动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书

磁珠法动物组织基因组DNA 提取试剂盒 MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit

【目 录 号】TGDE-5005、TGDE-5030 【运输条件】2~25℃;

【保存条件】磁珠悬浮液 2~8℃,其它组分室温保存; 【试剂盒组成】

【注意事项】

1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,使用前请充分混匀;

2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶,如有结晶请置于65℃水浴重新溶解; 3. 在使用本试剂盒前,请用户自配80%乙醇;

4. 如需去除RNA 请自备RNase A 溶液(100mg/mL, 分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0); 5. 本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南的建议操作。

1

磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案

【产品简介】

本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA 。试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力,而当条件改变时可以释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。

本试剂盒提取所得基因组DNA 产物得量高、纯度好,适用于各种下游分子生物学实验,如:酶切、PCR 、QPCR 、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用,实现高通量操作。 【试剂盒说明】

【自备仪器、耗材及试剂】 仪器自动版

研钵(或组织研磨机、匀浆机)、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。 手动版

研钵(或组织研磨机、匀浆机)、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL 离心管、离心管配套用磁力架、液氮。

【仪器自动版操作步骤】

本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,同步可完成32个样本的提取。 1. 准备96孔板

参照下表向96孔板各孔位中分别加入相应试剂:

2

磁珠法动物组织基因组DNA 提取试剂盒

2. 样本前处理

组织样本:

取适量组织样本,液氮研磨至粉末状。尽可能转移至2.0mL 离心管中,加入400μL裂解液1,涡旋振荡1~3min,至组织粉末呈云雾状;

注:针对毛发样本,可剪除毛发根部,毛干部分剪成1~5mm长度。

细胞样本:

用离心管收集组织细胞(细胞个数:5*101~5*107),PBS 清洗2次,向收集好的细胞中加入400μL裂解液1重悬细胞,涡旋振荡1~3min。 3. 样本裂解

将离心管置于65℃水浴锅中温浴15min ,每隔5min 颠倒混匀一次。结束后将离心管12000rpm 室温(勿低于15℃)离心5min ,待用。

注:如需去除RNA ,请额外加入5μL RNase A。

4. 上机提取

将裂解完毕离心管中所有上清液转移至准备好的96孔板第2、8列孔位,然后将96孔板放入ETP-300型核酸提取仪中,插入磁棒套,打开仪器操作软件,调用“动物组织DNA 提取实验方法”程序,单击“运行”执行程序。 5. 核酸转移

程序运行完毕,取下96孔板,将洗脱液转移至干净的离心管或者PCR 板中,做好标记,-20℃保存备用,此时可以弃去96孔板。

“动物组织DNA 提取实验方法”程序各参数设置如下,如果原程序不慎丢失,可自行设定:

3

磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案

【手动版操作步骤】 1. 样本前处理

参考【仪器自动版操作步骤】步骤2操作。 2. 样本裂解

参考【仪器自动版操作步骤】步骤3操作。 3. 核酸结合

将裂解完毕离心管中所有上清液转移至新的离心管中,加入200μL磁珠悬浮液以及300μL异丙醇,颠倒混匀,涡旋振荡6min ,静置2min 。 4. 磁性分离

将离心管置于磁力架上静置20s 至磁珠吸附完全;如果离心管内盖有磁珠,可保持离心管在磁力架上,整体上下颠倒2~3次至磁珠被完全吸附。保持离心管固定于磁力架上,用移液枪吸弃上清液,期间避免接触磁珠。 5. 清洗

1) 将离心管从磁力架上取下,加入600μL清洗液,高速涡旋振荡1min ,重新置于磁力

架上磁性分离(参考步骤4操作)。

2) 使用600μL 80%乙醇,参考步骤5(1)操作2遍。 6. 除醇

将除尽上清液后的离心管置于磁力架上,连同磁力架一起放入45℃真空干燥箱中,干燥约10min 至无明显乙醇味。

注:亦可置于通风橱通风或电风扇直吹约10min ,具体时间以磁珠干透无乙醇味为准。

7. 洗脱

取出离心管,加入100μL洗脱液,用移液枪吹散磁珠,65℃温浴10min ,每隔3min 涡旋振荡30s ,确保磁珠与核酸洗脱完全。 8. 核酸转移

洗脱完毕后,将离心管置于磁力架上静置20s 至磁珠吸附完全,用移液枪将洗脱液转移至另一干净离心管中,做好标记,-20℃保存备用,此时可以弃去磁珠。

*本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。

版权声明: 英芮诚生化科技(上海)有限公司保留本使用指南所有权利。版本:V201702.201

磁珠法动物组织基因组DNA 提取试剂盒 MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit

【目 录 号】TGDE-5005、TGDE-5030 【运输条件】2~25℃;

【保存条件】磁珠悬浮液 2~8℃,其它组分室温保存; 【试剂盒组成】

【注意事项】

1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,使用前请充分混匀;

2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶,如有结晶请置于65℃水浴重新溶解; 3. 在使用本试剂盒前,请用户自配80%乙醇;

4. 如需去除RNA 请自备RNase A 溶液(100mg/mL, 分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0); 5. 本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南的建议操作。

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磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案

【产品简介】

本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA 。试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力,而当条件改变时可以释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。

本试剂盒提取所得基因组DNA 产物得量高、纯度好,适用于各种下游分子生物学实验,如:酶切、PCR 、QPCR 、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用,实现高通量操作。 【试剂盒说明】

【自备仪器、耗材及试剂】 仪器自动版

研钵(或组织研磨机、匀浆机)、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。 手动版

研钵(或组织研磨机、匀浆机)、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL 离心管、离心管配套用磁力架、液氮。

【仪器自动版操作步骤】

本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,同步可完成32个样本的提取。 1. 准备96孔板

参照下表向96孔板各孔位中分别加入相应试剂:

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磁珠法动物组织基因组DNA 提取试剂盒

2. 样本前处理

组织样本:

取适量组织样本,液氮研磨至粉末状。尽可能转移至2.0mL 离心管中,加入400μL裂解液1,涡旋振荡1~3min,至组织粉末呈云雾状;

注:针对毛发样本,可剪除毛发根部,毛干部分剪成1~5mm长度。

细胞样本:

用离心管收集组织细胞(细胞个数:5*101~5*107),PBS 清洗2次,向收集好的细胞中加入400μL裂解液1重悬细胞,涡旋振荡1~3min。 3. 样本裂解

将离心管置于65℃水浴锅中温浴15min ,每隔5min 颠倒混匀一次。结束后将离心管12000rpm 室温(勿低于15℃)离心5min ,待用。

注:如需去除RNA ,请额外加入5μL RNase A。

4. 上机提取

将裂解完毕离心管中所有上清液转移至准备好的96孔板第2、8列孔位,然后将96孔板放入ETP-300型核酸提取仪中,插入磁棒套,打开仪器操作软件,调用“动物组织DNA 提取实验方法”程序,单击“运行”执行程序。 5. 核酸转移

程序运行完毕,取下96孔板,将洗脱液转移至干净的离心管或者PCR 板中,做好标记,-20℃保存备用,此时可以弃去96孔板。

“动物组织DNA 提取实验方法”程序各参数设置如下,如果原程序不慎丢失,可自行设定:

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磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案

【手动版操作步骤】 1. 样本前处理

参考【仪器自动版操作步骤】步骤2操作。 2. 样本裂解

参考【仪器自动版操作步骤】步骤3操作。 3. 核酸结合

将裂解完毕离心管中所有上清液转移至新的离心管中,加入200μL磁珠悬浮液以及300μL异丙醇,颠倒混匀,涡旋振荡6min ,静置2min 。 4. 磁性分离

将离心管置于磁力架上静置20s 至磁珠吸附完全;如果离心管内盖有磁珠,可保持离心管在磁力架上,整体上下颠倒2~3次至磁珠被完全吸附。保持离心管固定于磁力架上,用移液枪吸弃上清液,期间避免接触磁珠。 5. 清洗

1) 将离心管从磁力架上取下,加入600μL清洗液,高速涡旋振荡1min ,重新置于磁力

架上磁性分离(参考步骤4操作)。

2) 使用600μL 80%乙醇,参考步骤5(1)操作2遍。 6. 除醇

将除尽上清液后的离心管置于磁力架上,连同磁力架一起放入45℃真空干燥箱中,干燥约10min 至无明显乙醇味。

注:亦可置于通风橱通风或电风扇直吹约10min ,具体时间以磁珠干透无乙醇味为准。

7. 洗脱

取出离心管,加入100μL洗脱液,用移液枪吹散磁珠,65℃温浴10min ,每隔3min 涡旋振荡30s ,确保磁珠与核酸洗脱完全。 8. 核酸转移

洗脱完毕后,将离心管置于磁力架上静置20s 至磁珠吸附完全,用移液枪将洗脱液转移至另一干净离心管中,做好标记,-20℃保存备用,此时可以弃去磁珠。

*本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。

版权声明: 英芮诚生化科技(上海)有限公司保留本使用指南所有权利。版本:V201702.201


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