新疆医科大学学报 JOURNALOFXINJIANGMEDICALUNIVERSITY 2003Jun.,26(3)241
NIDDM患者胰岛素受体底物-1
基因突变研究
张 勤
摘要:性。
1
,傅振英,赵学信,武贵臻,许道盛
2113
(新疆医科大学1基础医学院生物化学教研室,2第一附属医院心内科,3第一附属医院内分泌科,新疆 乌鲁木齐 830054)
目的:探讨胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因Gly971Arg突变与非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)的相关
方法:采用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法,对60例NIDDM患者和30例正
常个体IRS-1基因Gly971Arg突变进行筛查。结果:60例NIDDM患者中检测出2例Gly971Arg突变者,30例正常人中没有发现突变者。结论:IRS-1基因Gly971Arg突变在NIDDM患者中出现频率较正常人略高,Gly971Arg
突变对IRS-1活性的影响及其在NIDDM发病中的作用有待进一步研究。
关键词:非胰岛素依赖性糖尿病;IRS-1基因;基因突变
中图分类号:R587.1;R34 文献标识码:A 文章编号:1009-5551(2003)03-0241-03
非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)的发生有明
显的遗传倾向,分子病因学研究表明NIDDM存在遗传异质性。胰岛素受体底物-1(IRS-1)是一种信号蛋白,广泛分布于胰岛素敏感组织内,介导细胞对胰岛素等因子的反应,调节细胞的分化、生长和代谢,人IRS-1基因位于染色体2q36-37。Almind等[1]研究发现IRS-1基因编码链第971号密码子的序列存在GGG替换为AGG的突变,导致第971位氨基酸由Gly变为Arg(Gly971Arg),与丹麦白种人的NIDDM相关。Celi[2]报道Gly971Arg在墨西哥和高加索人的突变率较高且常见,该突变携带者血浆胰岛素及C肽水平较非携带者有显著降低。1994年新疆地区1.6万人(≥25岁)的普查结果显示,糖尿病患病率为4.5%,居全国首位。为了揭示IRS-1基因Gly971Arg突变与NIDDM的相关性,本研究运用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对糖尿病患者和正常人IRS-1基因Gly971Arg突变进行了筛查。
聚合酶、dNTPs、限制性核酸内切酶、DNAMarker均购自上海Sangon公司;PCR扩增仪(美国PE-2400);凝胶成像仪(美国Bio-Rad)。
1.3 引物的设计与合成 引物参照文献[3]的设计,由上海Sangon公司合成。特异性引物序列如下:(上游引物)5′-CTTCTGTCAGGTGTCCATCC-3′;(下游引物)5′-TGGCGAGGTGTCCACGTAGC-3′。扩增片段长度为262bp。1.4 白细胞基因组DNA的制备 取外周血3ml,EDTA-Na2抗凝,55℃蛋白酶K消化3h,饱和酚、酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)混合液抽提,无水乙醇沉淀后TE溶解。
1.5 PCR扩增 反应体系30μl:含基因组DNA
2+
0.45μg,Mg1.5mM,dNTPs0.2mM,上、下游引物各0.2μM,10×PCRbuffer3μl,1.5UTaq酶,超纯水补足体积。95℃预变性5min;94℃1min,59℃45s,72℃1min,35个循环;终末延伸72℃10min。扩增产物进行2%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,紫外检测仪检测。
1.6 限制性核酸内切酶酶解 反应体系10μl,PCR扩增产物7μl,BstN1内切酶20U,10×buffer2μl,混匀,37℃水解过夜,100℃灭活10。酶解产物经4%琼脂糖凝胶(含EB)电泳,紫min
外检测仪检测。野生型(Gly971/Gly971)酶切后可见158bp、81bp、23bp3个片段,杂合突变型(Gly971/Arg971)酶切后可见158bp、107bp、81、51bp、23bp5个片段,纯合突变型(Arg971bp
/Arg971)酶切后则可见107bp、81bp、51bp、23bp4个片段。
1 材料与方法
1.1 实验对象 按WHO1999年诊断标准选取农
机厂医院无亲缘关系的NIDDM患者60例,男性23例,女性37例,年龄(61.51±8.29)岁,体重指数(25.23±3.68)kg/m2,空腹血糖(9.03±3.88)mmol/L;正常人30例,未服任何影响糖代谢的药物,无糖尿病家族史,男性12例,女性18例,年龄(56.15±10.32)岁,体重指数(24.50±4.98)kg/m2,空腹血糖(5.60±0.86)mmol/L。90例均为汉族。
1.2 主要试剂和酶 蛋白酶K、饱和酚、TaqDNA
:(),女,,,:。
242新疆医科大学学报 JOURNALOFXINJIANGMEDICALUNIVERSITY 2003Jun.,26(3)
2 结果
2.1 扩增产物电泳检测结果 IRS-1基因PCR扩
增产物2%琼脂糖凝胶电泳检测见图1,产物为单一泳带,长度为262bp。2.2 PCR产物限制性核酸内切酶酶解电泳结果 IRS-1基因Gly971Arg突变致限制性内切酶BstN1位点增加,在158bp片段中产生1个新的酶切位点,生成107bp和51bp2个片段。4%琼脂糖凝胶电泳显示,90例受试者中仅在60例NIDDM中发现2例Gly971Arg突变者(图2)。
IRS-1的氨基酸顺序具有高度的种属和组织特异
性,氨基端都具有PH结构区,由3个β-折叠片段和1个α螺旋围绕疏水中心组成。PH结构区的构象发生变化,引起胰岛素刺激的酪氨酸磷酸化明显减少,IRS-1与下游蛋白结合下降,影响胰岛素信号传导,是胰岛素抵抗的一个病因。Ryohei等[5]报道IRS-1基因存在至少3种不同的多态性,该基因不同部位的变异确实对IRS-1的功能有影响;在丹麦、法国、芬兰、南印第安和意大利的NIDDM患者中,IRS-1基因Gly971Arg变异的发生率分别为11.6%、11.2%、7.5%、10.3%和22.6%。为了解IRS-1基因971号密码子点突变对NIDDM患者所起的作用,本研究采用PCR-RFLP法筛查了60例NIDDM患
[6]
者血DNA,发现2例突变者,突变率为3.3%,与台湾人相似,提示该基因的Gly971Arg多态性确实具有一定的遗传异质性,但该突变是否是NIDDM的重要遗传因素尚需进一步研究。
图1 IRS-1基因PCR扩增产物电泳图
[6]
M:marker(generuler100bpDNA) 1~6:扩增产物
(致谢:衷心感谢农机厂医院全体医护人员在标
本采集过程中所给予的大力支持和帮助)
参考文献:
[1] AlmindK,EjrbackC,VestergardH,etal.Aminoacidpoly-morphismofinsulinreceptorsubstrate-1innon-insulin-depen-dentmellitus[J].Lancet,1993,342:828.
[2] CeliFS.Molecularscanningformutationsintheinsulinrecep-torsubstrate-1geneinMexicanAmericanswithtype2dia-betesmellitus[J].DiabetesMetabResRer,2000,16(5):370-377.
[3] HitamnGA,HawramiK,MccarthyMI,etal.Insulinrecep-torsubstrate-1genemutationsinNIDDMimplicationforthestudyofpolygenicdisease[J].Dianetologia,1995,38:481.[4] 邵建华,高妍.胰岛素受体底物1及其信号传导作用[J].国外
医学内分泌学分册,1997,17:61-64.
[5] RyoheiYoshimura,EiichiAraki,SachikoUra,etal.Impact
ofnaturalIRS-1mutationsoninsulinsignals[J].Diabetes,1997,46:929-936.
[6] ChuangLM,LaiCS,JihYeh,etal.Noassociationbetween
thevariangoftheinsulinreceotursubstrate1geneandNID-DMintheTaiwanesepopulation[J].DiabetesCare,1996,19:446.
[收稿日期:2003-01-28]
图2 PCR产物的酶切产物电泳图
M:marker(pBR322/MspⅠ);1~6:酶切产物;6:突变带型
3 讨论
IRS-1是胰岛素信号胞内传导的重要分子。胰
岛素与胰岛素受体(INSR)的α亚单位相结合,诱导β亚单位酪氨酸残基磷酸化,并激活INSR酪氨酸激酶[3]。此时IRS-1与INSR的β亚单位相结合,酪氨酸激酶使IRS-1的酪氨酸残基磷酸化,使其与含SH2结构区的多种信号蛋白如PI3K、SHPTP2、和GRB-2/sem-5等结合,调节细胞代谢与生长。
[4]
Studyofmutationofinsulinreceptorsubstrate1genewith
type2diabetesmellitusinXinjiang
ZHANGQin,FUZhen-yin,ZHAOXue-xin,etal
(DepartmentofBiochemistry,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830054,China)
Abstract:Objective:ToexploretheassociationbetweentheGly971Argvariantoftheinsulinreceptorsub-:Detectionincode971oftheIRS-1strate1geneandtype2diabetesmullitusinXinjiang.Methods
(
新疆医科大学学报 JOURNALOFXINJIANGMEDICALUNIVERSITY 2003Jun.,26(3)245
综上所述,ET-1、C-myc、p53在缺氧肺组织中
异常高表达,在缺氧性损伤中起重要作用。用免疫组织化学方法检测ET-1、C-myc、p53的表达为围产儿肺缺氧性损伤的预防和临床治疗提供了可靠的分子生物学依据。
参考文献:
[1] 周志刚,郭芳.新生儿早期死亡的病理解剖分析及其与分娩因
素的相关性[J].国际医药卫生导报,2002,(6):63-64.[2] DupuisJ,SaewartDJ,CernacekP,etal.Humanpulmonary
circulateonisanimportantsiteforbothclearanceandproduceofendothelin-1[J].Circulation,1996,94:1578.
[3] 张文奎,乔骋,曾勇.吸入性损伤患者血浆内皮素-1测定的意
义[J].标记免疫分析和临床,2002,9(1):17-19.
[4] RidmordEM,CahillPA,PodgesR,etal.Regulationofen-dothelinrecaptorsbynitricoxideinculturedratvascularsmoothmusculecell[J].JCellularPhysiol,1996,166:469-479.
[5] 汪盛贤,于忠和,陈意生,等.内皮素-1介导的肺病变及其发生
机制探讨[J].解放军医学杂志,1998,23:54.
[6] 崔其亮.新生儿肺炎及缺氧、酸中毒与内皮素关系分析[J].中
华儿童保健杂志,1998,6(1):43-44.
[7] 陈琳.原癌基因C-myc和白血病[J].福建医科大学学报,
2000,(34):18-21.
[8] 康进朝,刘维永,蔡振洁,等.SD鼠未成熟心肌细胞缺氧/复氧
期C-fox,C-myc,mRNA的表达[J].第四军医大学学报,2002,21(5):586-588.
[9] BurnsTF,Ei-DeiryWS.Thep53pathwayandapoptosiss[J].
JCellPhysiol,1999,22(6):264-269.
[10] GottliebE,OrenM.p53facilitatesPRBcleavageinIL-3-de-:novelpro-apoptoticactivityofp53[J].EMBO,privedcells
1998,17(13):3587-3596.
[11] 陶清国,张珍祥,徐永健.慢性缺氧大鼠肺内(肺血管壁)细胞
增殖凋亡及C-myc、p53基因表达研究[J].中国应用生理学杂志,1999,4:23.
[12] WeissbergPL.TheendothelinpeptidesET-1,ET-2,ET-3
andsarafotoxinSEbareCo-mitogenicwithplatelet-derivedgrowthfactorvascularsmoothmusclecell[J].Atheroscle-rosis,1990,85(2-3):257.
[收稿日期:2003-01-04]
-1、C-myc、p53onfetallungTheeffectofhypoxiaonexpressionofET
LIUZhi-ying,LIUCun,XIEJing,etal
(DepartmentofPathology,DushanziHospital,833600,China)
:Objective:Toinvestingatetheeffectofhypoxiaonexpressionofendotheliosin(ET-1)、C-mycAbstract
andp53onfetallungtoexplorethepossiblemolecularbiologyofhypoxia.Methods:Thetissuesectionsfrom30casesofasphyxiaand22neonatalpulmonaryhyalinemembranediseaceand20relativelynomalhu-:Thepositivefrequentcymanpulmonarytissuewereanalyzedbyimmunohistochemistry(LSAB).Result
ofET-1、C-mycandp53was70.00%(21/30)、56.67%(17/30)、60.00%(18/30)、respectivelyincasesofasphyxiaand72.73%(16/22)、59.10%(13/22)、63.64%(14/21)respectivelyinhyalinemembranedis-ease.Therewerestatisticsignificancebetweenasphyxiaandnormallung;hyalinemembranediseaseand、C-mycandp53betweenas-normallung(P0.05).Conclusion:ET-1、C-mycandp53havehighlevelex-pressioninasphyxiaandhyalinemembramdisease.
Keywords:hypoxia;ET-1;C-myc;p53;fetal;pulmonarytissue;immunohistochemistry
(上接242页)
genewasperformedbyPCR-RFLP(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism)in60patientswithtype2diabetesmellitusand30unrelatednormalsubjectsinXinjing.AllofthemwereHanChinese.Results:ThefrequencyofGly971ArgvariantoftheIRS-1geneintype2diabeteswas3.3%,whichwaslowerthanfrequenciesreportedinwhitepopulations.Whilenonewasfoundincontrols.Con-:TheGly971ArgvariantoftheIRS-1genemayresultintheabnormalconformationofIRS-1,andclusion
moreworkisneededtostudyontheassociationbetweentheGly971ArgvariantofIRS-1geneandthede-velopmentoftype2diabetesmellitusinXinjiangarea.Keywords:type2diabetesmellitus;gene;mutation
新疆医科大学学报 JOURNALOFXINJIANGMEDICALUNIVERSITY 2003Jun.,26(3)241
NIDDM患者胰岛素受体底物-1
基因突变研究
张 勤
摘要:性。
1
,傅振英,赵学信,武贵臻,许道盛
2113
(新疆医科大学1基础医学院生物化学教研室,2第一附属医院心内科,3第一附属医院内分泌科,新疆 乌鲁木齐 830054)
目的:探讨胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因Gly971Arg突变与非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)的相关
方法:采用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法,对60例NIDDM患者和30例正
常个体IRS-1基因Gly971Arg突变进行筛查。结果:60例NIDDM患者中检测出2例Gly971Arg突变者,30例正常人中没有发现突变者。结论:IRS-1基因Gly971Arg突变在NIDDM患者中出现频率较正常人略高,Gly971Arg
突变对IRS-1活性的影响及其在NIDDM发病中的作用有待进一步研究。
关键词:非胰岛素依赖性糖尿病;IRS-1基因;基因突变
中图分类号:R587.1;R34 文献标识码:A 文章编号:1009-5551(2003)03-0241-03
非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)的发生有明
显的遗传倾向,分子病因学研究表明NIDDM存在遗传异质性。胰岛素受体底物-1(IRS-1)是一种信号蛋白,广泛分布于胰岛素敏感组织内,介导细胞对胰岛素等因子的反应,调节细胞的分化、生长和代谢,人IRS-1基因位于染色体2q36-37。Almind等[1]研究发现IRS-1基因编码链第971号密码子的序列存在GGG替换为AGG的突变,导致第971位氨基酸由Gly变为Arg(Gly971Arg),与丹麦白种人的NIDDM相关。Celi[2]报道Gly971Arg在墨西哥和高加索人的突变率较高且常见,该突变携带者血浆胰岛素及C肽水平较非携带者有显著降低。1994年新疆地区1.6万人(≥25岁)的普查结果显示,糖尿病患病率为4.5%,居全国首位。为了揭示IRS-1基因Gly971Arg突变与NIDDM的相关性,本研究运用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对糖尿病患者和正常人IRS-1基因Gly971Arg突变进行了筛查。
聚合酶、dNTPs、限制性核酸内切酶、DNAMarker均购自上海Sangon公司;PCR扩增仪(美国PE-2400);凝胶成像仪(美国Bio-Rad)。
1.3 引物的设计与合成 引物参照文献[3]的设计,由上海Sangon公司合成。特异性引物序列如下:(上游引物)5′-CTTCTGTCAGGTGTCCATCC-3′;(下游引物)5′-TGGCGAGGTGTCCACGTAGC-3′。扩增片段长度为262bp。1.4 白细胞基因组DNA的制备 取外周血3ml,EDTA-Na2抗凝,55℃蛋白酶K消化3h,饱和酚、酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)混合液抽提,无水乙醇沉淀后TE溶解。
1.5 PCR扩增 反应体系30μl:含基因组DNA
2+
0.45μg,Mg1.5mM,dNTPs0.2mM,上、下游引物各0.2μM,10×PCRbuffer3μl,1.5UTaq酶,超纯水补足体积。95℃预变性5min;94℃1min,59℃45s,72℃1min,35个循环;终末延伸72℃10min。扩增产物进行2%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,紫外检测仪检测。
1.6 限制性核酸内切酶酶解 反应体系10μl,PCR扩增产物7μl,BstN1内切酶20U,10×buffer2μl,混匀,37℃水解过夜,100℃灭活10。酶解产物经4%琼脂糖凝胶(含EB)电泳,紫min
外检测仪检测。野生型(Gly971/Gly971)酶切后可见158bp、81bp、23bp3个片段,杂合突变型(Gly971/Arg971)酶切后可见158bp、107bp、81、51bp、23bp5个片段,纯合突变型(Arg971bp
/Arg971)酶切后则可见107bp、81bp、51bp、23bp4个片段。
1 材料与方法
1.1 实验对象 按WHO1999年诊断标准选取农
机厂医院无亲缘关系的NIDDM患者60例,男性23例,女性37例,年龄(61.51±8.29)岁,体重指数(25.23±3.68)kg/m2,空腹血糖(9.03±3.88)mmol/L;正常人30例,未服任何影响糖代谢的药物,无糖尿病家族史,男性12例,女性18例,年龄(56.15±10.32)岁,体重指数(24.50±4.98)kg/m2,空腹血糖(5.60±0.86)mmol/L。90例均为汉族。
1.2 主要试剂和酶 蛋白酶K、饱和酚、TaqDNA
:(),女,,,:。
242新疆医科大学学报 JOURNALOFXINJIANGMEDICALUNIVERSITY 2003Jun.,26(3)
2 结果
2.1 扩增产物电泳检测结果 IRS-1基因PCR扩
增产物2%琼脂糖凝胶电泳检测见图1,产物为单一泳带,长度为262bp。2.2 PCR产物限制性核酸内切酶酶解电泳结果 IRS-1基因Gly971Arg突变致限制性内切酶BstN1位点增加,在158bp片段中产生1个新的酶切位点,生成107bp和51bp2个片段。4%琼脂糖凝胶电泳显示,90例受试者中仅在60例NIDDM中发现2例Gly971Arg突变者(图2)。
IRS-1的氨基酸顺序具有高度的种属和组织特异
性,氨基端都具有PH结构区,由3个β-折叠片段和1个α螺旋围绕疏水中心组成。PH结构区的构象发生变化,引起胰岛素刺激的酪氨酸磷酸化明显减少,IRS-1与下游蛋白结合下降,影响胰岛素信号传导,是胰岛素抵抗的一个病因。Ryohei等[5]报道IRS-1基因存在至少3种不同的多态性,该基因不同部位的变异确实对IRS-1的功能有影响;在丹麦、法国、芬兰、南印第安和意大利的NIDDM患者中,IRS-1基因Gly971Arg变异的发生率分别为11.6%、11.2%、7.5%、10.3%和22.6%。为了解IRS-1基因971号密码子点突变对NIDDM患者所起的作用,本研究采用PCR-RFLP法筛查了60例NIDDM患
[6]
者血DNA,发现2例突变者,突变率为3.3%,与台湾人相似,提示该基因的Gly971Arg多态性确实具有一定的遗传异质性,但该突变是否是NIDDM的重要遗传因素尚需进一步研究。
图1 IRS-1基因PCR扩增产物电泳图
[6]
M:marker(generuler100bpDNA) 1~6:扩增产物
(致谢:衷心感谢农机厂医院全体医护人员在标
本采集过程中所给予的大力支持和帮助)
参考文献:
[1] AlmindK,EjrbackC,VestergardH,etal.Aminoacidpoly-morphismofinsulinreceptorsubstrate-1innon-insulin-depen-dentmellitus[J].Lancet,1993,342:828.
[2] CeliFS.Molecularscanningformutationsintheinsulinrecep-torsubstrate-1geneinMexicanAmericanswithtype2dia-betesmellitus[J].DiabetesMetabResRer,2000,16(5):370-377.
[3] HitamnGA,HawramiK,MccarthyMI,etal.Insulinrecep-torsubstrate-1genemutationsinNIDDMimplicationforthestudyofpolygenicdisease[J].Dianetologia,1995,38:481.[4] 邵建华,高妍.胰岛素受体底物1及其信号传导作用[J].国外
医学内分泌学分册,1997,17:61-64.
[5] RyoheiYoshimura,EiichiAraki,SachikoUra,etal.Impact
ofnaturalIRS-1mutationsoninsulinsignals[J].Diabetes,1997,46:929-936.
[6] ChuangLM,LaiCS,JihYeh,etal.Noassociationbetween
thevariangoftheinsulinreceotursubstrate1geneandNID-DMintheTaiwanesepopulation[J].DiabetesCare,1996,19:446.
[收稿日期:2003-01-28]
图2 PCR产物的酶切产物电泳图
M:marker(pBR322/MspⅠ);1~6:酶切产物;6:突变带型
3 讨论
IRS-1是胰岛素信号胞内传导的重要分子。胰
岛素与胰岛素受体(INSR)的α亚单位相结合,诱导β亚单位酪氨酸残基磷酸化,并激活INSR酪氨酸激酶[3]。此时IRS-1与INSR的β亚单位相结合,酪氨酸激酶使IRS-1的酪氨酸残基磷酸化,使其与含SH2结构区的多种信号蛋白如PI3K、SHPTP2、和GRB-2/sem-5等结合,调节细胞代谢与生长。
[4]
Studyofmutationofinsulinreceptorsubstrate1genewith
type2diabetesmellitusinXinjiang
ZHANGQin,FUZhen-yin,ZHAOXue-xin,etal
(DepartmentofBiochemistry,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830054,China)
Abstract:Objective:ToexploretheassociationbetweentheGly971Argvariantoftheinsulinreceptorsub-:Detectionincode971oftheIRS-1strate1geneandtype2diabetesmullitusinXinjiang.Methods
(
新疆医科大学学报 JOURNALOFXINJIANGMEDICALUNIVERSITY 2003Jun.,26(3)245
综上所述,ET-1、C-myc、p53在缺氧肺组织中
异常高表达,在缺氧性损伤中起重要作用。用免疫组织化学方法检测ET-1、C-myc、p53的表达为围产儿肺缺氧性损伤的预防和临床治疗提供了可靠的分子生物学依据。
参考文献:
[1] 周志刚,郭芳.新生儿早期死亡的病理解剖分析及其与分娩因
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[3] 张文奎,乔骋,曾勇.吸入性损伤患者血浆内皮素-1测定的意
义[J].标记免疫分析和临床,2002,9(1):17-19.
[4] RidmordEM,CahillPA,PodgesR,etal.Regulationofen-dothelinrecaptorsbynitricoxideinculturedratvascularsmoothmusculecell[J].JCellularPhysiol,1996,166:469-479.
[5] 汪盛贤,于忠和,陈意生,等.内皮素-1介导的肺病变及其发生
机制探讨[J].解放军医学杂志,1998,23:54.
[6] 崔其亮.新生儿肺炎及缺氧、酸中毒与内皮素关系分析[J].中
华儿童保健杂志,1998,6(1):43-44.
[7] 陈琳.原癌基因C-myc和白血病[J].福建医科大学学报,
2000,(34):18-21.
[8] 康进朝,刘维永,蔡振洁,等.SD鼠未成熟心肌细胞缺氧/复氧
期C-fox,C-myc,mRNA的表达[J].第四军医大学学报,2002,21(5):586-588.
[9] BurnsTF,Ei-DeiryWS.Thep53pathwayandapoptosiss[J].
JCellPhysiol,1999,22(6):264-269.
[10] GottliebE,OrenM.p53facilitatesPRBcleavageinIL-3-de-:novelpro-apoptoticactivityofp53[J].EMBO,privedcells
1998,17(13):3587-3596.
[11] 陶清国,张珍祥,徐永健.慢性缺氧大鼠肺内(肺血管壁)细胞
增殖凋亡及C-myc、p53基因表达研究[J].中国应用生理学杂志,1999,4:23.
[12] WeissbergPL.TheendothelinpeptidesET-1,ET-2,ET-3
andsarafotoxinSEbareCo-mitogenicwithplatelet-derivedgrowthfactorvascularsmoothmusclecell[J].Atheroscle-rosis,1990,85(2-3):257.
[收稿日期:2003-01-04]
-1、C-myc、p53onfetallungTheeffectofhypoxiaonexpressionofET
LIUZhi-ying,LIUCun,XIEJing,etal
(DepartmentofPathology,DushanziHospital,833600,China)
:Objective:Toinvestingatetheeffectofhypoxiaonexpressionofendotheliosin(ET-1)、C-mycAbstract
andp53onfetallungtoexplorethepossiblemolecularbiologyofhypoxia.Methods:Thetissuesectionsfrom30casesofasphyxiaand22neonatalpulmonaryhyalinemembranediseaceand20relativelynomalhu-:Thepositivefrequentcymanpulmonarytissuewereanalyzedbyimmunohistochemistry(LSAB).Result
ofET-1、C-mycandp53was70.00%(21/30)、56.67%(17/30)、60.00%(18/30)、respectivelyincasesofasphyxiaand72.73%(16/22)、59.10%(13/22)、63.64%(14/21)respectivelyinhyalinemembranedis-ease.Therewerestatisticsignificancebetweenasphyxiaandnormallung;hyalinemembranediseaseand、C-mycandp53betweenas-normallung(P0.05).Conclusion:ET-1、C-mycandp53havehighlevelex-pressioninasphyxiaandhyalinemembramdisease.
Keywords:hypoxia;ET-1;C-myc;p53;fetal;pulmonarytissue;immunohistochemistry
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genewasperformedbyPCR-RFLP(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism)in60patientswithtype2diabetesmellitusand30unrelatednormalsubjectsinXinjing.AllofthemwereHanChinese.Results:ThefrequencyofGly971ArgvariantoftheIRS-1geneintype2diabeteswas3.3%,whichwaslowerthanfrequenciesreportedinwhitepopulations.Whilenonewasfoundincontrols.Con-:TheGly971ArgvariantoftheIRS-1genemayresultintheabnormalconformationofIRS-1,andclusion
moreworkisneededtostudyontheassociationbetweentheGly971ArgvariantofIRS-1geneandthede-velopmentoftype2diabetesmellitusinXinjiangarea.Keywords:type2diabetesmellitus;gene;mutation