内参抗体种类很多，比如β-actin 、β-tubunlin 、GAPDH 、Lamin B 等，那么针对自己的实验，我们该如何选择呢? 下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则：
一. 样本种属来源：
首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。
1、哺乳动物的组织或者细胞样本，通常选择β-actin 、β-tubulin 、GAPDH 、Lamin B、Histone H3、Na,K atp ase 等。
2、植物来源实验样本，则可以选择plant actin、Rubisco 等。
3、其他来源样本研究较少，所以就应该参照文献报导，选择合适的蛋白作为内参。
二. 目的蛋白分子量：
选择内参抗体时，应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD 以上。比如目的蛋白分子量为45KD ，此时不适宜选择β-actin 作为内参，可以考虑选择GAPDH 或者β-tubulin 作为内参。
三. 目的蛋白表达部位：
就一般的蛋白检测来说，β-actin 、β-Tubulin 抗体等就可以了，而针对于核蛋白的定量，特别是样本蛋白就是核蛋白时，选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3，除此之外，其它常见的核蛋白内参还有PCNA 、K70、K80等，在一些文献报道中，Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun 、c-Fos 等都有使用。而对于膜蛋白检测，常用的内参抗体为Na,K ATPase 。对于线粒体蛋白的检测，常用VDAC1和COX IV 作为内参抗体。
以上几条原则只是针对通常情况，但是需要注意的问题是——内参的选择需要考虑实际的试验环境，比如某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH 的表达增高，不适合做内参。比如在涉及细胞增殖相关试验中，c-Jun 由于自身表达变化就不适合做内参; 而在凋亡实验时，TBP 、Lamin 等也不适合作为内参。因此设计实验方案的时候应该考虑这些因素并查询相应文献，在实验过程中也应该注意如果内参表达出现异常，应考虑这方面因素。
内参抗体种类很多，比如β-actin 、β-tubunlin 、GAPDH 、Lamin B 等，那么针对自己的实验，我们该如何选择呢? 下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则：
一. 样本种属来源：
首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。
1、哺乳动物的组织或者细胞样本，通常选择β-actin 、β-tubulin 、GAPDH 、Lamin B、Histone H3、Na,K atp ase 等。
2、植物来源实验样本，则可以选择plant actin、Rubisco 等。
3、其他来源样本研究较少，所以就应该参照文献报导，选择合适的蛋白作为内参。
二. 目的蛋白分子量：
选择内参抗体时，应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD 以上。比如目的蛋白分子量为45KD ，此时不适宜选择β-actin 作为内参，可以考虑选择GAPDH 或者β-tubulin 作为内参。
三. 目的蛋白表达部位：
就一般的蛋白检测来说，β-actin 、β-Tubulin 抗体等就可以了，而针对于核蛋白的定量，特别是样本蛋白就是核蛋白时，选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3，除此之外，其它常见的核蛋白内参还有PCNA 、K70、K80等，在一些文献报道中，Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun 、c-Fos 等都有使用。而对于膜蛋白检测，常用的内参抗体为Na,K ATPase 。对于线粒体蛋白的检测，常用VDAC1和COX IV 作为内参抗体。
以上几条原则只是针对通常情况，但是需要注意的问题是——内参的选择需要考虑实际的试验环境，比如某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH 的表达增高，不适合做内参。比如在涉及细胞增殖相关试验中，c-Jun 由于自身表达变化就不适合做内参; 而在凋亡实验时，TBP 、Lamin 等也不适合作为内参。因此设计实验方案的时候应该考虑这些因素并查询相应文献，在实验过程中也应该注意如果内参表达出现异常，应考虑这方面因素。