羊驼皮肤中
畜牧与饲料科学AnimalHusbandryandFeedScience2012，33（8）:87-88
ＣｈＩＰ在研究ＤＮＡ与蛋白质相互作用中的应用
祝铁钢
（衡水学院生命科学系，河北
衡水
053000）
摘要：在后基因组时代，基因表达调控的一个重要领域就是DNA-蛋白质的相互作用。目前存在多种研究DNA-蛋白质的方法，但是这些方法与染色质免疫沉淀技术（ChIP）相对比而言，染色质免疫沉淀技术更加适合研究DNA-蛋白质的相互作用，因此是一种较理想的研究方法。另外，由于存在克隆技术与DNA芯片技术，因此可使之充分结合以用于高通量筛选已知蛋白因子的未知DNA靶点和研究反式作用因子在整个基因组上的分布情况，以促进DNA-蛋白质相互作用调控网络的发展与出现。对ChIP技术进行了介绍，概述了该技术的研究进展，并就其前景进行了展望。
关键词：染色质免疫沉淀技术；克隆技术；靶序列；组蛋白中图分类号：Q78文献标识码：A
文章顺序编号：1672-5190（2012）08-0087-02
ApplicationofChIPinStudyontheInteractionbetweenDNAandProtein
ZHUTie-gang
（DepartmentofBiology,HengshuiUniversity,Hengshui053000，China）
Abstract：TheinteractionbetweenDNAandproteinisoneimportantfieldofgeneexpressionregulationinthepost-genomeera.There
aremanymethodstostudytheinteractionbetweenDNAandproteinatpresent,butchromatinimmunoprecipitationassay(ChIP)ismoresuitablecomparingwiththem.Besides,cloningtechniqueandDNAchiptechnologycouldbecombinedtohigh-throughputscreentheunknownDNAtargetsofknownproteinfactorsandstudythedistributionoftrans-actingfactorsinwholegenomesoastoenhancethedevelopmentandoccurrenceofDNA-proteininteractionregulatorynetworks.TheresearchprogressofChIPwasintroduced,anditsprospectwasprospected.
Keywords：chromatinimmunoprecipitationassay；cloningtechnique；targetsequence；histone染色质免疫沉淀技术（chromatinimmunoprecipitation，
通过选择有效的特异性抗体、孵育的时间、蛋白A/G琼脂糖凝胶的数量、超声的功率以及洗液的类型等来提高该技术的效率。
ChIP）是利用抗原抗体结合的原理来反映蛋白质与基因组
结合的情况，即研究蛋白质与DNA的相互作用。随着该技术的不断发展，其越来越受到科学家的重视，并已应用于实际科研当中。
2技术简介
简而言之，染色质免疫沉淀技术的原理是［2］：在活细胞
1ChIP技术的发展和改进
近年来，ChIP技术发展迅速，越来越受到科研人员的重视，且该技术的应用也越来越广泛，主要是用于研究蛋白质与染色质两者之间的关系，其中所研究的蛋白质主要涉及组成染色质的组蛋白和非组蛋白，例如可以利用该方法分析信号传导因子与相关影响因素之间的关系、组蛋白对转录的影响关系。但更多的是用该方法来定位蛋白质，例如用该方法来研究影响转录的因子之间或者与其他基因之间的关系，也可以用该方法来定位影响转录的因子所在。为了能够更加有效地研究DNA和蛋白质与特异性转录因子，Virginia等［1］付出了许多心血来改进并发展该技术，使之成为更加有效和方便的方法。他们提出，该技术应当根据所研究的特异性DNA序列的不同，
收稿日期：2012－07－12
作者简介：祝铁钢（1982—），男，讲师，硕士，主要研究方向为动
物遗传育种与繁殖。
状态下固定DNA-蛋白质复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀该复合物，特异性地富集与目的蛋白结合的DNA片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。其主要技术程序有：第一，甲醛可以作为一种交联剂能够使蛋白质、RNA、DNA相互之间交联，成为一种复合物，阻止了细胞内各种组成成分的分散，但这种交联是具有可逆性的，因此在今后的操作中可以使这些成分分散以便于进一步分析。第二，用超声波将交联之后的复合物切割为较小的片段，大约几百个碱基对，这样就可以使目的蛋白充分暴露出来，利于抗体识别。第三，可以用氯化铯梯度离心的方法来进一步纯化交联的复合物：即用该方法可以排除分散着的各种物质，主要是分散存在着的蛋白质、DNA以及RNA等。第四，染色质免疫沉淀和免疫沉淀复合体的纯化：用能够与目标蛋白特异性结合的抗体来进行免疫性沉淀。第五，纯化DNA和
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对与禁止，从而使得人们很难确定克隆人是否存在。因此，目前存在的许多关于克隆人的推断以及相关信息并不一定完全是正确的，存在很多虚假的成分。
参考文献：［1］［2］
［3］［4］
［EB/OL］.［2002-4-15］.http：//www.china.com.cn/chinese/
TEC-c/132179.htm.
新浪.世界医学协会主席反对克隆人［EB/OL］.［2001-08-
09］.http：//tech.sina.com.cn/o/2001-08-09/79756.shtml.
华健.美国居然有人要克隆人［J］.国外科技动态，1998（2）：3-4．
（责任编辑：钱英红）
JAENISCHR，WILMUTI.Don′tclonehuman［J］.Science，2001，291（5513）：2552．
新华社．伦理学家与科学家纷纷表示反对“克隆人”实验
畜牧与饲料科学AnimalHusbandryandFeedScience2012，33（8）:86
反对克隆人技术的原因分析
祝铁钢
（衡水学院生命科学系，河北
衡水
053000）
摘要：在过去要求进行克隆人体的呼声高涨时，科学界曾掀起了一场“反克隆人运动”。无论是从克隆人体的风险性还是伦理道德层面来讲，反对克隆人体都存在一定的原因与道理，在一定程度上都是可以得到理解。笔者就反对克隆人方面进行了分析，使其对现代科技工作者的职业道德、社会责任和科研态度等问题有了新的认识。
关键词：反克隆人运动；伦理；道德中图分类号：R-05
文献标识码：A
文章顺序编号：1672-5190（2012）08-0086-01
科学技术的发展，常常带动人类社会制度和伦理关系的变革，对社会产生巨大的冲击。关于克隆人的相关新闻报道层出不穷，虽然人们无法确定这些报道的真实性，但可以肯定，关于克隆人的操作技术一直处于不断地研究当中。纵观科学界对克隆人所持的反对理由，概括而论就是，克隆人研究存在着“技术不成熟”和“有悖人类伦理道德”等问题。
副院长陈竺院士指出，世界上首例克隆技术成功的是英国科学家的克隆羊技术，因此他们最熟悉关于克隆的相关技术，他们认为，目前的技术还只是初级阶段，距离克隆人还有相当远的一段路。克隆羊“多莉”培育成功，经历了277头克隆羊试验失败的波折，怪胎、畸形层出不穷，这一幕如果在克隆人时重演，有谁能为277条生命的夭折负责，还有，克隆动物被发现存在早衰现象，尚无法解释。不顾这一切而匆忙进行克隆人，很可能酿成大错［2］。
1克隆人将存在着较多的风险
目前，动物克隆试验仍然不够成熟，不够完善，还仅仅处于初级阶段。在动物克隆实验中经常会出现失败、风险性较高以及使用大量重组卵细胞、产生大量畸形后代以及发生排斥现象等问题，这些问题同样会出现在克隆人的科学研究当中。如果仅仅通过某项动物克隆的成功个案来判断克隆技术的普遍可行性是不正确的，是以偏概全的，如果要想将动物（如绵羊）克隆的实验技术，完全照搬照抄用在克隆人身上是不明智的，也是不可能完全成功的。当这种不成熟的技术生搬硬套地应用在人体时，克隆人的结果将会出现各种各样的风险。例如，英国胚胎学家威尔莫特认为，有很多理由可以考虑到，由扎沃斯和安蒂诺里等人宣布的克隆人实验将会出现失败率高的现象，正如试图进行动物克隆时那样。并且，目前或者在可以预见的未来，没有可行的技术方法去检查动物胚胎所有基因组的发育状态［1］。另外，
2克隆人行为违背了社会伦理
对于来自社会的对克隆人行为在伦理层面的指责，科
学界不可能无动于衷。受此影响的科学家就发表了类似观点，如世界医学协会主席恩里克·阿科尔西在2001年8月8日发表声明指出，把克隆技术用于人类自己“有悖于人类价值、伦理和道德原则”。他代表世界医学协会坚决反对克隆人实验计划［3］。从另外一个角度，威尔莫特对媒体说：“试想我的妻子与我和一个复制的‘我’三人生活在一起，那就会产生一个极不寻常的关系，对我们3个人中的每个人，尤其那个复制的‘我’，都将十分尴尬。因此，必须坚决反对克隆人”［4］。当然，科学家不是伦理学家、社会学家和法学家，他们不可能从伦理学、社会学和法学等层面对克隆人问题展开系统的、溯根求源式的学理分析。但是，他们作为现实的社会成员，他们在“克隆人”问题上就必然有着与其他社会成员相似的感觉。这样，科学界从社会伦理层面来反对克隆人研究就很正常了。
由于克隆人技术遭到社会各界以及各国政府部门的反
2002年在上海召开的国际人类基因组大会上，中国科学院
收稿日期：2012－07－16
作者简介：祝铁钢（1982—），男，讲师，硕士，主要研究方向为动
物遗传育种与繁殖。
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［12］于秀菊，董常生，范阔海，等.β-catenin在不同毛色羊驼
皮肤中的表达和定位［J］.畜牧兽医学报，2010，41（3）：
［17］
的表达和定位［J］.畜牧兽医学报，2012，43（5）：785-790.朱芷葳，贺俊平，于秀菊，等.Mitf-M在羊驼皮肤组织的表达与序列分析及免疫组织化学定位［J］.中国农业科学，
335-340.
［13］LINJY，FISHERDE.Melanocytebiologyandskinpigmen-
2012，45（4）：794-800.
［18］［19］
穆晓丽，孙乐天，耿建军，等.内皮素受体A在不同毛色羊驼皮肤中的分布［J］.山西农业科学，2010，38（9）：63-65.耿建军，穆晓丽，孙乐天，等.内皮素受体B在不同毛色羊驼皮肤中的表达与定位［J］.畜牧兽医学报，2010，41（11）：1478-1484.［20］
刘佳，董常生，范瑞文，等.周期素依赖性蛋白激酶-5在不同毛色羊驼皮肤中的表达［J］.畜牧兽医学报，2010，41（4）：478-483.［21］
董常生.羊驼学［M］.北京：中国农业出版社，2010：299.
（责任编辑：慕宗杰）
tation［J］.Nature，2007，445（7130）：843-850.
［14］DUNNKJ，BRADYM，OCHSENBAUER-JAMBORC，et
al.WNT1andWNT3αpromoteexpansionofmelanocytesthroughdistinctmodesofaction［J］.PigmentCellRes，2005，18（3）：167-180.
［15］TAKEDAK，YASUMOTOK，TAKADAR，etal.Inductionof
melanocyte-specificmicrophthalmia-associatedtranscrip-tionfactorbyWnt-3α［J］.JBiolchem，2000，275（19）：14013-14016.
［16］宋云飞，田雪，卢绪秀，等.Wnt3α在不同毛色羊驼皮肤中
畜牧与饲料科学AnimalHusbandryandFeedScience2012，33（8）:87-88
ＣｈＩＰ在研究ＤＮＡ与蛋白质相互作用中的应用
祝铁钢
（衡水学院生命科学系，河北
衡水
053000）
摘要：在后基因组时代，基因表达调控的一个重要领域就是DNA-蛋白质的相互作用。目前存在多种研究DNA-蛋白质的方法，但是这些方法与染色质免疫沉淀技术（ChIP）相对比而言，染色质免疫沉淀技术更加适合研究DNA-蛋白质的相互作用，因此是一种较理想的研究方法。另外，由于存在克隆技术与DNA芯片技术，因此可使之充分结合以用于高通量筛选已知蛋白因子的未知DNA靶点和研究反式作用因子在整个基因组上的分布情况，以促进DNA-蛋白质相互作用调控网络的发展与出现。对ChIP技术进行了介绍，概述了该技术的研究进展，并就其前景进行了展望。
关键词：染色质免疫沉淀技术；克隆技术；靶序列；组蛋白中图分类号：Q78文献标识码：A
文章顺序编号：1672-5190（2012）08-0087-02
ApplicationofChIPinStudyontheInteractionbetweenDNAandProtein
ZHUTie-gang
（DepartmentofBiology,HengshuiUniversity,Hengshui053000，China）
Abstract：TheinteractionbetweenDNAandproteinisoneimportantfieldofgeneexpressionregulationinthepost-genomeera.There
aremanymethodstostudytheinteractionbetweenDNAandproteinatpresent,butchromatinimmunoprecipitationassay(ChIP)ismoresuitablecomparingwiththem.Besides,cloningtechniqueandDNAchiptechnologycouldbecombinedtohigh-throughputscreentheunknownDNAtargetsofknownproteinfactorsandstudythedistributionoftrans-actingfactorsinwholegenomesoastoenhancethedevelopmentandoccurrenceofDNA-proteininteractionregulatorynetworks.TheresearchprogressofChIPwasintroduced,anditsprospectwasprospected.
Keywords：chromatinimmunoprecipitationassay；cloningtechnique；targetsequence；histone染色质免疫沉淀技术（chromatinimmunoprecipitation，
通过选择有效的特异性抗体、孵育的时间、蛋白A/G琼脂糖凝胶的数量、超声的功率以及洗液的类型等来提高该技术的效率。
ChIP）是利用抗原抗体结合的原理来反映蛋白质与基因组
结合的情况，即研究蛋白质与DNA的相互作用。随着该技术的不断发展，其越来越受到科学家的重视，并已应用于实际科研当中。
2技术简介
简而言之，染色质免疫沉淀技术的原理是［2］：在活细胞
1ChIP技术的发展和改进
近年来，ChIP技术发展迅速，越来越受到科研人员的重视，且该技术的应用也越来越广泛，主要是用于研究蛋白质与染色质两者之间的关系，其中所研究的蛋白质主要涉及组成染色质的组蛋白和非组蛋白，例如可以利用该方法分析信号传导因子与相关影响因素之间的关系、组蛋白对转录的影响关系。但更多的是用该方法来定位蛋白质，例如用该方法来研究影响转录的因子之间或者与其他基因之间的关系，也可以用该方法来定位影响转录的因子所在。为了能够更加有效地研究DNA和蛋白质与特异性转录因子，Virginia等［1］付出了许多心血来改进并发展该技术，使之成为更加有效和方便的方法。他们提出，该技术应当根据所研究的特异性DNA序列的不同，
收稿日期：2012－07－12
作者简介：祝铁钢（1982—），男，讲师，硕士，主要研究方向为动
物遗传育种与繁殖。
状态下固定DNA-蛋白质复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀该复合物，特异性地富集与目的蛋白结合的DNA片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。其主要技术程序有：第一，甲醛可以作为一种交联剂能够使蛋白质、RNA、DNA相互之间交联，成为一种复合物，阻止了细胞内各种组成成分的分散，但这种交联是具有可逆性的，因此在今后的操作中可以使这些成分分散以便于进一步分析。第二，用超声波将交联之后的复合物切割为较小的片段，大约几百个碱基对，这样就可以使目的蛋白充分暴露出来，利于抗体识别。第三，可以用氯化铯梯度离心的方法来进一步纯化交联的复合物：即用该方法可以排除分散着的各种物质，主要是分散存在着的蛋白质、DNA以及RNA等。第四，染色质免疫沉淀和免疫沉淀复合体的纯化：用能够与目标蛋白特异性结合的抗体来进行免疫性沉淀。第五，纯化DNA和
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
对与禁止，从而使得人们很难确定克隆人是否存在。因此，目前存在的许多关于克隆人的推断以及相关信息并不一定完全是正确的，存在很多虚假的成分。
参考文献：［1］［2］
［3］［4］
［EB/OL］.［2002-4-15］.http：//www.china.com.cn/chinese/
TEC-c/132179.htm.
新浪.世界医学协会主席反对克隆人［EB/OL］.［2001-08-
09］.http：//tech.sina.com.cn/o/2001-08-09/79756.shtml.
华健.美国居然有人要克隆人［J］.国外科技动态，1998（2）：3-4．
（责任编辑：钱英红）
JAENISCHR，WILMUTI.Don′tclonehuman［J］.Science，2001，291（5513）：2552．
新华社．伦理学家与科学家纷纷表示反对“克隆人”实验